CTCF

CTCF是廣泛存在於真核生物中的多功能轉錄因子.利用細胞瞬時表達實驗在HeLa細胞系中研究CTCF各結構域的轉錄活性.方法:借用CheckMate哺乳動物雙雜交系統的2個質粒pBIND和pG5LUC,將CTCF的N、M、C段及全長編碼序列克隆至pBIND質粒的GALA DNA結合結構域編碼序列後的多克隆位點,將表達GALA DNA結合結構域-CTCF融合蛋白的pBIND重組質粒與由腺病毒晚期主要啟動子控制的報告基因質粒pG5LUC共轉染HeLa細胞系,檢測CTCF各結構域對報告基因表達水平的影響.結果:轉染含CTCF N段的質粒可使報告基因的表達量增長至3.5倍以上;轉染含CTCF其他片段的質粒對報告基因的表達沒有明顯的影響.結論:在HeLa細胞中,對啟動子具有轉錄激活活性的主要是CTCF的N段,而M段和C段幾乎沒有轉錄激活活性.