【作者】王君;王錫樂;陳梅玲;李冠武;溫博海;
【英文作者】WANGJun;WANGXi-le;CHENMei-ling;LIGuan-wu;WENBo-hai(InstituteofMicrobiologyandEpidemiology;AcademyofMilitaryMedicalScienceBeijing100071;China);
【作者單位】汕頭大學醫學院;軍事醫學科學院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點實驗室;
【文獻出處】中國人獸共患病學報,ChineseJournalofZoonoses,編輯部信箱2008年06期
期刊榮譽:中文核心期刊要目總覽ASPT來源刊中國期刊方陣CJFD收錄刊
【中文關鍵字】漢賽巴通體;外膜蛋白;基因表達;免疫反應性;
【英文關鍵字】Bartonellahenselae;outermembraneprotein;geneexpression;immunoreactivity;
【摘要】目的克隆並表達漢賽巴通體Pap31外膜蛋白基因,並對其抗原性進行初步分析。方法採用PCR從漢賽巴通體基因組DNA擴增外膜蛋白基因pap31,將目的基因片段插入原核表達質粒pQE30,構建重組質粒pQE30/pap31;將構建的重組質粒轉化大腸桿菌M15並誘導目的基因表達,以SDS-PAGE電泳以及免疫印跡法分析表達目的蛋白。結果在SDS-PAGE電泳分析發現pQE30/pap31轉化菌高效表達一重組蛋白,經免疫印跡分析發現該蛋白與漢賽巴通體免疫血清發生強烈反應;經間接免疫螢光分析發現該重組蛋白免疫血清能特異識別漢賽巴通體。結論漢賽巴通體外膜蛋白基因pap31在大腸桿菌高效表達,表達的重組Pap31外膜蛋白具有良好的抗原性。
【英文摘要】TopreparerecombinantoutermembraneproteinPap31fromBartonellahenselae,thepap31genefragmentwasamplifiedfromgenomicDNAofB.henselaeandclonedintoprokaryoticexpressionvectorpQE30toconstructarecombinantplasmidpQE30/pap31.E.colicellsweretransformedwiththerecombinantplasmidandthetransformantswereinducedtoexpressthetargetproteinbyIPTG,andthentheexpressedrecombinantproteinwasdetectedbySDS-PAGEandimmunoblotassay.InSDS-PAGEandimmunoblotanalysis,arecombin...
【基金】國家科技攻關項目(No.2003BA712A04-07)
【DOI】CNKI:SUN:ZRSZ.0.2008-06-003
【更新日期】2008-07-10
【分類號】R392
【正文快照】漢賽巴通體是一類氧化酶陰性、營養條件要求苛刻的革蘭陰性小桿菌,貓是其主要儲存宿主,其所致人疾病稱為貓抓病(Cat-scratchdisease,CSD)。貓抓病常發生在兒童和青少年,患者多有被貓抓傷或與家貓接觸史〔1〕;其典型的臨床表現為淋巴管炎,在貓抓或咬傷部位出現丘疹或膿皰,嚴重
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