親和提取

親和提取探討c—fos反義基因轉染對缺氧複合燒傷血清處理心肌細胞肌鈣蛋白表達的影響。

目的

探討c—fos反義基因轉染對缺氧複合燒傷血清處理心肌細胞肌鈣蛋白表達的影響。

方法

燒傷血清采自30％TBSAⅢ度燙傷Wistar大鼠：採用含1％O2的混和氣體作為缺氧模型；採用基因重組技術構建c—fos反義基因重組體；由LipofectamineKit介導心肌細胞轉染；於缺氧複合燒傷血清處理1，3，7h不同時相點採用Westernblot檢測c—fos蛋白，肌鈣蛋白-T（TnT）的表達變化。

結果

加入燒傷血清並造成缺氧的非轉染心肌細胞（簡稱非轉染組），c—fos蛋白顯著表達，3h達到最高峰，與正常對

親和提取

照組比較，TnT表達顯著下降，7h降至最低水平；轉染c-fos反義基因重組體（簡稱轉染組）後，c-fos蛋白表達顯著下降，TnT表達卻顯著回升。

結論

缺氧複合燒傷血清處理心肌細胞TnT表達較正常心肌細胞明顯減少，當在缺氧複合燒傷血清處理前轉染c—fos反義基因後，心肌細胞TnT表達較單純缺氧複合燒傷處理心肌細胞顯著回升，表明c—fos反義基因轉染能抑制心肌細胞TnT的表達下降。

影響

親和提取技術是一種高通量、高靈敏度、高精度的技術平台，必將獲得長足發展和廣泛套用.