概述
同工酶是指催化反應相同而結構及理化性質不 同的一組酶，它們幾乎存在於所有生物中＿２ｌ３ 。同 工酶作為一類蛋白質，廣泛存在於生物的同一種屬， 同一個體的不同組織，同一組織或同一細胞中［１７ Ｊ。 根據同工酶來源和結構的不同，從遺傳學的角度可 將它分為 ４類 ：①單基因決定的同工酶；②多基因決 定的同工酶；③復等位基因決定的同工酶 ；④修飾同 工酶或次生同工酶。在生物進化過程中，同工酶是 為了適應細胞代謝 的多方面需求而產生的，其功能 在生理上表現為對代謝的調節作用［４４ Ｊ。在遺傳上， 當一種酶同時受幾個基 因控制時，更容易適應環境 的變化，一個基因由於突變而無用時，其它基因的存 在仍然可以產生類似作用的同工酶，這有助於機體 減小基因突變造成不利後果的影響＿ｌ ３６］。迄今為 止，被詳細研究的同工酶已有幾百種，具體運用於植 物、動物、微生物、農業及醫學等方面，其中已確定的 植物同工酶有 ａ一澱粉酶、Ｂ一澱粉酶 、酸性磷酸酶、乙醇脫氫酶、過氧化氫酶、過氧化物酶、兒茶酚氧化酶 、 肽鏈 內切酶 、酯酶、谷氨酸脫氫酶、天 門冬氨酸氨基 轉移酶 、肽酶、蘋果酸脫氫酶、氨肽酶等＿３ ．３ 。研究 最多的是過氧化物酶、酯酶和過氧化氫酶。隨著 現代生物技術和分子生物學的發展，對同工酶的研 究也 日益成為細胞分化和形態遺傳學的分子學基礎 中的重要內容［５１，５８ Ｊ。同工酶分析技術是通過電泳 和組織化學方法進行特異性染色而把酶蛋白分子分 離，並將其位置和活性直接在染色區帶以酶譜的形 式標記出來。該技術逐漸成為分子水平上研究生命 現象的一種重要手段［４３ Ｊ。隨著同工酶分離技術的 不斷發展和完善．其套用必將更加廣泛。分析技術
同工酶分離方法主要有電泳法、層析法、酶學法 和免疫學法等，其中以電泳法套用最為廣泛。其原理在於同工酶是功能相同但結構不同的一組酶，由於其結構中胺基酸序列或組成有差異，致使同工酶在電泳時，其遷移率也存在差異２．２ 同工酶分離的常用電泳技術
２．２．１ 澱粉凝膠電泳法：這是最古老的電泳方法 之一，其優點在於便宜，無化學毒性物質，可以迅速 篩分不同活性的酶，但其解析度不高。
２．２．２ 聚丙烯酷胺凝膠電泳（ＰＡＧＥ） ＰＡＧＥ在分 離蛋 白質和核酸上套用廣泛。實踐中採用不連續電 泳，即通過濃縮膠的收縮效其中聚丙烯醯胺凝膠電泳由於方法簡單、解析度較高、同工酶不易失活而使 用最為普遍。應和分離效應，將同工酶分成一條條狹窄的區帶。
２．２．３ 等電聚焦利用同工酶的等電點不同，在電泳支持物中加入兩性電解質載體，因電場的作用，同 工酶在 ＰＲ梯度凝膠中泳動，當遷移至其等電點的 ＰＨ處，則不再泳動，而濃縮成狹窄的區帶。這種方 法解析度很高，但該法得到的同工酶常失活¨¨。
２．２．４ 雙向電泳利用蛋白質或酶樣品中不同組 分等電點的差異，進行第一向分離 ；然後縱向切割以 垂直於第一向的方 向進行第二 向電泳，從而使不同 分子量的蛋 白質或酶樣品進一步分離＿５ 。本法分 辨率高於各種單向電泳，但同工酶易失活，特別是鹼 性 同工酶的分析，應採用其它技術方法。
