甘油磷酸酯酶

假單胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法，涉及一種基因克隆，提供一種假單胞菌的磷酸甘油磷酸酯酶結構基因及其一種既快捷又經濟的克隆方法。 提取假單胞菌總DNA，用限制性核酸內切酶對總DNA不完全酶切，經電泳，找酶切片段區域，切出凝膠，回收DNA片段；以E.coRI在人工構建的表達載體，將回收的DNA片段與線性載體共育，形成重組質粒，取轉化溶液塗抹在高鹽LB瓊脂培養基上，挑取長出的單菌落耐鹽轉化子，接種在培養基上。 出現的白色菌落即可初步判斷為耐鹽轉化子；重組質粒，用E.coRI切出其中的插入片段，測序；進行基因和蛋白質的同源性比較。

甘油磷酸酯酶

假單胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法，涉及一種基因克隆，提供一種假單胞菌的磷酸甘油磷酸酯酶結構基因及其一種既快捷又經濟的克隆方法。基因總長810bp，前3個字元“atg”為起始符，最後3個字元“tga”為終止符。提取假單胞菌總DNA，用限制性核酸內切酶對總DNA不完全酶切，經電泳，找酶切片段區域，切出凝膠，回收DNA片段；以E.coRI在人工構建的表達載體，將回收的DNA片段與線性載體共育，形成重組質粒，取轉化溶液塗抹在高鹽LB瓊脂培養基上，挑取長出的單菌落耐鹽轉化子，接種在培養基上。出現的白色菌落即可初步判斷為耐鹽轉化子；重組質粒，用E.coRI切出其中的插入片段，測序；進行基因和蛋白質的同源性比較。