基本內容
中文名稱:脂肪酶
中文別名:
英文名稱:Lipase
英文別名:Rizolipase [USAN:INN]; Accelerase; Allzyme Lipase; Amano N-AP; Butyrinase; Chirazyme L; E.C.3.1.1.3.; Enzylon PF; Fetipase; Fluozim G 3Kh; Fungal lipase; GA 56 (Enzyme); GA-56; Glycerol ester hydrolase; Ilozyme; Lipase AP; Lipase, fungal; Lipase, triacylglycerol; Lipazin; Meito MY 30; Remzyme PL 600; Rizolipasa; Rizolipasa [INN-Spanish]; Rizolipase; Rizolipasum; Rizolipasum [INN-Latin]; Steapsin; Takedo 1969-4-9; TheraCLEC-Lipase; Triacetinase; Triacylglycerol hydrolase; Triacylglycerol lipase; Tributyrase; Tributyrin esterase; Tributyrinase; Triglyceride hydrolase; Triglyceride lipase; Triolein hydrolase; Tween esterase; Tween hydrolase; Tweenase; UNII-8MYC33932O; UNII-FQ3DRG0N5K; Lipase of Rhizopus arrhizus var. Delemar; Plant lipase; Animal lipase。
來源
脂肪酶廣泛的存在於動植物和微生物中。植物中含脂肪酶較多的是油料作物的種子，如蓖麻籽、油菜籽，當油料種子發芽時，脂肪酶能與其他的酶協同發揮作用催化分解油脂類物質生成糖類，提供種子生根發芽所必需的養料和能量；動物體內含脂肪酶較多的是高等動物的胰臟和脂肪組織，在腸液中含有少量的脂肪酶，用於補充胰脂肪酶對脂肪消化的不足，在肉食動物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。在動物體內，各類脂肪酶控制著消化、吸收、脂肪重建和脂蛋白代謝等過程；細菌、真菌和酵母中的脂肪酶含量更為豐富（Pandey等）。由於微生物種類多、繁殖快、易發生遺傳變異，具有比動植物更廣的作用p H、作用溫度範圍以及底物專一性，且微生物來源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶，主要的發酵微生物有黑麴黴，假絲酵母等等。適合於工業化大生產和獲得高純度樣品，因此微生物脂肪酶是工業用脂肪酶的重要來源，一般不同來源的脂肪酶特性也不一樣並且在理論研究方面也具有重要的意義。
分類
按脂肪酶對底物的特異性可分為三類：脂肪酸特異性、位置特異性和立體特異性。依據脂肪酶的來源不同，脂肪酶還可以分為動物性脂肪酶、植物性脂肪酶和微生物性脂肪酶。不同來源的脂肪酶可以催化同一反應，但反應條件相同時，酶促反應的速率、特異性等則不盡相同。
性質
脂肪酶脂肪酶的性質研究主要包括最適溫度與pH、溫度與pH穩定性、底物特異性等幾個方面。迄今，已分離、純化了大量的微生物脂肪酶，並研究了其性質，它們在分子量、最適pH、最適溫度、pH和熱穩定性、等電點和其他生化性質方面存在不同（Veeraragavan等）。總體而言，微生物脂肪酶具有比動植物脂肪酶更廣的作用pH、作用溫度範圍，高穩定性和活性，對底物有特異性（Schmid等；Kazlauskas等）。
脂肪酶的催化特性在於：在油水界面上其催化活力最大，早在1958年Sarda和Desnnelv 就發現了這一現象。溶於水的酶作用於不溶於水的底物，反應是在2個彼此分離的完全不同的相的界面上進行。這是脂肪酶區別於酯酶的一個特徵。酯酶（E C3.1.1.1）作用的底物是水溶性的，並且其最適底物是由短鏈脂肪酸（≤C8）形成的酯。
脂肪酶是重要的工業酶製劑品種之一，可以催化解脂、酯交換、酯合成等反應，廣泛套用於油脂加工、食品、醫藥、日化等工業。不同來源的脂肪酶具有不同的催化特點和催化活力。其中用於有機相合成的具有轉酯化或酯化功能的脂肪酶的規模化生產對於酶催化合成精細化學品和手性化合物有重要意義。
脂肪酶是一種特殊的酯鍵水解酶，它可作用於甘油三酯的酯鍵，使甘油三酯降解為甘油二酯、單甘油酯、甘油和脂肪酸。
酶是一種活性蛋白質。因此，一切對蛋白質活性有影響的因素都影響酶的活性。酶與底物作用的活性，受溫度、pH值、酶液濃度、底物濃度、酶的激活劑或抑制劑等許多因素的影響。
脂肪酶在微生物中有廣泛的分布，其產生菌主要是黴菌和細菌。已經公布的適用於甘油三酯加工的不同來源的脂肪酶有33種，其中18種來自黴菌，7種來自細菌。
脂肪酶可將甘油酯（油、脂）水解，在不同階段可釋放出脂肪酸、甘油二酯、甘油單酯及甘油。水解生成的脂肪酸，可以用標準的鹼溶液滴定，以滴定值表示酶活力。
反應式為：RCOOH+NaOH → RCOONa+H2O。
脂肪酶
ATGL脂肪甘油三酯脂肪酶，HSL激素敏感性脂肪酶，和單脂脂肪酶，其中ATGL只水解TG，而HSL可以水解TG和DG，而MGL只水解甘油單酯。
脂肪酶催化機制
脂肪酶具有油-水界面的親和力，能在油-水界面上高速率的催化水解不溶於水的脂類物質；脂肪酶作用在體系的親水-疏水界面層，這也是區別於酯酶的一個特徵。
來源不同的脂肪酶，在胺基酸序列上可能存在較大差異，但其三級結構卻非常相似。脂肪酶的活性部位殘基由絲氨酸、天冬氨酸、組氨酸組成，屬於絲氨酸蛋白酶類。脂肪酶的催化部位埋在分子中，表面被相對疏水的胺基酸殘基形成的螺鏇蓋狀結構復蓋（又稱“蓋子”），對三聯體催化部位起保護作用。“蓋子”中的α-螺鏇的雙親性會影響脂肪酶與底物在油-水界面的結合能力，其雙親性減弱將導致脂肪酶活性的降低。“蓋子”的外表面相對親水，而面向內部的內表面則相對疏水。由於脂肪酶與油-水界面的締合作用，導致“蓋子”張開，活性部位暴露，使底物與脂肪酶結合能力增強，底物較容易地進入疏水性的通道而與活性部位結合生成酶-底物複合物。界面活化現象可提高催化部位附近的疏水性，導致α-螺鏇再定向，從而暴露出催化部位；界面的存在還可以使酶形成不完全的水化層，這有利於疏水性底物的脂肪族側鏈摺疊到酶分子表面，使酶催化易於進行。
酶活表述
在一定溫度和一定pH條件下，水解甘油三酯每分鐘生成1μmol脂肪酸的酶量，即為一個國際單位，以u/ml或者u/g表示。
正常值
⑴滴定法：酶促反應4h為0.06～0.89U/ml，酶促反應16～24h為0.2～1.5U/ml。
⑵比濁法：呈正偏態分布，最低為OU，單側95%上限為7.9U。
臨床意義
增高：見於急性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌或結石使胰管阻塞時、膽道疾病、胃穿孔、肝硬化、腸梗阻、十二指腸潰瘍、乳腺癌、軟組織損傷、急性或慢性腎臟疾病、內鏡逆行胰腺造影以及攝人嗎啡及某些膽鹼功能性藥物時。急性胰腺炎發病後4-8h脂肪酶出現增高，24h達高峰，8-14d後逐漸恢復正常。
注意事項
（1）抽血前的注意事項
① 抽血前一天不吃過於油膩、高蛋白食 物，避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。
② 體檢前一天的晚八時以後，應禁食，以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。
③ 抽血時 應放鬆心情，避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難；有暈針史的客人請提前說明，我們將做特別安排。
（2）抽血後應注意
① 抽血後，需在針孔處進行局部按壓3-5分鐘，進行止血。注意：不要揉，以免造成皮下血腫。
② 按壓時間應充分。 各人的凝血時間有差異，有的人需要稍長的時間方可凝血。所以當皮膚表層看似未出血就馬上停止壓迫，可能會因未完全止血，而使血液滲至皮下造成青淤。因此按壓時間長些，才能完全止血。如有出血傾向，更應延長按壓時間。
③ 抽血後出現暈針症狀如：頭暈、眼花、乏力等應立即平臥、飲少量糖水，待症狀緩解後再進行體檢。
④ 若局部出現淤血，24小時後用溫熱毛巾濕敷，可促進吸收。
相關疾病
妊娠合併急性胰腺炎，胰腺癌，新生兒胃穿孔。
相關症狀
脂肪組織增生肥大，胃痛，噯氣，嘔吐，黃疸，腹痛。
活性測定
方法：
⒈粗酶液的製備
用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解並定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。
⒉實驗設計
本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的最佳條件。
⒊酸價的測定
酸價是指中和1 mol游離脂肪酸所需NaOH的毫克數， 它用於衡量油脂的水解程度。實驗中用酸鹼滴定法測定水解液的酸價， 參照文獻[ 3， 4 ]中所使用的方法， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 搖勻， 終止反應， 並加入2滴酚酞指示劑， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微紅色， 在30 s內不消失為終點， 記錄消耗的NaOH溶液毫升數（V）。用同樣的方法測定空白值， 每個試驗重複兩次， 以平均值作為測定結果。
酸價按下式計算：
X = C (V - V0) ×40 /M
式中： X —油脂酸價（mgNaOH /g油）
C—NaOH標準溶液的濃度（mol/L)
M —試樣的質量（g)
40—NaOH的mmol質量（mg/mmol)
4 粗脂肪酶活力的測定
在最佳水解條件下， 分別測得粗脂肪酶和標準脂肪酶水解液的酸價X1、X2 ， 根據公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力， 其中U1為粗脂肪酶活力， U為標準脂肪酶活力。
5標準脂肪酶液的配製
根據實驗最佳條件， 配製標準脂肪酶液。一篇相關文獻 粗脂肪酶活力的測定方法的研究.pdf
答：實驗設計，本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應時間為因素，通過酸價的測定選定其水解的最佳條件。用色拉油作底物不太妥，一般是用橄欖油，化學純的。
