蛋白質呈色反應

基本反應概述

(1)茚三酮反應(ninhydrin reaction)
蛋白質水解後產生的胺基酸可發生茚三酮反應。除脯氨酸羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外,所有的α胺基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。α胺基酸與茚三酮在弱酸性溶液中共熱,反應後經失水脫羧生成氨基茚三酮,再與水合茚三酮反應生成紫紅色,最終為藍色物質。脯氨酸等仲胺胺基酸與茚三酮反應生成黃色物質。該反應可廣泛用於各種胺基酸的定性或定量測定。

(2)雙縮脲反應(biuret reaction)
蛋白質和多肽分子中肽鍵在稀鹼溶液中與硫酸銅共熱,呈現紫色或紅色,此反應稱為雙縮脲反應,雙縮脲反應可用來檢測蛋白質水解程度。該反應是肽鍵常用的反應,即在鹼性銅溶液中,肽鍵與銅離子形成絡合物,呈紫色(在540nm有最大光吸收峰)。

(3)考馬斯亮藍法
即蛋白質與一種蛋白質染料考馬斯亮藍G250反應形成複合物,該複合物在595nm有最大光吸收峰。

注意:蛋白質遇硝酸也顯色為黃色,不過這樣蛋白質就變性了。

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