實驗原理
苯酚法測定可溶性糖的原理是：糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10～100ug範圍內其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。苯酚法可用於甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定，方法簡單，靈敏度高，基本不受蛋白質存在的影響，並且產生的顏色穩定160min以上。
實驗儀器及試劑
1．儀器：分光光度計、電爐、鋁鍋、20mL刻度試管、刻度吸管、記號筆、吸水紙適量。
2．試劑：
（1）90%苯酚溶液：稱取90g苯酚（AR），加蒸餾水100mL溶解，在室溫下可保存數月。
（2）9%苯酚溶液：取3mL 90%苯酚溶液，加蒸餾水至30mL，現配現用。
（3）濃硫酸（比重1.84）。
（4）1%蔗糖標準液：將分析純蔗糖在80℃下烘至恆重，精確稱取1.000g。加少量水溶解，移入100mL容量瓶中，加入0.5mL濃硫酸，用蒸餾水定容至刻度。
（5）100ug/L蔗糖標準液：精確吸取1%蔗糖標準液1mL加入100mL容量瓶中，加水定容。
實驗步驟
1．標準曲線的製作： 取20mL刻度試管11支，從0－10分別編號，按表27－1加入溶液和水，然後按順序向試管內加入1mL 9%苯酚溶液，搖勻，再從管液正面以 5－20s。加入5 mL濃硫酸，搖勻。比色液總體積為8 mL，在恆溫下放置30min。顯色。然後以空白為參比，在485nm波長下比色測定，以糖含量為橫坐標，光密度為縱坐標，繪製標準曲線，求出標準直線方程。
2．可溶性糖的提取 取新鮮植物葉片，擦淨表面污物，剪碎混勻，稱取0.10－0.30g，共3份，分別放入3支刻度試管中，加入5-10mL 蒸餾水，塑膠薄膜封口，於沸水中提取30min（提取2次），提取液過濾入25mL容量瓶中，反覆沖洗試管及殘渣，定容至刻度。
3．測定吸取0.5mL樣品液於試管中（重複2次），加蒸餾水1.5mL，同製作標準曲線的步驟，按順序分別加入苯酚、濃硫酸溶液，顯色並測定光密度。由標準線性方程求出糖的量。
