集聚蛋白,集聚素是由運動神經分泌並可誘導肌纖維的乙醯膽鹼酯酶和乙醯膽鹼受體發生聚集。
套用
確定化合物是否是神經蛋白酶抑制劑的方法,其特徵在於,將化合物與神經蛋白酶、其變體或包含蛋白酶結構域的片段以及包含集聚素、其變體或含有集聚素口-或口-切割位點的片段的蛋白質或多肽在水緩衝溶液中共同培養,並且測量集聚素的切割量。本發明還涉及通過這種方法發現的神經蛋白酶抑制劑,尤其是式(1)化合物,其中Hal↑[1]和Hal↑[2]是氟、氯或溴,以及該抑制劑在治療和/或預防突觸缺乏引起的疾病例如骨骼肌萎縮、精神分裂症和認知障礙中的套用。
實驗
研究在神經突觸形成中發揮重要作用的集聚蛋白(agrin)是否在淋巴細胞中表達並影響淋巴細胞的活化和免疫突觸的形成。方法套用RT-PCR檢測集聚蛋白在靜止和活化淋巴細胞中的表達,並套用實時定量PCR檢測分析集聚蛋白的表達量與淋巴細胞活化之間的關係;用抗集聚蛋白抗體觀察其對淋巴細胞增殖和免疫突觸形成的影響;套用共聚焦顯微鏡觀察集聚蛋白是否參與免疫突觸的形成。結果RT-PCR結果顯示集聚蛋白在靜止和活化的淋巴細胞中均有表達,且經過實時定量PCR分析發現,集聚蛋白的表達和淋巴細胞的活化密切相關;當集聚蛋白被阻斷後淋巴細胞的增殖被顯著抑制;經共聚焦顯微鏡觀察發現,集聚蛋白在活化的淋巴細胞中以帽化結構形式存在,且和CD3分子共定位,抗集聚蛋白抗體町以明顯減少這種帽化結構的形成。結論在神經突觸中發揮重要作用的集聚蛋白同樣存在於淋巴細胞,呵能通過影響淋巴細胞的免疫突觸的形成參與淋巴細胞的活化。