檢查步驟
1、體檢:體檢時,注意第二性徵的發育情況及外生殖器發育情況,若睪丸容積小於10毫升,質地異常柔軟,常提示睪丸功能差,觸診應注意附睪、輸精管有無畸形,結節等。
2、精液的生化檢查:目前開展較多的是果糖、酸性磷酸酶、檸檬酸、蛋白質、微量元素、乳酸脫氫酶X等。做精液的生化檢查時,精液標本要置於35℃~37℃水浴箱內,液化後取1.2~1.5男性精ml離心15分鐘,取上層精漿作生化測定。
3、免疫學檢查:可以確定是否存在自身免疫、染色體核型分析可確定是否存在染色體異常。測定血清FSH、LH、T、PRL是少男性精子症檢男性精子精液異常不育的檢查查的重要方法,也有助於辨別是原發性睪丸功能衰竭還是繼發性睪丸功能衰竭。
4、睪丸B超:可發現睪丸大體病變,睪丸活檢可提供更加確實的診斷治療依據。
常規簡介
根據2010年WHO頒布的第五版《人類精液實驗室檢驗手冊》中〝正常精液標準〞如下:液化時間:室溫下60分鐘內,一般不超過15分鐘 正常外觀:均勻的乳白色,呈半流體狀精 液 量: 1.5 ml 以上 pH 值: 7.2 以上 精子密度: 1500萬 / ml 以上 精子總數: 不少於 3900萬 / 每次射精 精子活率: 58 % 以上 精子活力: 40 % 以上(a+b+c),或,32 % 以上(a+b)正常形態: 4 % 以上白 細 胞: 少於 1 × 10 / ml。
檢查內容
精液量
[正常參考值]2-5ml。
[臨床意義]
1. 若數日未射精、且精液量少於1.5m1者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數滴,甚至排不出,稱為無精液症,見於生殖系統的特異性感染,如結核、淋病和非特異性炎症等。
2.若精液量過多(一次超過8m1),則精子被稀釋而相應減少,有礙生育。
顏色檢查
[正常參考值]
灰白或乳白色,久未射精者可呈淺黃色。
[臨床意義]
1.黃色或棕色膿樣精液:見於精囊炎或前列腺炎等。
2.鮮紅或暗紅色血性精液:見於生殖系統的炎症、結核和腫瘤等。
粘稠度和液化
[正常參考值]
粘稠膠凍狀,30分鐘內自行液化。
[臨床意義]
1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見於生殖系統炎症。
2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見於前列腺炎症等。
精子活動率
[正常參考值]
正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,射精後1小時內有Ⅲ級以上活動能力的精於應>0.60。
[臨床意義]
如果0級(死精子,無活動能力,加溫後仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地鏇轉、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育症的重要原因之一。
精子活動力
[正常參考值]
射精後30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80;
射精後120分鐘內活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;
射精120分鐘後0.25-0.60的精子仍能活動。
[臨床意義]
活動不良或不活動的精子增多,是導致不育的重要原因之一。常見於精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性感染如大腸桿菌感染,某些代謝藥、抗瘧藥、雌激素、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降。
精子計數
[正常參考值]
(100-150)×109/L或一次排精總數為(4-6)×108。
[臨床意義]
1.精子計數小於20×109/L或一次排精總數少於1×108為不正常,見於精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業污染、大劑量放射線及某些藥物影響。
2.精液多次未查到精子為無精症,主要見於睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結紮術2個月後精液中應無精子,否則說明手術失敗。
3.老年人從50歲開始精子數減少以至逐步消失。
精子形態
[正常參考值]
畸形精子:<10%-15%; 凝集精子:<10%;
未成熟精細胞:<1%。
臨床意義
1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損於精子形態。
2. 精液中凝集精子增多,提示生殖道感染或免疫功能異常。
3. 睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。
精液細胞
[正常參考值]
白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);
紅細胞(RBC):0-偶見/HP。
[臨床意義]
1.精液中白細胞增多,常見於精囊炎、前列腺炎及結核等。
2.精液中紅細胞增多,常見於精囊結核、前列腺癌等。
3. 精液中若查到癌細胞,對生殖系癌有診斷意義。
精液酸鹼度
[正常參考值]
7.2-8.0。
[臨床意義]
1.精液pH值<7.0,多見於少精或無精症,常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變等。
2.精液pH值>8.0,常見於急性感染,如精囊炎、前列腺炎等。
生育力指數
B
I=M(N×V)/(A×106)
式中I為男性生育力指數;M為活動精子百分率;N為每毫升的精子數;V為精子運動的速度;A為畸形精子的百分率。
[正常參考值]
正常人生育力指數>l。
[臨床意義]
1.生育指數為0,表明完全無生育能力。
2.生育指數為0-1之間,表明有不同程度的生育障礙。
精子功能
精子與卵結合除精子濃度和數量因素外,還必須具備妝好的運動功能和對宮頸粘液、卵細胞放射冠、透明帶及卵細胞膜的穿透力。精子穿透力是評價精子功能的主要指標之一,據報告,約18%精液常規檢查正常的精子不能穿透宮頸粘液,所以檢查精子功能對研究精子在體內運行,受精能力發及男性不育的原因有重要價值,其常用的試驗有:
1.體內穿透試驗:(in vivo penetration test)又稱性交後試驗。檢查於排卵期性交後一定時間內宮頸中粘液活精子數量,存活率及活運動力,以評價精子對宮頸粘液的穿透能力,正常人可見>50個HPF有正常活動能力的精子。當宮頸粘液異常或有抗精子抗體時,精子體內穿透能力減弱或喪失。其結果還受雌激素分泌狀況等多種因素影響。
2.體外穿透試驗(in vitro,penetration test)
(1)簡化玻片試驗:將一滴宮頸粘液置載正玻片上,用蓋玻片鋪平,兩片之間的厚度用哇化的玻璃珠控制,在載玻片兩側各滴一滴精液,使懷蓋玻片邊緣接觸,借毛細作用將精液移向蓋玻片,使宮頸粘液與精液之間現一清晰接觸界面,37攝氏度卵育30分鐘。精子在接觸界面處形成一指狀突起伸入粘液,精子穿過指狀突起進入精液,然後呈扇形散開運動。本試驗的觀察指標為:①粗精了子穿透並有90%以上具有明確直線運動的活動精子時為正常結果;②精子穿透粘液,但離開粘液與沮液接觸面<500μm為較差;③精子穿透粘液,但很快失活或僅作擺動力為異常;④精子未穿透與精液的接觸界面,精子接觸界面的精液側凝集為異常結果。
本試驗常帶來有一定的主觀性,因為在平面玻璃上使精液粘液觸界面的大小和形狀完全標準化是不可能和,因為而吸能定性評價精子粘液的相互作用。
(2)精子宮頸粘液接觸(sperm-cervical mucus contact,SCMC)試驗:本試驗的目的是檢驗精液和燥頸內是否存在損害精子運動功能的ASAB及其損害程度,精子與近排卵期的宮頸粘液等量混合,富強溫下作用30min,鏡下計數擺動的精子,求出擺動精子的出現率(%),以單獨的精液滴鏡檢作為精子活力的對照,擺動精子的出現率越高,意味著精子不能穿過宮頸粘液。說吸ASAB對精子運動功能的損害越重,見表11-1。
表11-1 ASAB對精子運動功能損害
SCMC實驗結果 擺動精子(%) 精子運動功能受損
陰性 0-25 無
弱陽性 26-50 輕微(可疑)
陽性 51-75 明顯
強陽性 76-100 = 嚴重
玻片試驗與SCMC試驗陽性者可用其它供者的精液或燥頸粘液分別進行交叉試驗,以利於判斷ASAB的來源是清液或燥頸粘液。
(3)無透明帶倉鼠卵-精子穿透試驗(Zone free hamstar egg sperm penetration test,ZFHESPT)簡稱精子倉鼠卵穿透試驗是一種極為嚴格的生物學試驗,技術複雜,影響因素多。若能加強質量控制,再加上其它客觀檢查如精子活力等,可作為測定功能和基礎。
其方法將精子於BWW培養液中經37攝氏度獲能,再與用胰蛋白酶外理去除透明帶的倉鼠混合繼續孵育完成受精過種程。然後以相差顯微鏡檢查,計數卵子受精率和受精指數。
受精率(%)=受精卵數/卵細胞總數×100%
由於卵細胞已去除透明帶一個卵細胞可被多個精子穿透。FI為穿透卵細胞的精子總數與卵細胞總數之比,從整體上反映精子穿透力與項體反應。FI越高說明精子受精能力越強。
FI=穿透卵細胞的精子數/卵細胞總
[參考值] 受精率≥10%
[臨床意義] 精子倉鼠卵穿透試驗可測定人精子的獲能、項體反應和對卵細胞的穿透性能,綜合反映精子的受精能力,生育力正常的男性本試驗結果正常者占82%,不育症患者僅有2%正常,因此對不育症的診斷有較高的套用價值,穿透力較高的精子可選作人工授精用,成功率較高。
生化檢驗
精漿果糖
[正常參考值] 9.11-17.67mmol/L。
[臨床意義]
1.精液果糖為0,可見於先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行射精。
2.精液果糖降低,常見於精囊炎和雄激素分泌不足,果糖不足可導致精子運動能量缺乏,甚至不易受孕。
酸性磷酸酶
[正常參考值]
金氏法:>255nmol·s-1/L
[臨床意義]
1.精漿酸性磷酸酶含量增高,常見於前列腺肥大或早期前列腺惡性腫瘤患者。
2.精漿酸性磷酸酶含量降低,常見於前列腺炎患者。
3.精漿酸性磷酸酶檢測是法醫鑑定有無精液最敏感的方法。
頂體酶活性
[正常參考值] 36.72±21.43U/L。
[臨床意義] 精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關,其活力不足,可導致男性不育。
乳酸脫氫酶
[正常參考值]
LDH-X絕對活性:2620±1340U/L;
LDH-X相對活性:≥0.426。
[臨床意義] LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精於運動獲能的關鍵酶,該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發生缺陷時無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。
精漿肉鹼
分析正常生育男性及弱精症不育患者精漿中L肉毒鹼水平差異及其臨床意義。方法 精漿樣品經乙研究建立人精漿中L肉毒鹼HPLC測定方法,分析正常生育男性及弱精症不育患者精漿中L肉毒鹼水平差異及其臨床意義。
免疫檢驗
抗精子抗體測定
[正常參考值]
陰性。
[臨床意義]
AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在於血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運行,阻礙精子穿透及精卵結合,使受精發生障礙。即使已經受精,也可能影響發育中的胚胎,造成免疫性流產。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎症、附睪等生殖系感染時,系精子外逸而產生的自身抗體。
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