慨述
結核菌素試驗試驗目的
（1）為接種卡介苗提供依據，如結核菌素試驗陽性時，表明體內已感染過結核菌，無需再接種卡介苗。陰性者是卡介苗的接種對象。（2）為測定免疫效果提供依據：一般在接種卡介苗3個月以後，應做結核菌素試驗，了解機體對卡介苗是否產生免疫力。假如結核菌素陽性，表示卡介苗接種成功，反之需重新再進行卡介苗接種。
（3）用於診斷與鑑別診斷：結核菌素試驗對青少年兒童及老年人的結核病的診斷和鑑別有重要作用，是普遍運用的輔助檢查手段。
正常值
作結核菌素試驗時，取OT或PPD規定量注射於前臂皮內，48～72小時有紅腫硬結大於5毫米為陽性，否則為陰性。正常人為弱陽性，即硬結直徑為5～9mm。試驗原理
結核菌素試驗結核菌素皮膚反應是遲髮型細胞超敏反應。它是抗原(結核菌或卡介苗)進入機體使機體的免疫T淋巴細胞致敏，並大量分化增殖。當已致敏的機體再次遭受到抗原入侵時，致敏淋巴細胞就會與之結合，引起變態反應性炎症。表現在結核菌素注射部位形成硬結甚至發生水泡、壞死。結素試驗陽性表明機體曾經受到結核菌感染或接種過卡介苗，也表示機體對結核菌有一定免疫力。但也有少數免疫力低下的人（約5%）呈陰性或因技術原因而呈現假陰性。通常接種卡介苗後，若PPD皮試陰性，說明接種失敗。歷史發展
結核菌素是通過甘油提取出的結核桿菌。PPD菌素是一種從濾液中消毒得到的沉澱的非種屬特異性分子。它是由羅伯特·科赫在1890年第一次描述的。在1939年，原蘇聯的M·A·林尼科娃創建了一種修改版的PPD，PPD-L。在1954年，原蘇聯開始批量生產PPD-L。
1890年首先公布發現結核菌素。該年4月4日羅伯特·柯赫在第10屆世界醫學會上講演發表發現一種可以預防豚鼠結核病，並有治療作用的物質。
1891年柯赫明確這種液體是結核菌的培養濾液，並命名為結核菌素。
1908年發現結核菌素試驗方法(C.Mantoux)。
1928年美國P.B.Seibert從結核菌培養液中製成了一種純蛋白衍生物結核菌素(PPD)。
1941年美國研製成功一種標準純蛋白衍生物結核菌素(PPD-S)。
1958年丹麥研製成了更純、更濃的純蛋白衍生物結核菌素(PPD-RT23)，為WHO推薦製劑;
註：日本生產的PPD稱為PPDS
試驗程式
標準劑量是5結核菌素單位（0.1毫升），進行皮內注射，並在48至72小時後觀察結果。一個曾經暴露在病菌的人會顯示出免疫反應。這個測試的結果通過硬結（明顯突起的硬化區）的直徑（垂直於手臂）來反映。如果不存在任何硬結，結果應記錄為0mm。皮膚的紅斑不應加以測量。
如果一個人有陽性的測試史，其他的測試是不需要的。
臨床意義
結核菌素試驗使用國際衛生組織統一供應的PPR-TR23，2TU，硬結直徑大於6mm為弱陽性10mm以上提示結核感染。
但如用高稀釋度(1TU，即1:10000OT)作皮試呈強陽性者，常提示體內有活動結性源。
結核桿菌試驗陽性者表示受試者已感染過結核桿菌而有抗結核桿菌的免疫力，並不一定有結核病，接種過卡介苗的人也呈陽性。結素試驗陰性反應除提示沒有結核菌感染或未接種過卡介苗或卡介苗接種不成功外，還見於以下情況：
①結核桿菌感染初期，機體尚未建立抗結核免疫力：結核菌感染後4～8周變態反應才能充分建立，在這變態反應前期結素試驗可為陰性。
②嚴重結核病如結核性腦膜炎、全身粟粒性結核，細胞免疫功能低下等，以及各種危重患者對結素無反應，或僅為弱陽性，這都是由於人體免疫力連同變態反應暫時受抑制所致，待病情好轉，又會轉為陽性反應。
③套用糖皮質激素等免疫抑制劑者，營養不良以及同時患有麻疹、百日咳等患者，結素反應也可暫時陰性。
④淋巴細胞免疫系統缺陷(如淋巴瘤、白血病、結節病、愛滋病等)患者和老年人的結素反應常為陰性。
判斷方法
我國規定以72小時為觀察反應時間，48-96小時內皆可測量反應，記錄方法是測得的硬結橫徑毫米數×縱徑毫米數表示，如有水泡、硬結、壞死和淋巴結炎時，應作記錄。陰性反應
無硬結或硬結平均直徑<5mm者。結素試驗陰性反應除提示沒有結核菌感染外，還見於以下情況：結核菌感染後需4－8周有變態反應充分建立；在這變態反應前期，結素試驗可為陰性。在套用糖皮質激素等免疫抑制劑者，或營養不良及麻疹、百日咳等病人，結素反應也可暫時消失。嚴重結核病和各種危重病人對結素無反應，或僅為弱陽性，這都是由於人體免疫力連同變態反應暫時受到抑制的結果；待病情好轉，又會轉為陽性反應。其他如淋巴細胞免疫系統缺陷（如淋巴瘤、白血病、結節病、愛滋病等）病人和老年人的結素反應也常為陰性。
陽性反應
硬結平均直徑在5mm或5mm以上者為陽性，5-9mm為一般陽性，10-19mm為中度陽性，20mm以上局部有水泡，出血、壞死及淋巴管炎者均為強陽性。結素試驗陽性反應僅表示結核感染，並不一定患病。我國城市成年居民的結核感染率在60%以上，故用5IU結素進行檢查，其一般陽性結果意義不大。但如用高稀釋度（1IU）作皮試呈強陽性者，常提示體內有活動性結核灶。結素試驗對嬰幼兒的診斷價值比成年人大，因為年齡越小，自然感染率越低；3歲以下強陽性反應者，應視為有新近感染的活動性結核病，須給予治療。
兩步測試
結核菌素試驗臨床常用的結核菌素主要有兩種：一種稱“舊結素”（0.T），它是一種結核菌培養濾液，除含結核蛋白外，還有菌體自溶成分，結核菌代謝產物及培養基成分。另一種稱“純結素”（P.P.D）主要含結核蛋白，它的特異性和純度較舊結素為好。人體受結核菌的自然感染或人工感染（卡介苗接種）後4～8周就產生對結核菌素的特殊的免疫力，當局部注射結核菌素時，機體內已被激活的免疫細胞就會從血液內集聚和停留在注射部位，使局部皮膚產生紅暈、硬結和水泡，即結素反應陽性，而無此反應者為陰性。觀察此反應以72小時為準。對於免疫功能健全的人來說，只要有一個結核菌進入肺泡內造成感染，則結素反應可呈陽性。反之，沒有被結核菌感染的人幾乎對結核菌沒有抵抗能力，結素反應也就呈陰性。結素試驗是一種敏感性很高，特異性很強的檢查方法，試驗反應陽性對診斷結核感染有重要價值，但它不能診斷肺部有沒有結核病或確定病變性質。對3歲以下的嬰幼兒未接種過卡介苗而結素反應陽性者，應考慮有活動性結核病，另外，結素反應陽性也是接種卡介苗後所產生變態反應的表現，在流行病學上常用來考核卡介苗的接種效果。結核菌素試驗陽性並不一定是壞事，它雖表明休內已有結核菌，但也說明機體對結核病已產生了一定免疫力，當細菌再次感染，或體內細菌繁殖形成病灶時，體內的特異性免疫細胞則細菌“包圍”在局部，而使其不易播散到其它部位和臟器；如果結素試驗陰性的話，應予接種卡介苗，促使機體產生對結核病的抵抗能力，使結素試驗陽轉。當然結素試驗也會出現假陰性或假陽性結果，這些都要醫生去全面考慮。
有些人不能或暫時不能行結核菌素皮膚試驗，如：各種傳染病的恢復期、發熱、器質性心、肝、腎疾病的急性期；神經及精神不正常者，本人及家族有過敏史者；其他預防接種不到兩周者；患有全身或局部皮膚病者。要想知道自己是否已被結核菌感染或自己是否對結核病有了抵抗力只要去專科醫院做一次結核菌素試驗，72小時便可知曉。
有些以前感染結核病的人在感染後數年進行測試時可能呈陰性，因為免疫系統的反應可能會逐漸減弱。這一初步皮膚試驗，雖然是陰性的，但可能刺激身體的免疫系統，使後來的測試結果呈陽性。
使用兩個步驟進行初步測試。這確保今後如果試驗呈陽性，可以解釋為一個新的感染，而不是一個古老的感染的簡單的反應。
第一次注射後48至72小時檢查結果
呈陽性，考慮感染者
呈陰性，在1至3周后給予第二次測試
第二次注射後48至72小時檢查結果
呈陽性，考慮以前的感染
呈陰性，考慮未感染
一個通過兩個步驟的測試被診斷為“感染”的人被稱為“結核菌素轉換”。
結素介紹
舊結素（oldtuberculin，OT）是從生長過結核菌的液體培養基中提煉出來的結核菌代謝產物，主要含有結核蛋白。在人群中作普查時，可用1：2000的OT稀釋液0.1ml（5IU），在左前臂屈側作皮內注射，經48－72h測量皮膚硬結直徑，如小於5mm為陰性，5－9mm為弱陽性（提示結核菌感染或非結核性分支桿菌感染），10－19mm為陽性反應，20mm以上或局部發生水泡與壞死者為強陽性反應。結素的純蛋白衍化物（purifiedproteinderivative，PPD）為純結素，不產生非特異性反應。PPD-RT23是由丹麥製造供應世界許多國家使用，已經取代OT。我國從人型結核菌製成PPD（PPD-C），又從卡介苗製成BCG-PPD，0.1ml為5IU，用於臨床診斷，硬結平均直徑≥5mm為陽性反應。
結素試驗除引起局部皮膚反應外，還可引起原有結核病灶和全身反應。臨床診斷一般使用5IU，如無反應，可在一周后再用5IU皮試（產生結素增強效應），若仍為陰性，大多可除外結核感染。
常用種類
舊結核菌素
是從生長過結核分枝桿菌的甘油肉湯培養基中提煉出來的結核菌代謝產物，經過滅菌、濃縮形成原液，使用時再稀釋成一定倍數（通常是2000倍），使每0.1ml含1U。主要成分有：（1）舊結核菌素（結核分枝桿菌蛋白）；
（2）菌體自溶成分；
（3）菌體代謝產物；
（4）培養基成分。
