定義
羅丹明B(Rhodamine B),又名四乙基羅丹明,俗名玫瑰紅B。羅丹明B是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料；通常套用的是它的氯化物。
Rhodamine B英文名：Rhodamine B；縮寫為Rhod·B或RhB,
分子式：C28H31ClN2O3；
分子量：479.0175；
物理性狀：深紅色結晶或紅棕色粉末。溶於約70分水，10分醇，150分氯仿，水溶液為藍紅色，稀釋後有強烈螢光，微溶於鹽酸和氫化鈉溶液。約260℃熔結，約280℃熔融。最大吸收波長451nm。半數致死量(小鼠，腹腔)150mg/kg。
化學形狀：鹼性玫瑰精外觀是亮綠色閃光小結晶狀粉末。溶於水及酒精中（呈帶強螢光的藍光紅色溶液），易溶於溶纖素，微溶於丙酮。遇濃硫酸呈黃光棕色，有強的綠色螢光，稀釋後呈大紅色轉為藍光紅色和橙色；遇濃硝酸呈金黃色。其水溶液加氫氧化鈉溶液加熱呈玫瑰紅絨毛狀沉澱，加鹽酸有細微綠色結晶分離。
熔點：210-211 °C
儲存：密封陰涼乾燥保存。
特徵及用途
羅丹明B染色試劑羅丹明B亮綠色閃光結晶粉狀物，溶於70份冰水中，10份乙醇中，150份氯仿中，呈帶強螢光的藍光紅色溶液，易溶於溶纖素，微溶於丙酮；遇濃硫酸呈黃光棕色，有強的綠色螢光，稀釋後呈大紅色轉為藍光紅色和橙色。其水溶液加氫氧化鈉後加熱，形成玫瑰紅絨毛狀沉澱。
主要用於造紙工業染蠟光紙、打字紙、有光紙等；與磷鎢鉬酸作用生成色淀，用於製造油漆、圖畫等顏料、也可用於腈綸、麻、蠶絲等織物以及麥稈、皮革製品的染色。任何染料都有脂團，所以至少可以透過皮膚，所以在高濃度時畢竟會有所謂的毒性，還是要注意，至於低濃度，至少也可以透皮膚的。
光度測定金、鎵、汞、銻(V)、鉈(III),螢光測定錳、鈷等,比 色測定鎘。氧化 還原指示劑用以滴定錫、銻、鈮、鉭的沉澱劑。生物染色劑。系列雷射染料。
檢測方法
檢測原理
羅丹明B具有脂溶性，被用作調味品（主要是辣椒粉和辣椒油）染色劑。使用了被污染的調味品製作食品時會造成殘留。調味品使用羅丹明B染色時含量較高，甚至直接摻入，可進行現場檢測。食品中因其含量較低，需送實驗室檢測。現場檢測中使用非極性有機溶劑（例正己烷、正己烷+丙酮等）將其溶解並提取出，提取液流過中性氧化鋁固相萃取小柱吸附羅丹明B，用非極性有機溶劑（例正己烷）淋洗小柱，洗脫樣品油脂和食品內源性干擾物，用肉眼可觀測到在小柱上出現鮮亮的粉紅色條帶，判定為可疑樣品，該樣品需送實驗室作進一步確證檢驗。實驗室檢測法仍然採用非極性有機溶劑（例正己烷、正己烷+丙酮等）將羅丹明B 從食品中溶解並提取出，提取液流過中性氧化鋁固相萃取小柱吸附羅丹明B，用非極性有機溶劑（例正己烷）洗脫樣品油脂和食品內源性干擾物，再用極性有機溶劑（例甲醇）將羅丹明B從小柱上洗脫並收集，用反相高效液相色譜儀-紫外/可見光檢測器進行定性定量檢測。
Rhodamine B試劑和材料
層析用中性氧化鋁（100目），用前於105℃烘2小時，取下置乾燥器中冷至室溫，裝入玻璃瓶中密閉放置。
正己烷（分析純）；
丙酮（分析純）；
甲醇（色譜純）；
20%丙酮的正己烷液：取100ml丙酮加400ml正己烷混合，作為羅丹明B的提取液和淨化液。
氧化鋁固相萃取小柱：取5 ml塑膠注射器管，下連線埠塞入小塊脫脂棉，裝入處理好的氧化鋁約3cm高，放置備用。
羅丹明B標準溶液：稱取羅丹明B （分析純試劑 瀋陽試劑三廠）5.0mg，用20%丙酮的正己烷液溶解並定容至50ml，配成含量為100ug/ml的標準儲備液。取此液0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0ml，用20%丙酮的正己烷液稀釋並定容至50ml，配成濃度為 0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ug/ml標準系列溶液。
現場快速檢測方法
辣椒粉：取辣椒粉一小勺（約5g）放入小燒杯中，加入約40ml含20%丙酮的正己烷，搖動或攪拌2分鐘，靜置。取5 ml塑膠注射器套管，下連線埠塞入小塊脫脂棉，將事先處理好的氧化鋁倒入注射器管中約3cm高，做成氧化鋁固相萃取小柱，待樣品杯上方澄清後，慢慢倒入小柱中，下端接一廢液杯，視顏色深淺倒入2-5ml，注意不要倒入太多，保證小柱的中下部仍為白色， 此時，含羅丹明B的樣品在柱上部會出現鮮亮的粉紅色的螢光條帶，條帶邊緣清晰，粉紅色隨含量的增加而加深和加寬，不含羅丹明B的樣品提取液不會出現粉紅色條帶，只會出現黃紅色的界面不清晰的寬頻，然後用含20%丙酮的正己烷20ml慢慢倒入小柱，粉紅色的條帶不下移，但更清晰，其餘的黃紅色帶下移，可大部分被洗脫出，即可判斷為含羅丹明B的可疑樣品。
辣椒油：取辣椒油一小勺（約2g）放入小燒杯中，加入約10ml正己烷（3.2），混勻。按上述“取5 ml塑膠注射器套管，……即可判斷為含羅丹明B的可疑樣品。”操作。
判定：初步判斷為含羅丹明B的可疑樣品需送實驗室中進行液相色譜確證檢驗。
Rhodamine B實驗室檢測方法
儀器： 高效液相色譜儀（雙泵、紫外/可見光檢測器）
色譜柱：C18 4.6mm X 15cm（5μm）
提取和純化
辣椒粉：取辣椒粉1g，加入20ml含20%丙酮的正己烷，震搖10分鐘，靜置或過濾使分離出上層清液，殘渣加入10ml含20%丙酮的正己烷重複提取一次，合併2次提取液，混勻，用滴管將上清液加入氧化鋁小柱中[小柱預先用5ml提取液潤濕]，視顏色深淺決定上柱量，保證上完樣的小柱中下部仍為白色，含羅丹明B的樣品提取液在柱上部會出現鮮亮的粉紅色的螢光條帶，且粉紅條帶隨含量的增加而加深和加寬，不含羅丹明B的樣品提取液不會出現粉紅色條帶，只會出現黃紅色的不清晰的寬頻，用含20%丙酮的正己烷洗小柱，粉紅色的條帶不下移，但更清晰，其餘的黃紅色帶下移可大部分被洗脫出，可判斷為含羅丹明B的可疑樣品，待洗柱的流出液無色時，滴入5-10ml甲醇，將羅丹明B色帶洗下並收集，用甲醇定容後，注入高效液相色譜儀進行確認。
辣椒油：稱取辣椒油1g，加入10ml含20%丙酮的正己烷，混合均勻後滴入氧化鋁小柱中，按照上述“用滴管將上清液加入氧化鋁小柱……注入高效液相色譜儀進行確認”進行操作。
調製玫瑰紅染料 其它食品：對於使用了紅辣椒油（粉）調味的食品（如紅油豆製品、紅油魚乾等）稱取10-20g，用20%丙酮的正己烷洗下紅油（粉），或將樣品與洗脫液攪成勻漿將羅丹明B溶解提取出，將樣品液靜置或離心，分出有機相，根據水分的多少加入適量無水硫酸鈉脫水，按照上述“用滴管將上清液加入氧化鋁小柱……注入高效液相色譜儀進行確認”進行操作。含量少的樣品因粉紅色條帶太窄和顏色較淡肉眼看不清楚，仍可採用上述辦法，進一步用20%丙酮的正己烷洗滌小柱至流出液無色時，滴入5-10ml甲醇，將羅丹明B色帶洗下並收集，經濃縮後，注入高效液相色譜儀進行確證檢驗。
液相色譜條件
色譜柱：C18 4.6mm X 15cm（5μm） 進樣 5ul
流動相：75%甲醇水溶液 1ml/min
檢測器: 紫外線/可見光（UV/VIS）檢測器；
波長：550nm
定性定量：羅丹明B標準溶液保留時間定性，外標法定量。
羅丹明B調料結果計算：
Y = C×V/M
Y——樣品中羅丹明B的含量（mg/kg）
C——從標準曲線上查得的羅丹明B的濃度（ug/ml）
V——測試樣品總定容體積（ml）
M——樣品的稱樣量（g）
注意事項：
①使用C18柱的性能有差異，流動相濃度應略作調整。
②在本法所給分離條件下，樣品基質在羅丹明B附近無干擾峰，其他許多紅色偶氮染料均可在羅丹明B之後出峰，注意調整這些干擾峰與羅丹明B分離度，干擾的成分為：蘇丹橙G、對位紅、蘇丹紅7B、蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ。
酸中的套用
玫瑰紅Ｂ做衣服染料 採用一種在樹脂膜中測試光生酸劑產酸量的方法，測試了膜中光生酸劑的產酸率。以羅丹明B為試蹤劑，在酸性條件下羅丹明B的紫外吸收隨酸濃度而變化，通過其紫外吸光度的改變來反映酸度的變化。用紫外分光光度計分別測量鹽酸、三氟甲磺酸在不同濃度時羅丹明B特徵吸收的變化，選取酸濃度與羅丹明的特徵吸收的變化量呈線性關係的線段部分作為標準工作曲線。根據標準工作曲線及推導出的公式，通過計算就可以得出光生酸劑曝光產生的酸量。
食物中毒
玫瑰紅B在食物中 