苜蓿黃萎病菌學名 Verticillium albo-atrum Reinke&Berthold
異名 V.albo-atrum var.coespitosum Wollenw.
V.albo-atrum var.coespitosum f.pallens Wollenw
V.albo-atrum var.tuberosum Ruooph
英文名 Verticillium wilt of alfalfa
分類地位 半知菌亞門(Deuteromyootina)，絲孢綱(Hyphomycetes)，絲孢目(Hyphomycetales)，淡色菌科(Moniliaceae)，輪枝孢屬(Verticillium)。
分布
最早於1918年發現於瑞典、第二次世界大戰前後傳入西歐大陸和英國並進而向東歐、南歐擴展。1962年曾一度傳入加拿大，但未能定殖。1976年突然在美國華盛頓州哥倫比亞河流域發現大批病株，翌年加拿大大不列顛哥倫比亞省也發現多處病田。1980年傳入日本北海道。該病菌現分布在日本、歐洲各國、加拿大（不列顛哥倫比亞、阿爾伯特、薩斯喀徹溫、安大略、新斯科舍、愛德華王子島、新布瑞斯威克等省）、美國（華盛頓、俄勒岡、愛達荷、蒙大拿、威斯康星、明尼蘇達、賓夕法尼亞、紐約、懷俄明等州）、墨西哥、紐西蘭。
寄主植物
黃萎輪枝孢的寄主植物多達660餘種，但侵染苜蓿的菌系寄主範圍相對狹窄，具有較強的寄主專化性。已發現黃萎輪枝孢苜蓿分離菌系，能侵染苜蓿、蠶豆、馬鈴薯、草莓、冠狀岩黃芪(Hedysarum cononarium)和紅花菜豆等，表現輕重不同的症狀。羽扇豆、豌豆、驢喜豆、大豆、紅三葉草、白三葉草、草木樨、羅馬甜瓜(Cucumis melc var.cantalupensis)、茄子、忽布、西瓜等帶菌但不表現症狀。Busch和Smith（1982）人工接種，結果表明月豆、花生、雜三葉草和茄子等都表現嚴重症狀。
生物學特性
黃萎輪枝孢在PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基)和MA（麥芽浸汁瓊脂培養基）平板上，菌落白色至淺灰色，絨毛狀，後因形成黑色休眠菌絲，菌落中部變黑褐色。分生孢子梗直立，有隔、無色，至淡色，但在植物基質上產生的分生孢子梗基部膨大暗色。梗上每節輪生2～4個小梗，可有 1～3輪。小梗20～30(－50)×1.4～3.2μm，其端部（產孢瓶體）連續產生分生孢子，聚集成無色或淡色易散的頭狀孢子球。有時小梗發生二次分枝。分生孢子橢圓形、圓筒形，無色。單孢，但少數孢子有１隔，大小為3.5～10.5(－12.5)×2～4μm。本菌產生暗褐色至黑色休眠菌絲，直徑3～7μm,分隔規則，隔膜間膨大，呈念珠狀，有時集結成菌絲結或瘤狀菌絲體，不產生厚垣孢子和微菌核。
黃萎輪枝孢在瓊脂培養基平板上的生長適溫為22.5℃，在30℃時不能生長。但是，苜蓿分離菌系的生長適溫較高，為25℃在20～25℃範圍內生長良好，在 15℃和27℃生長較差，在５℃和33℃時停止生長。在PLYA（梅乾煎汁酵母瓊脂培養基）平板上培養，溫度為20～27℃，培養20天后生成暗色菌絲體，培養溫度為10℃或15℃時，延遲數周后，方能形成。
傳播途徑
苜蓿黃萎病菌傳播途徑較多，種子帶菌是黃萎病菌遠距離傳播、特別是傳入無病地區的主要途徑。病區種子普遍帶菌。帶菌方式除前人報導的種子表面帶菌和混雜病株殘片外，美國和加拿大學者都證實種子內部帶菌。據 christen(1982)測定，變色小種子內部帶菌率高達25%，大小正常的種子帶菌率甚低，帶菌部位為種皮外珠被的骨狀石細胞，種子間夾雜的病株莖桿、花梗和莢的碎片均帶。此外，病田收割的苜蓿乾草和加工製成的脫水苜蓿粉也都帶菌，病菌乾燥處理後仍然存活，有可能進行中、遠距離的傳播。
苜蓿黃萎病是典型的土傳病害，農業機械工具和人畜攜帶病田土壤和病株殘體是最有效的田塊間傳播途徑。病原菌通過羊的消化道後仍能存活，因而飼餵病草後得到的畜糞也可傳病。田間病株周圍土壤帶菌，鄰近健株根系與病株根系或帶菌土壤直接接觸後可被病菌侵染使田間病株不斷增多。
苜蓿黃萎病菌還可由風、灌溉水和昆蟲傳播。田間上一季遺留的病株殘茬和當季被侵染但已壞死的苜蓿葉片、葉柄和莖桿有溫濕條件下都能產生分生孢子梗和分生孢子，由氣流傳播或灌溉水傳播引起再侵染。Huang等(1981)首先發現昆蟲可傳播分生孢子，豌豆蚜(Acyrthosiphon plsum)、苜蓿象甲(Hypetapostica)、切葉蜂(Megachile rotundata)以及其他多種昆蟲都是有效的傳病介體。
苜蓿黃萎病初侵染菌源主要來自土壤中病殘體和帶菌種子，病原菌由根部侵入並迅速進入寄主維管束組織，在導管中產生孢子和菌絲體，傳輸擴展到整個莖部，造成系統發病。在當季收割後的殘枯上和病株已壞死的莖、葉上都能產生分生孢子，經風、雨、流水和昆蟲傳播後進行再侵染。孢子降落在沒有傷痕的葉片表面，不能系統侵染和表現症狀。人工接種試驗表明，葉片傷後接種，可以發生系統侵染，出現典型症狀。在系統發病植株中，病原菌可由維管束進入莢和種皮，造成種子內部帶菌。另外，苜蓿切葉蜂等授粉昆蟲，可將病原菌分生孢子傳給花器，病原菌定殖在柱頭和花柱頂部，潛伏下來，當莢變黃時，才由殘留花柱組織侵染莢和種皮，也可能造成種子內部帶菌。
種植感病品種，土壤帶菌量大，田間郁蔽，灌溉增多、田間積水，天氣涼爽多濕等因素都導致黃萎病嚴重發生。
檢驗方法
禁止調運和種植疫區生產的種子，禁止運銷疫區的苜蓿飼草和草製品。由發病地區引進苜蓿切葉蜂（巢）時，也應給以鑑定，防止傳入病原菌。歐、美國家曾長期套用福美雙拌種，防止商品種子傳播黃萎病菌，福美雙處理只對種子表面傳帶的病原菌有效，不能防止種子內部帶菌傳病，現在尚缺乏實用的種子消毒方法。對於原產地不詳，原產地發病情況不明或認為有可能帶菌的商品種子，應實行種子帶菌檢驗，可採用以下種子帶菌檢驗方法：
瓊脂培養基檢驗法
供檢樣品種子用含2%有效氯的次氯酸鈉溶液或其他消毒劑表面滅菌後，用無菌水充分洗滌，置於PLYA培養基或Christen選擇性培養基平板上，保持22℃，培養14天左右，根據菌落特點和分離菌形態，檢出帶菌種子。檢查時由培養皿底部觀察，帶菌種子周圍的菌落有暗色休眠菌絲體形成的輻射狀結構。必要時可挑取病原菌鏡檢鑑定。
PLYA 培養基（簡稱梅乾煎汁培養基）配方如下：梅乾煎汁100ml、酵母浸膏1g、乳糖5g、瓊脂30g、蒸餾水900ml。製取梅乾煎汁需將50g梅乾切成小片，在100ml水中煮沸30分鐘，梅乾渣滓榨出汁液後棄去，煎汁調至pH5.8～6.0備用。
Christen 選擇性培養基配方如下：在1000ml蒸餾水中加入L－山梨糖2g、 L－天門冬素2g、K2HPO41g、KCl0.5g、MgSO4·7H2O0.5g、Fe-Na-EDTA0.01g、 75%五氯硝基苯1g（有效成分）、牛膽汁0.5、NaB4O7·10H2O1g、鏈黴素0.3g，高壓滅菌後pH值調至5.7。2,4-D吸水紙培養檢驗法 用0.2%2,4-D鈉鹽溶液浸漬吸水紙（濾紙），然後將吸水紙鋪在9cm直徑的塑膠培養皿底部，作成培養床。苜蓿種子不經表面消毒直接置床，每皿等距植入25粒種子，然後將培養皿移入20～25℃條件下培養。每晝夜用黑光燈（或日光燈）照明12小時，10天后取出培養皿，用實體顯微鏡(25～50×)逐粒檢查種子，根據菌落特徵，主要是輪枝狀分生孢子梗和分生孢子著生的整體形象，檢出帶菌種子。上述瓊脂培養基檢驗法適於檢驗內部帶菌種子，對瘦小變色的種子應作重點檢查。若必需檢查種子外錶帶菌，則可先用滅菌水洗滌種子，取定量洗滌液在 Czapek培養基平板上展布培養，然後選取類似輪枝孢菌落，挑取孢子接種PLYA培養基或Christen選擇性培養基，作進一步檢查。2,4-D吸水紙培養法適於快速檢驗大量種子，所檢出的具有輪枝結構的帶菌種子，有可能帶有其他種類的輪枝孢屬真菌或類似菌，需要時亦可挑取孢子接種瓊脂培養基，進一步鑑定。
有關檢疫規定
苜蓿黃萎病是我國公布的《中華人民共和國進境植物檢疫危險性病、蟲雜草名錄》中規定的一類危險性病害，應嚴格限制引進來自疫區的苜蓿種子，限制輸入來自疫區的苜蓿飼草和草製品。由疫區引進苜蓿切葉蜂（巢）時，應嚴格限制引進數量，並經入境口岸檢查，發現帶菌者，指定使用地點，進行檢疫監督。
中國進境植物檢疫危險性病蟲草
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