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研究在神經突觸形成中發揮重要作用的集聚蛋白(agrin)是否在淋巴細胞中表達並影響淋巴細胞的活化和免疫突觸的形成。方法 套用RT-PCR檢測集聚蛋白在靜止和活化淋巴細胞中的表達。並套用實時定量PCR檢測分析集聚蛋白的表達量與淋巴細胞活化之間的關係;用抗集聚蛋白抗體觀察其對淋巴細胞增殖和免疫突觸形成的影響;套用共聚焦顯微鏡觀察集聚蛋白是否參與免疫突觸的形成。結果 RT-PCR結果顯示集聚蛋白在靜止和活化的淋巴細胞中均有表達,且經過實時定量PCR分析發現,集聚蛋白的表達和淋巴細胞的活化密切相關;當集聚蛋白被阻斷後淋巴細胞的增殖被顯著抑制;經共聚焦顯微鏡觀察發現,集聚蛋白在活化的淋巴細胞中以帽化結構形式存在。且和CD3分子共定位,抗集聚蛋白抗體可以明顯減少這種帽化結構的形成。結論 在神經突觸中發揮重要作用的集聚蛋白同樣存在於淋巴細胞,可能通過影響淋巴細胞的免疫突觸的形成參與淋巴細胞的活化。
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為研究在神經突觸中發揮重要作用的突觸調節蛋白集聚蛋白是否在免疫細胞中表達並影響淋巴細胞的活化.首先通過RT-PCR、螢光免疫組織化學和FACS分別從mRNA水平和蛋白水平觀察集聚蛋白在各種免疫器官、細胞中的表達;通過實時定量PCR檢測分析集聚蛋白的表達與淋巴細胞活化的關係;並構建針對集聚蛋白的反義質粒,從而進一步研究下調集聚蛋白的表達對淋巴細胞活化的影響.結果發現集聚蛋白廣泛表達於脾臟、胸腺、淋巴結等多種免疫器官中並在T細胞、B細胞、imDC、mDC及巨噬細胞中均有表達,其表達含量與淋巴細胞的活化狀態密切相關,且其表達被下調後淋巴細胞的活化顯著被抑制.因而組成性表達於各種免疫細胞中的集聚蛋白可被誘導性上調,並參與了淋巴細胞的活化.