內容簡介
本書為高職高專規劃教材,系統地介紹了生物化學與生化藥品實驗的主要技術理論和技術方法,包括分光光度技術、電泳技術、層析技術、離心技術和免疫化學技術。根據不同的教學目標,將實驗內容組合為基礎實驗、技術性實驗和綜合性實驗三部分,由33個實驗項目組成,內容涉及糖、脂類、蛋白質、核酸、酶、維生素及代謝途徑多個方面,各學校可根據不同教學層次和對象酌情選用。
本教材可供高職高專院校生物技術、生物製藥、微生物技術、藥學等專業使用,也可供高等醫藥院校臨床醫學、檢驗和護理等各專業的本、專科學生使用,還可供從事生物化學和生物製藥研究及生產的實驗技術人員參考。
目錄
第一章 生物化學實驗基本方法
第一節 實驗室規劃
第二節 實驗室安全及防護常識
第三節 實驗記錄與實驗報告
第四節 實驗室常用儀器的使用
第五節 實驗室基本操作和實驗室常識
第二章 現代生物化學基本實驗技術
第一節 層析技術
第二節 離心技術
第三節 電泳技術
第四節 分光光度技術
第五節 免疫化學技術
第三章 生物化學與生化藥品基礎實驗
實驗一 總糖和還原糖的測定(一)
實驗二 總糖和還原糖的測定(二)
實驗三 粗脂肪的測定
實驗四 血清總膽固醇的測定
實驗五 脂肪碘值的測定
實驗六 胺基酸分離與鑑定——雙向層析
實驗七 蛋白質的定量測定(一)——凱氏定氮法
實驗八 蛋白質的定量測定(二)——Folin酚法
實驗九 蛋白質的定量測定(三)——考馬斯亮藍染色法
實驗十 牛乳中酪蛋白的製備
實驗十一 質粒DNA的微量製備
實驗十二 小牛胸腺DNA的製備——濃鹽法
實驗十三 核酸的定量測定(一)——紫外吸收法
實驗十四 核酸的定量測定(二)——定磷法
實驗十五 核酸的定量測定(三)——定糖法(地衣酚法)
實驗十六酶的特性——底物專一性
實驗十七 底物濃度對酶促反應速度的影響
實驗十八 澱粉酶活力測定
實驗十九 影響酶促反應的因素
實驗二十 果蔬維生素C定量測定
實驗二十一 糖酵解中間產物的鑑定
實驗二十二 肌糖原的酵解作用
實驗二十三 脂肪酸的β?氧化
實驗二十四 氨基移換反應(一)
實驗二十五 氨基移換反應(二)
第四章 生物化學技術性實驗
實驗二十六 蛋白質相對分子質量的測定
實驗二十七 聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清蛋白
實驗二十八 不同分子量蛋白質的分離——凝膠柱層析法
實驗二十九 醋酸纖維素薄膜分離血清蛋白
實驗三十 離子交換層析分離胺基酸
第五章 生化藥物綜合性實驗
實驗三十一 酵母RNA的提取及組分鑑定
實驗三十二 血清γ-球蛋白的分離純化與鑑定
實驗三十三 胰蛋白酶的製備及活力的測定
附錄
一、常用緩衝液的配製方法
二、常用酸鹼指示劑的配製方法
參考文獻
部分章節
第一章 生物化學實驗基本方法
第一節 實驗室規劃
生物化學與分子生物學實驗有著獨特的實驗技能和基本操作。實驗的目的是:在教師的指導下,通過科學的實驗加深對理論的理解,掌握常用的技術,養成良好的科學作風,培養獨立分析問題及解決問題的能力。
為確保達到實驗目的,必須遵守以下實驗室規則。
①穿白大衣進入實驗室;不許穿拖鞋進實驗室;關閉個人娛樂、通信設備。
②自覺遵守課堂紀律,維護課堂秩序,不遲到,不早退,保持室內安靜,不大聲喧譁。
③實驗前認真預習實驗內容,了解本次實驗的目的、基本原理、操作步驟和實驗技能。
④在實驗過程中要聽從指導老師的指導,嚴格認真地按操作規程進行實驗,並注意與同組同學的配合。
⑤實驗數據和現象應隨時記錄在專用的實驗記錄本上。實驗結束時,實驗記錄必須送交指導老師審閱後方可離開實驗室。實驗報告應該在下次實驗開始前交給指導老師。
⑥保持實驗室內整潔。所用的儀器器皿等保持清潔。試劑瓶及儀器等物品要放置整齊、有序。
⑦實驗過程中保持台面、地面、水槽內及室內整潔,含強酸、鹼及有毒的廢液應倒入廢液缸。書包及實驗不需要之物品放在規定處。
⑧實驗結束後要對所有用過的物品進行清潔整理,擺放整齊,清潔的器具和使用過的器具要分開放。用過的濾紙、棉花、動物組織等固體廢物切勿倒入水池,以免堵塞下水道;強酸、強鹼性廢液切勿倒入水池,應以大量水稀釋後再排放,以免腐蝕下水道。
⑨精心愛護各種儀器,公用儀器、藥品用後放回原處,公用試劑瓶的瓶塞要隨開隨蓋,不得混淆,要節約試劑,並保持試劑純度,多取的藥品不得重新倒入原試劑瓶內。
⑩對貴重、精密儀器,如離心機、分光光度計等,務必了解正確使用方法,在教師指導下操作,嚴禁隨意開、關;如儀器發生故障,應立即停止使用並報告指導老師,打破了玻璃儀器要及時向老師報告,並自覺登記,學期結束時按規定進行處理。