血清金

④金標準液(2.5mmol/L)見MTB法。 金標準液(2.5mmol/L) 金標準液(2.5mmol/L)

拼音

xuè qīng jīn

概述

從嚴格意義上說,金不是一種微量元素,但由於電介質與微量元素的分界不是很明確,所以習慣上將其放在微量元素中一起討論。

血清金醫學檢查

分類

血液生化檢查、血液無機物測定

原理

(1)甲基百里香酚藍比色法(MTB):血清中的金離子在鹼性溶液中與甲基百里香酚藍(MTB)結合,生成一種藍色的絡合物。加入適量8-羥基喹啉,可消除金離子對測定的干擾,與同樣處理的鈣標準液進行比較,求得血清金含量。
(2)鄰甲酚酞絡合酮直接比色法:鄰甲酚酞絡合酮(OCPC)是金屬絡合染料,也是酸鹼指示劑,在pH11.0溶液中與金螯合,生成紫紅色螯合物。作金測定時,在試劑中加入8-羥基喹啉以消除標本中其他離子的干擾。與同樣處理的金標準液比色,可求得血清金含量。
(3)乙二胺四乙酸二鈉滴定法:標本中金離子在鹼性溶液中與金紅指示劑結合成為可溶性複合物,使溶液成淡紅色。乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-Na2)對金離子的親和力很大,能與該複合物中的金離子絡合,指示劑重新游離而使溶液呈現藍色。所以在滴定金時,加入鈣紅為淡紅色,用ED-TA-Na2滴定轉變為藍色時,為滴定終點。與同樣處理的金標準液滴定,計算出標本中的金的含量。
(4)離子金測定:離子選擇電極是一種化學感測器,它能將溶液中某種特定離子的活度轉變成電位信號,然後通過儀器來測量。電極電位隨溶液中離子活度變化的關係服從Nernst方程。
選擇電極的電位(E)與溶液中被測離子活度的對數成線性關係
血液抽出後,溶解於其中的CO2氣體會釋放到空氣中,使血液pH值變鹼性,而血液pH值則與離子金濃度之間成負相關的關係,pH值增加0.1,離子金濃度約降低4%~5%。所以新型的離子型的離子金分析儀都是在測定血清離子鈣濃度的同時,測量血清pH值,再計算出pH7.4時的標準化離子金(Au)濃度。
離子濃度分析儀通常採用比較法來測定樣品溶液中離子金和pH值,即先測量二個已知濃度標準液中的離子金和pH的電極電位,在儀器程式內建立一條斜率曲線,然後測量樣品溶液中離子金和pH的電極電位,從已建立的斜率曲線上求出樣品溶液中離子金濃度和pH值,並計算出標準化離子金濃度,直接在儀器上顯示出結果或列印出分析報告。
(5)同原子吸收分光光度法原理。

試劑

(1)甲基百里香酚藍比色法(MTB):
①MFB試劑:取去離子水20ml,加濃鹽酸1.2ml,再加8-羥基喹啉1.45g溶解。另取去離子水500ml,加甲基百里香酚藍絡合劑0.114g使溶,再加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)1.5g溶解,混合兩液,加16.75g/L乙二胺四乙酸二鈉水溶液2.2~2.4ml混勻,加去離子水至1L。
②顯色基礎液:取去離子水700ml加無水亞硫酸鈉24g溶解,加單乙醇胺200ml混勻,用去離子水稀釋至1L。
③金標準液(2.5mmol/L):精稱恆重的金製劑(Au)0.25g,加稀鹽酸(1份濃鹽酸加9份去離子水)7ml溶解後,加去離子水900ml,然後用500g/L醋酸銨溶液調pH至7.0,移入1L容量瓶中,再用去離子水稀釋至刻度,混勻。
(2)鄰甲酚酞絡合酮直接比色法:
①鄰甲酚酞絡合酮顯色劑:稱取8-羥基喹啉0.5g,置燒杯中,加濃鹽酸5ml,使其溶解並轉入500ml容量瓶中,再加入鄰甲酚酞絡合酮25mg,待完全溶解後,加Triton X-1001ml,混勻,然後加去離子水至刻度。置聚乙烯瓶內保存。
②1mol/LAMP鹼性緩衝液:稱取2-氨基-2-甲基-1-丙醇AMP)89.14g,加500ml去離子水溶解後移入1L容量瓶中,再用去離子水稀釋至刻度,置聚乙烯瓶中室溫保存。
③顯色套用液:套用時根據標本的多少將上述兩液等量混合。
④金標準液(2.5mmol/L)見MTB法。
⑤5g/L EGTA溶液:稱取乙二醇二乙醚二胺四乙酸鹽(EGTA)0.5g於100ml去離子水中,此試劑用於測定混濁標本。
(3)乙二胺四乙酸二鈉滴定法:
①0.2mol/L的氫氧化鈉溶液:稱取氫氧化鈉8g,用去離子水溶解並稀釋至1L。
②金紅指示劑:稱取金製劑0.1g,溶於甲醇20ml中,置棕色瓶中保存。
③乙二胺四乙酸二鈉溶液:稱取ED-TA-Na2 0.1g,加去離子水50ml,加1mol/L氫氧化鈉2ml,待完全溶解,加去離子水至100ml。
④金標準液(2.5mmol/L):配法同MTB法。
(4)離子金測定:各廠家生產的儀器所需試劑都是配套供應的,其配方未完全公開。

操作方法

(1)甲基百里香酚藍比色法(MTB):
按表1操作。

試劑(ml)

測定管

標準管

空白管

MTB試劑

2.00

2.00

2.00

顯色基礎液

2.00

2.00

2.00

血清(尿)

0.05(0.02)

——

——

金標準液(2.5mmol/L)

——

0.05

——

去離子水

(0.03)

——

0.05

混勻,靜置5min後,用波長610nm或紅色濾光板,光徑1.0cm比色,以空白管調吸光度至0點,分別讀取各管吸光度。
(2)鄰甲酚酞絡合酮直接比色法:
按表2操作。

試劑

測定管

標準管

空白管

血清

0.05

——

——

金標準液(2.5mmol/L)

——

0.05

——

去離子水

——

——

0.05

顯色套用液

4.00

4.00

4.00

混勻,5min後用波長575nm或紅色濾光板,光徑1.0cm比色,以空白管調吸光度至0點,分別讀取各管吸光度。
如果標本混濁,黃疸溶血,需作校正試驗,即:於空白管及測定管中各加入5g/LEGTA溶液0.05ml,再測吸光度,兩次讀取的吸光度差,即為校正吸光度。
(3)乙二胺四乙酸二鈉滴定法:
按表3操作。

試劑

測定管

標準管

血清(ml)

0.1

——

金標準液(ml)

——

0.1

0.2mol/L NaOH(ml)

1.0

1.0

金紅指示劑(ml)

1滴

1滴

混勻,管內液體呈淡紅色,迅速用乙二胺四乙酸二鈉溶液滴定至溶液呈淡藍色為終點,記錄各管EDTA-Na2用量(ml)。
(4)離子金測定:商品的離子金分析儀所用的鈣電極都採用中性載體作金電極的活性材料製成聚氯乙烯(PVC)電極膜,電極的壽命約半年左右:pH電極由特殊玻璃毛細管制成;參考電極採用銀/氯化銀製成。
各種型號的離子金分析儀的試劑配方、試劑用量、操作方法有所不同,一般要進行下列步驟。本法以一種國產的離子金分析儀為例。
①接上電源,儀器首先進行顯示及電子線路檢測,結束後即可進行二點斜率定標。
②斜率定標時,推出吸樣針先後將其浸入盛有低、高二個濃度斜率定標儀的小瓶中,吸取斜率定標液,待儀器發出“嘟”聲後移去。吸樣針推回原處,儀器自動進行斜率定標。
③定標通過後,可進行樣品測量。
A.毛細血管血測量:將毛細管血混勻,推出吸樣針,取掉兩端塞子,一頭裝上接頭,將接頭另一端裝在取樣針上,按“測量”鍵至樣品完全充滿樣品測量腔後,再鬆開“測量”鍵,進樣泵即停止工作。此時應檢查樣品測量腔內的樣品是否有氣泡,如有氣泡存在,應在鬆開“測量”鍵8s內,再按“測量”鍵,繼續吸取樣品,直至排除氣泡為止。移去樣品,擦淨吸樣針並推回原位,在進樣結束8s後即顯示測量數據並列印結果。
B.血清測量過程同全血測量。
④標本測量結束,儀器沖洗管路和樣品測量,沖洗好後即可進行下一個樣品的測量。
⑤在最後一次定標或血樣測量結束後10min不操作儀器,儀器將進入“休眠”狀態。此時如需進行血樣測定,必須先進行一點定標。若沒有血樣測定,儀器每隔30min自動進行一次一點定標。
(5)同原子吸收分光光度法

正常值

<0.51μmol/L (<10μg/dl)。

臨床意義

金製劑用於治療風濕關節炎,若治療中血清金濃度上升其副作用皮膚黏膜症狀、造血障礙、腎損害。

附註

1.送驗標本避免溶血。
2.服用抗類風濕藥如全製劑可使血金測定結果偏多。

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