洋地黃生物測定法

方法名稱： 毒花毛苷K的測定—洋地黃生物測定法
套用範圍： 本方法採用洋地黃生物測定法測定毒花毛苷K的效價。
本方法適用於毒花毛苷K。
方法原理： 本法系比較洋地黃標準品（S）與供試品（T）對鴿的最小致死量（u/kg），以測定供試品的效價。
試劑： 1. 水
2. 氯化納注射液
儀器設備： 固定板
試樣製備： 1. 供試品溶液的製備
精密稱取本品適量，加水製成每1mL中約含0.50mg的溶液，作為供試品溶液。臨用時，精密量取上述供試品溶液適量，加氯化納注射液稀釋。稀釋倍數應調節適當（通常為40-60倍）使鴿的平均最小致死量在25-34mL之間。
2. 對照品溶液的製備
精密稱取毒花毛苷G對照品適量，按標示的無水物含量計算，每1mL加水4mL溶解，作為對照品溶液。臨用時，按上述方法製成稀釋液。
註：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟： 取健康合格的鴿，試驗前16-24小時移去飼料，但仍給予飲水，臨試驗前準確稱重，選取體重在250-400g的鴿，分成兩組，一組為標準品組，一組為供試品組。將鴿仰縛於適宜的固定版上，在一側翼靜脈處拔除羽毛少許，露出翼靜脈，插入與最小刻度不大於0.02mL的滴定管相連的注射針頭，緩緩注入標準品稀釋液或供試品稀釋液，開始時一次注入0.5mL，然後以每分鐘0.2mL等速連續注入，至鴿中毒死亡即停止注入。記錄注入稀釋液的總量（mL），換算成每1kg體重的致死量（mL）中所含效價（u/kg），取其中10倍量的對數值作為反應值，照生物鑑定統計法中直接測定法計算效價及實驗誤差。本法的可信限率FL（%）不得大於15%。
參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業出版社，2005年版，二部，p.373。