內容簡介
本書由生物化學技術原理、生物化學實驗和附錄三部分組成。生物化學技術原理部分重點介紹常規的實驗室技術,內容儘可能地簡潔扼要。生物化學實驗部分除了一些生物化學基礎實驗外,還突出了有關酶的綜合大實驗及免疫化學實驗的內容,由基本實驗、綜合性實驗和選擇性實驗三大模組組成,其中既保留了一些旨在加強學生基本實驗方法和技能訓練的傳統實驗,也引進了一些新近發展起來的生物化學實驗技術。旨在培養學生的動手能力和良好的科研素質,培養學生科研思維和獨立開展研究工作的能力。
本教材適用於高等院校生物化學實驗教學、生物、醫藥和農林等專業學生可根據各自特點選擇使用。本書各實驗單元也可按照各高校的實際情況自行拆分組合。
目錄
第一部分 生物化學技術原理
一、實驗記錄與實驗報告的書寫
二、實驗室基本操作
(一)玻璃儀器的洗滌與清潔
(二)塑膠器皿的清洗
(三)清洗液的原理與配製
(四)量器類的使用法
(五)過濾方法
(六)試管及離心管中液體的混勻操作
三、幾種常規儀器的使用
(一)分光光度計
(二)電子天平
(三)乾燥箱和恆溫箱
(四)電熱恆溫水箱
(五)離心機
四、生物大分子的製備及鑑定
(一)鹽析技術
(二)透析和超濾
(三)減壓濃縮和冷凍乾燥
五、層析技術
(一)吸附層析
(二)分配層析
(三)離子交換層析
(四)凝膠過濾層析
(五)親和層析
六、電泳技術
(一)基本原理
(二)影響泳動率的因素
(三)電泳技術的種類
第二部分 生物化學實驗
第一節 基本實驗
實驗一 苯酚-硫酸法測定水溶性多糖
實驗二 胺基酸紙上層析
實驗三 糖的矽膠G薄層層析
實驗四 磷脂的分離與鑑定——薄層層析法
實驗五甲醛滴定法定量測定胺基酸
實驗六 蛋白質的兩性反應和等電點的測定
實驗七 蛋白質濃度的測定
實驗八微量凱氏定氮法沒總蛋白氮
實驗九 核酸的定量測定
實驗十 維生素C的定量測定——2,6-二氯酚靛酚滴定法
第二節 綜合性實驗
實驗一 蔗糖酶的提取及初提純
實驗二 蔗糖酶的純化——Q Sepharose-柱層析法
實驗三 蔗糖酶活力的測定
實驗四 蔗糖酶蛋白質含量測定及比活力計算
實驗五 SDS-PAGE測定蛋白質的相對分子質量
實驗六 蔗糖酶的固定化及活力測定
第三節 選擇性實驗
實驗一 底物濃度對酶促進反應速度的影響——米氏常數的測定
實驗二 酶的特異性、溫度、pH及激活劑對酶活性的影響
實驗三 大豆總異黃酮的提取及含量測定
實驗四 類胡蘿蔔互的色層分析及鑑定
實驗五 組織DNA的提取及定量測定
實驗六 DNA瓊脂糖凝膠電泳
實驗七紙電泳法定量分析腺苷三磷酸
實驗八 葡聚糖凝膠層析法測定蛋白質的分子量
實驗九 酶聯免疫吸附實驗(ELISA)測定乳汁中孕酮含量
實驗十 血清蛋白質的層析分離——血清γ-球蛋白的分離純化(他子篩層析法)
實驗十一 血清蛋白質的電泳分離——醋酸纖維素薄膜電泳
實驗十二 脲酶的凝膠過濾分離純化
實驗十三 血清蛋白質的聚丙烯醯胺凝膠等電聚焦電泳
實驗十四 肝糖原的提取和定量
實驗十五 蛋白質印跡分析
實驗十六單向定量免疫電泳
附錄
一、生物化學實驗室規則
二、實驗室安全及防護知識
三、常用數據表
參考文獻
試讀部分章節
第一部分 生物化學技術原理
一、實驗記錄與實驗報告的書寫
實驗是在理論指導下的科學實踐,目的在於通過實踐掌握科學理論和規律的基本方法和技能,培養學生科學思維、分析判斷和解決實際問題的能力。也是培養探求真知、尊重科學事實和真理的學風,培養科學態度的重要環節。