成分藥理
藥品成分
每1g眼膏含鹽酸金黴素約0.005g，輔料為：液狀石蠟、白色凡士林。
藥理毒理
多年來由於四環素類的廣泛套用,臨床常見病原菌對金黴素耐藥現象嚴重，葡萄球菌等革蘭陽性菌及多數腸桿菌科細菌耐藥。本品與四
蛋白質藥代動力
學本品為局部用藥，很少吸收。製劑規格
眼膏：0.5%。藥品使用
適應症
金黴素用於敏感金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌等革蘭陽性菌及流感嗜血桿菌等敏感革蘭陰性菌所致淺表眼部感染的治療；也可用於沙眼衣原體所致沙眼
金黴素用法和用量
塗入眼瞼內，每日1～2次，最後一次宜在睡前使用。
測量鑑定
藥品鑑別
在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品主峰的保留時間應與鹽酸金黴素對照品主峰的保留時間一致。
藥品檢查
應符合眼膏劑項下有關的各項規定（附錄Ⅰ G）。
含量測定
取本品約2g，精密稱定，置分液漏斗中，加乙醚25ml，振搖使基質溶解，用0.1mol/L鹽酸溶液提取3 次，每次10ml，
乙醇禁忌注意
不良反應
水腫1、輕微刺激感。
2、偶見過敏反應，出現充血，眼癢，水腫等症狀。
藥品禁忌
有四環素類藥物過敏史者禁用。注意事項
急性或慢性沙眼的療程應為1～2月或更長，眼膏可作為夜間治療用藥，以保持感染部位與藥物接觸較長時間。鹽酸金黴素眼膏不但只對眼病有效，人體小面積的細菌感染基本都可以治癒，如鼻腔潰瘍、皮膚發炎、膿瘡等。
眼膏的妙用
牛胰島素2、角膜炎角膜是指黑眼珠前面的一層透明薄膜，一旦發炎，應立即塗金黴素眼膏治療。
3、偷針眼醫學上稱為麥粒腫，切勿用手擠壓，以免造成嚴重併發症。在它尚未形成膿腫前，每日熱敷3次，每次20分鐘，然後塗金黴素眼膏，每日2～3次。
4、爛口角當口角出現糜爛時，一方面服用核黃素（維生素b2）治療，另一方面用棉簽蘸溫開水洗滌傷口，揩乾，再抹上金黴素眼膏，可較快癒合。
5、癤腫鼻黏膜有小結節脹痛時，可用藥棉蘸取金黴素眼膏塗於鼻腔痛處，並輕壓鼻子，促使它吸收。
6、乾裂冬季有些人手足發生乾裂現象，應先用熱水洗淨揩乾，再塗上金黴素眼膏，用膠布固定，可較快癒合。
雜質含量
眼結膜
金黴素
金黴素鹽酸金黴素在精製過程中需加入溶媒乙醇，殘留乙醇的濃度若過高將對人體造成不同程度的損害，為了控制乙醇在鹽酸金黴素中的含量，保證產品的安全可靠性，我們將鹽酸金黴素中殘留乙醇的含量≤0.5%作為內控標準。
儀器與試藥
儀器日本島津GC-14B氣相色譜儀，江申色譜工作站;1ml，10μl進樣器;
試藥鹽酸金黴素（福州抗生素集團有限公司，批號為20010530）;乙醇（AR）、異丙醇（AR）、去離子水;雙蒸水。
色譜條件與系統適用性
色譜柱2m×3mm的固定相為HayeSEPQ80～90目的不鏽鋼柱，柱溫150℃;檢測器:氫焰檢測器;氣化溫度:180℃;載氣:N2;壓力:100kpa;進樣量:1ul;乙醇、異丙醇的分離度R≥1.5;方法:內標法。
計算公式f=（Ai×dr）/（Ar×di）;Ms%=（f×As×di）/（Ai×W）;其中dr、di分別為乙醇、異丙醇的密度;Ar、Ai、As分別為標準乙醇、異丙醇、殘留乙醇的峰面積，dr=0.7893，di=0.7855。
標準溶液與供試品溶液的製備
標準溶液的製備用1ml的吸量管分別準確吸取1ml乙醇和異丙醇放入盛有少量去離子水的1000ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。
供試品溶液的製備
用1ml吸量管準確取異丙醇1ml放入盛有少量蒸餾水的1000ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。
在安瓿中，準確稱取約50mg鹽酸金黴素樣品，用1ml注射器加入（3.2.1）所配製溶液1ml，快速將安瓿封口，置於水浴中，加熱煮沸數分鐘至樣品完全溶解，取出並冷卻。
方法學考察
最佳固定相選擇使用15%PEG-2CM白色填料（60～80目）進行測試條件摸索，柱溫60℃，樣品沒有回響信號，柱溫升高雖有回響信號，但靈敏度太低，達不到色譜要求，無法測定微量溶媒。使用HayeSEPQ80～90目效果較好。。
定量限試驗在（2.1）色譜條件下，基線穩定後，計算基線噪音水平;配製系列濃度梯度溶液進樣，以回響峰高約10倍基線噪音的試液濃度為該方法定量限。在定量限濃度處，連續進樣6次，計算回響峰面積的相對標準偏差。
表1回響峰面積的相對標準偏差
表2乙醇回響峰面積與濃度之間相關係數及線性範圍
注:曲線方程為:Y=122271X-565.2
線性關係分別配製0.1mg/ml，0.15mg/ml，0.20mg/ml，0.25mg/ml，0.30mg/ml，0.40mg/ml的標準乙醇溶液，在（2.1）色譜條件下，各進樣1.0μl記錄譜圖，以濃度C橫坐標，以峰面積A為縱坐標，計算乙醇回響峰面積與濃度之間相關係數及線性範圍。
精密度試驗分別吸取（3.1）製備液1.0μl，分別進樣6次，計算乙醇/異丙醇的RSD。
回收率試驗分別準確吸取1μl，2μl，3μl，4μl，5μl的AR乙醇溶液，分別加入到已知濃度鹽酸金黴素中測定其回收率。
結論
經過試驗，使用HayeSEPQ80～90目測定微量溶媒靈敏度較高。本法操作簡便，分析快速準確，重現性好，回收率高。
化學檢驗
血漿蛋白
金黴素血清
金黴素脂肪組織
金黴素念珠菌金黴素等半抗原（分子量<1000Da）的檢測方法，通常採用酶聯免疫吸附反應（ELISA）及高效液相色譜（HPLC）及氣-質聯用（GC-MS）等方法。然而，這些方法需要較長的實驗時間及相應昂貴的實驗設備，主要被限制在實驗室中使用。隨著人們對食品安全的日益重視和進出口貿易的高速增長，迫切需要一種能快速、穩定地檢測農、獸藥殘留的方法。膠體金免疫層析試條因其使用方便已被廣泛用於小分子物質的診斷檢測，目前已經開發出用於鏈黴素、磺胺嘧啶等農、獸藥殘留檢測的試紙條。本實驗開發了一種快速檢測金黴素殘留的免疫層析試紙條，具有靈敏度高，操作快捷，不需要附加設備等優點，適用於加工企業對原輔材料驗收，人員用藥，成品分析以及養殖場對投入品的檢測等工作。
1材料與方法
1.1材料氯金酸（HAuCl4·4H2O）、金黴素標準品、牛血清白蛋白（BSA）和聚乙二醇20000購於SIGMA公司；抗金黴素單克隆抗體（MAb），購於Biodesign公司（免疫原為KLH與金黴素的偶聯物，鼠源性）；水溶性碳二亞胺（EDC）、金黴素琥珀酸鈉鹽，購於Fluka公司；羊抗鼠IgG購於北京鼎國生物技術有限公司；金黴素ELISA檢測試劑盒購於EURO-DIOGNOSTICA公司；Bradford蛋白定量試劑盒購於Bio-Rad公司；BioJetXYZ3000型點膜儀購於美國BioDot公司；硝酸纖維素膜（NC）、膠體金結合墊、樣品墊、吸水墊購於Millipore公司。
1.2膠體金的製備及抗金黴素Mab的金標記膠體金顆粒的大小平均為30nm，參照文獻製備膠體金顆粒，在100ml去離子水中加入1%檸檬酸三鈉1ml，煮佛後迅速加入1%氯金酸1ml，繼續煮佛10min，冷卻後，4℃下保存備用。
取已製備好的膠體金溶液100ml，用0.1mol/L碳酸鉀溶液調pH到8.0。邊攪拌邊加入抗金黴素MAb1.5mg，攪拌20min，再逐滴加入2ml25mg/ml聚乙二醇20000（PEG20000），攪拌15min。20000r/min離心15min，棄上清液，加入10mlpH7.4PBS緩衝液（含0.4mg/mlPEG）清洗2次。將沉澱用5ml含2%BSA的PBS緩衝液（Ph7.4）溶解，用0.22μm無菌過濾器過濾後，4℃保存備用。
1.3樣品製備金黴素標準樣品配製以甲醇配成100μg/ml標準貯液，後以超純水稀釋成各濃度梯度。
肉類樣品預處理取10g均質過的試樣，加入10mlPBS，37℃混合保溫90min後，3000rmin離心20min，收集上清液備用。
牛奶樣品預處理取5ml新鮮牛奶，放入離心管中，10℃3500r/m離心10min，吸除上層的脂肪層，取去脂牛奶用PBS適當稀釋後備用。
將上述試樣處理液與各種濃度的金黴素標準品按不同體積比混合成所需濃度的試樣。
部分實際待測試樣的處理方法參考荷蘭EURO-DIAGNOSTICA金黴素檢測試劑盒產品試樣處理方法。
1.4金黴素全抗原的合成包被抗原為金黴素與BSA的偶聯物（CAP-BSA），其合成方法為活性酯法及疊氮法，參見文獻，其中活性酯法為：先將20mg氯毒素琥珀酸鹽、15mgEDC及30mgBSA混合溶於1mlTris緩衝液中，0~4℃下避光攪拌1h，再加入5mgEDC，在0℃下攪拌反應12h，靜置過夜後，後用Tris緩衝液透析3d。
將合成的CAP-BSA全抗原稀釋成100μg/ml（蛋白濃度），後做200~300nm波長的紫外掃描，參照楊利國介紹的計算方法測算偶聯比，即CAP與載體蛋白BSA的摩爾比。其中BSA濃度以BRADFORD蛋白定量試測定。
用EURO-DIOGNOSTICA公司的ILISA試劑盒檢測金黴素濃度，操作方法參見產品說明書。在450nm波長處測A值，計算抑制率：
抑制率=B/B0×100%
B0為不含待測試樣中金黴素的吸光值，B為含待測試樣中金黴素吸光值。
1.5試紙條組裝用點膜機把適當濃度的CAP-BSA及羊抗鼠IgG噴在NC膜上，分別作為檢測線（T）和控制線（C），在37℃烘箱乾燥8h。以同樣方法，將製備好的金標記CAP單克隆抗體包被在膠體金結合墊上。
試紙條組成為一個PVC背板，在其上按順序粘上樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊。用帶MARK膠帶繞背板覆蓋在樣品墊、膠體金結合墊及吸水墊上。用切割機將貼好的板切割成3mm寬的條，放入帶乾燥劑的鋁箔袋中密閉儲存。
1.6檢測方法將CAP檢測試紙條帶MARK線的一端插入裝有待測試樣的容器中，使試樣溶液沿膜從下往上移動。5min以後，即可判讀結果。
結果與討論
2.1檢測結果的判讀試紙條的組成。當樣品墊端放入檢測試樣時，由於毛細作用液體向前移動。到達T線時，試樣中的金黴素與固定在T線上的CAP-BSA複合物競爭結合抗金黴素MAb-膠體金複合物，若試樣中金黴素濃度小於1ng/ml，則膠體金結合墊中的抗金黴素MAb-膠體金複合物與T線上CAP-BSA及C線上羊抗鼠IgG大量結合，T線呈色與c線相近，結果為陰性；若試樣中金黴素的濃度大於1ng/ml，則抗金黴素MAb-膠體金複合物基本上與檢測試樣中的金黴素結合，不能與T線上的CAP-BSA結合，因此T線將比c線淺很多或完全看不到線，而且試樣中金黴素濃度越高T線顯色越淺，結果為陽性。如檢測正確進行的話，控制線總會顯示紅色線條。
2.2CAP-BSA人工抗原合成本試紙條檢測線所用的包被抗原為CAP-BSA偶聯物，由本實驗室人工合成。偶聯反應後所得產物經紫外光譜分析，參照文獻所介紹的方法計算其偶聯比率。多次實驗所得抗原的偶聯比率在1：10~40左右，部分數據見表1。由表1可以看出，BSA與CAP偶聯後最大吸收峰都發生藍移，可能是其分子結構發生變化及環境極性增大的原因。對金黴素與BSA的偶聯是否成功，還採用競爭抑制ELISA檢測來判斷。按梯度稀CAP-BSA偶聯物，後由CAP-BSA與CAP標準品競爭結合金黴素抗體。
金黴素標準品對不同濃度CAP-BSA的抑制率，隨著CAP-BSA稀釋倍數的升高（CAP-BSA含量減少）酶標金黴素標準品對其的抑制率升高。即CAP-BSA與酶標金黴素競爭結合金黴素抗體，表明抗原偶聯是成功的。
本實驗還對CAP抗原的合成方法採用了活性酯法與疊氮法，並比較其對T線的影響。由於疊氮法合成的疊氮化合物為淡黃色物質，干擾T線顯色，因此不適用作為檢測線的包被抗原。而活性酯法合成的偶聯物CAP-BSA1~3，以相同的BSA濃度包被T線，控制線都能與金標記的CAP抗體反應出現明顯的紅色線條，適合做包被抗原。並發現其不同結合比對檢測的靈敏度有一定影響，見試紙條的調試部分。
2.3試紙條的調試將不同半抗原結合比、不同濃度的CAP-BSA和不同A值的金黴素單克隆抗體-膠體金複合物分別包被在硝酸纖維素膜和膠體金結合墊上，反覆調試，使最終的靈敏度達到所需的要求。其用量如下：金黴素單克隆抗體-膠體金複合物採用A值為40（噴量2μg/cm）的包被量，檢測線CAP-BSA用量為0.1mg/ml（噴量0.75μl/cm），控制線羊抗鼠IgG用量為1mg/ml（噴量0.75μl/cm）。
調試結果表明採用不同pH值5、6、7、8、9、10的樣品墊對試劑條的靈敏度沒有產生明顯影響。將硝酸纖維素膜用各種不同配比的溶液做封閉，發現試劑條的C、T線顯色都變淺，但對靈敏度和特異性沒有明顯影響，所以最終製備試劑條時沒有採用封閉的方案。經過比較發現，用同樣的C、T線濃度、抗體-膠體金複合物A值和同樣的包被量，採用12μm和5μm這兩種不同比例的蔗糖和海藻糖，會對膠體金複合物從膠體金結合墊上的釋放能力產生影響，在一定範圍內，加入的蔗糖和海藻糖的比例越高，膠體金複合物釋放得越快。
採用半抗原偶聯率比較高的CAP-BSA做成的試劑條靈敏度更高，這可能同偶聯比率高的CAP-BSA與金黴素單克隆抗體-膠體金複合物發生反應的能力更強有關。但過高的半抗原結合比並不符合C、T線顏色對比這種判斷，反而使靈敏度下降。
本試紙條金黴素的最低檢測水平（LDL）的判斷標準是當檢測線比控制線的顏色明顯淡時，試樣中金黴素的含量為1mg/ml。當試樣中的CAP濃度大於5ng/ml時，檢測線完全消失；當CAP濃度小於0.5ng/ml時，檢測線與控制線在肉眼下沒有明顯區別。本試紙條的LDL可達到1ng/ml。檢測限如再降低，容易出現假陰（陽）性的結果。由於其使用主要是在生產場所現場大批量初篩時定性檢測，此靈敏度可以滿足實際的篩選需要，如需可靠的定量結果還需在實驗室里做ELISA、HPLC等進一步檢測。
2.5檢測的特異性將金黴素琥珀酸鈉，甲碸黴素，磺胺二甲基嘧啶，四環素，青黴素，鏈黴素6種抗菌素溶於PBS（pH7.4，0.01mol/L），配成不同濃度，然後用試紙條檢測。結果如圖3所示，金黴素琥珀酸鈉及金黴素在低濃度下即不出現紅色T線。而後5者（類似物）即使在濃度大於100ng/ml時，也能見明顯的T線，可見與不同抗菌素的交叉反應很低（因定性檢測不能給出交叉率的確切數值）。由於T線包被抗原是以琥珀金黴素鈉鹽偶聯BSA而成，因此金黴素琥珀酸鈉與金黴素的這種交叉反應是在意料之中的。因此免疫層析試紙條可以通過觀察試紙條上檢測線的有無及顏色變化進行定性檢測，對金黴素具有較高的特異性。
2.6穩定性試驗用同一批次不同試紙條檢測同一樣品，及用不同批次試紙條測定同一樣品，其質控線、測試線的顯色時間及顏色深淺和最終結果判讀基本相同。
利用該試紙條對含不同濃度金黴素殘留的蝦肉提取液試樣進行檢測並與ELISA的檢測結果比較，總共檢測50份（陽性30份，陰性20）。試紙條以1ng/ml為判斷限值，沒有出現假陽性及假陰性，檢測結果與ELISA結果完全相符。如把檢測限值再降低則易出現假陽性的結果，不能達到試紙條檢測穩定性的要求。
免疫膠體金技術是20世紀70年代初期由Faulk和Taylor始創，最初用於免疫電鏡技術。目前金標記技術常與膜載體配合，形成特定的免疫檢測方式，如免疫滲濾試驗和免疫層析試驗等。免疫層析試紙條就是此技術用於體外快速診斷的一個重要發展方向，是在現代單克隆抗體技術、膠體金免疫層析技術和新材料技術基礎上發展起來的新型檢測技術。近年來該技術發展迅速，已經在臨床診斷特別是床邊檢測（POCT）中得到了廣泛套用，如傳染病、早孕、癌症等的檢測。目前已有些非臨床檢測的套用，如毒素、藥殘留、環境監測等。我們研製的金黴素膠體金免疫層析檢測試紙條可用於飼料、水產類、牛奶等的檢測，最低檢測含量（LDL）達到1ng/ml。相對於目前使用ELISA方法檢測金黴素樣品至少需要24h，費用約為300元/個，試紙條只需10min就可出結果，費用低廉，而且不需要附加實驗設備，能滿足養殖場所和加工企業對原輔材料、人員用藥及產品初篩等的檢測需要。但由於實驗樣品來源有限，檢測試紙條的各種參數，需在擴大樣品範圍與數量條件下做進一步的驗證。
生產企業
江西萍鄉製藥廠、福建省福抗藥業股份有限公司、安徽省合肥第二製藥廠、西安康華製藥廠、新疆冠林製藥有限公司、重慶科瑞製藥有限公司、柳州市製藥廠、深圳長白山製藥廠實業有限公司、廣州何濟公製藥有限公司、信陽地區江淮製藥有限公司、河南省信陽製藥廠、武漢第三製藥廠、安徽省泗州孟仁壽眼藥廠、古田縣抗生素有限公司、蕪湖三益製藥有限公司、南通生物化學製藥廠、崑山信成生物製藥有限公司、南京白敬宇製藥廠、上海申光製藥廠、南通寶康製藥有限公司、河北闊達生物製品股份有限公司、東北製藥集團瀋陽紅旗製藥廠、唐山市紅星製藥廠。
誤區解惑
前一陣子讀過一篇護膚帖，其中有一條簡單有效的祛痘方法——金黴素眼膏祛痘，但網友對它的評價褒貶不一。那金黴素眼膏祛痘究竟效果如何呢?
金黴素眼膏又名氯四環素，屬四環類抗生素。許多立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、非典型分枝桿菌屬、螺鏇體對其敏感，而腸球菌屬對其耐藥。臨床上適用於急性沙眼、結膜炎等。
為何能祛痘?為什麼網上對它的評價會出現分歧呢?首先我們需要從源頭來分析，長痘的原因是什麼。
臉上長痘其實應該從兩個方面來分析，首先從外部皮膚表層來看，有可能是皮膚沾染了灰塵污垢導致毛孔堵塞，抑或是細菌蟎蟲滋生，也可能是接觸到了過敏原，這些都可以用外用藥物來達到祛痘的效果。而從身體內部系統來看，有很多的痘痘是由於身體激素失調，內分泌失調導致的，這就需要用內在調理的方法來改善。可見，金黴素眼膏能祛痘的原因只是因為它有抗生素所具有的消炎效果，當然它的適應症並不是所有的痘痘了，僅對細菌感染皮膚滋生的痘痘有效。
除此之外，當細菌對金黴素眼膏產生了耐藥性以後，那么眼膏對細菌所致的痘痘也就無效了。這就是為什麼很多人會說第一次用很有效後來就沒有效果了。
