僅介紹脫脂奶,乳漿,酪乳——脂肪含量的測定——重量測定法(參考方法)。本參考方法適用於測定液體脫脂奶,乳漿,酪乳中脂肪的含量。
原理概要
待測樣品的乙醇胺溶液用二乙醚和石油醚進行抽提後,經蒸餾或蒸發除去溶劑,測定抽提物的質量。
儀器
分析天平 (精確至1mg),離心機 (可放脂肪提取瓶或試管,轉速500min-1-600min-1;提取瓶或試管外端徑向加速度能達到80-90g)),蒸餾或蒸發裝置 (溫度不超過100℃),乾燥烘箱 (電加熱;溫控102℃±2℃),水浴鍋 (溫控35℃-40℃),Mojonnier型脂肪抽提瓶 (符合ISO3889要求),支架,洗瓶 (非塑膠洗瓶),脂肪接收器:平底燒瓶 (125-250mL),錐形瓶 250mL,金屬碟 (不鏽鋼;平底;直徑80mm-100mm;高50mm),量筒,移液管,夾子,容量瓶。
試劑
所有試劑只能用分析純,除非有其它說明,水用蒸餾水或去離子水或同等純度的水
氨水 (質量百分比約25% (ρ20=910g/L))
乙醇 (體積百分比94%)
剛果紅溶液 (1g/100mL水)
二乙醚 (不含過氧化物,抗氧化劑含量不超過2mg/kg。)
石油醚 (沸點30-60℃)
或正戊烷 (沸點36℃)
混合溶劑 (用時將等體積二乙醚和石油醚混合)
採樣
建議用ISO707指定的方法;樣品存放於2℃-6℃環境下。
測試樣品的製備
將待測置樣於35℃-40℃水浴加熱。若必要,輕輕地翻轉樣品瓶將樣品完全混勻,注意不要產生泡沫,然後立即將待測樣冷卻至20℃。
將待測樣輕輕翻轉3-4次後,立即稱取兩份10-11g樣品(準確至1mg),放於脂肪抽提瓶中,儘可能地將測試樣送至抽提瓶底部的小球中。
空白樣中用10mL水代替測試樣。
脂肪收集器的準備
將脂肪收集器和一些沸石於102℃烘箱中乾燥1h,然後將脂肪收集器冷卻至室溫(玻璃器皿至少1h,金屬碟至少30min。)。
測量
立即測量,切勿耽擱。
在抽提瓶中加入2mL氨水溶液後充分混勻。加入10mL乙醇,輕輕混合,但要徹底。使內容物在抽提瓶的小球和大球之間充分運動。加入2滴剛果紅溶液,25mL二乙醚,用浸透水的軟木塞或可用水潤濕的其它塞子蓋緊抽提瓶,充分振搖瓶子1min,避免形成永久各乳狀液。加入25mL石油醚後繼續振搖,離心,靜置分層。小心移去塞子,並用少許混合溶劑洗滌。將上層清液儘可能小心地傾倒到另一個脂肪收集器中(內裝沸石)。通過蒸餾或蒸發除去溶劑。加入5mL乙醇,淋洗抽提瓶頸,並混勻。而後進行第二次、第三次抽提。二乙醚和輕質汽油均由原來25mL降為15mL。儘可能除去溶劑。然後將脂肪收集器在102℃烘箱中乾燥1h。如果脂肪液澄清,則將脂肪收集器冷卻至室溫,用夾子將脂肪收集器置於天平上稱重,準確至1.0mg。然後再進行一次乾燥、冷卻、稱量,直到兩次稱量質量差不超過1mg。
精確度
按ISO5725要求評價測量結果精密度。
(1)重複性:同一操作者在同一實驗室,使用相同的儀器設備和相同的方法,在短時間間隔對相同試樣材料進行測試兩次方能試驗結果間絕對偏差大於0.005%(m/m)的機率不應大於5%。
(2)再現性:不同操作者,在不同實驗室,使用不同儀器設備,用同一方法對相同試驗材料進行測試。獲得的兩次獨立試驗結果絕對偏差大於0.015%(m/m)的機率不大於5%。