詞條概述
化學發光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用於各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。是繼放免分析、酶免分析、螢光免疫分析和時間分辨螢光免疫分析之後發展起來的一項最新免疫測定技術。
氯黴素
氯黴素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素。由於其具有效果好以及價格低廉等優點，目前已被普遍套用於各類家禽、家畜、水產品及蜂製品的各種傳染性疾病的治療。然而氯黴素有其嚴重的副作用,它會抑制人體骨髓的造血功能，從而引起再生障礙性貧血和粒細胞缺乏症。目前，我國已禁止其使用。
化學發光免疫分析原理
在化學發光板微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中殘留的氯黴素與微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗氯黴素藥物的抗體，加入酶標二抗後，再加入底物用光子計數儀測定各孔的光子計數，光子計數的強度隨氯黴素濃度的升高而逐漸下降，成良好的負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中氯黴素類藥物的殘留量。
實驗所需儀器
（1）微孔板酶標儀450nm/630nm
（2）旋轉蒸發儀/氮氣吹乾裝置
（3）均質器
（4）振盪器
（5）渦旋儀
（6）離心機
檢測方法
試劑盒組成1、微量測試孔：每條8孔，每板12條
2、氯黴素標準溶液：
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶
3、96孔化學發光板×1塊 （包被有偶聯抗原）
4、標準液×6瓶：（1ml/瓶）
0ppb，1ppb，3ppb，9ppb，27ppb，81ppb
5、高濃度標準品：（1ml/瓶）1ppm
6、酶標記抗體
7、顯色劑
8、20×濃縮洗滌液
9、2×濃縮復溶液
A、注意事項
1、使用前先將氯黴素標準溶液6瓶，濃縮萃取稀釋液，濃縮洗滌液，酶標記物，底物溶液及微量測試孔條置於室溫下，回溫30分鐘。
2、洗滌工作液
用去離子水將20×濃縮洗滌液按1：19體積比進行稀釋 3、回溫後，取出所需微量測試孔條，將剩餘板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好，置於4o℃保存。
1.待測物為組織樣本，則依以下方法進行處理
a.取3g樣本、4ml蒸餾水與6ml 乙酸乙酯置入離心管中，震盪約5分鐘，使其充分混合均勻。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取4ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，於50℃下氮氣吹乾(溫度請勿超過50oC)。
c.加入1ml萃取稀釋液，震盪約10秒鐘後備用。
C、操作步驟
本產品的酶標記物與氯黴素標準溶液均直接使用，無需再稀釋。
1、於適當微孔中分別加入100mL標準溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再於每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
4、輕敲盤子四周，使其充分混合後於室溫下避光靜置溫育1小時。
5、將微孔中的反應液甩掉，再將洗液加滿每一微孔後甩掉，重複洗3次。
6、最後一次甩掉後，在吸水紙上拍乾。
7、於每一微孔中加入底物溶液100mL後，輕敲盤子四周，使其充分混合。
8、於室溫下避光靜置溫育20分鐘。
9、於每一微孔中加入100mL反應終止液。
10、用化學發光儀於下判讀。
D、判定
1. 計算B/B0值。用樣品或標準液吸光度值(B)除以零標準吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值為縱坐標，以標樣濃度的對數值為橫坐標，做標準半對數曲線。
3. 根據每個樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對應樣品的濃度。
4. 由於樣品經過了預先稀釋，因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數。
E、標準曲線
F、靈敏度
氯黴素試劑檢測盒的平均檢測下限為0.05ppb，此濃度之吸光值與陰性標準溶液(0ppb)之吸光值有明顯的差異。
G、 特異性
針對以下抗生素進行交叉反應之測試，結果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1%
H、再現性
針對氯黴素檢測試劑盒精密度測試，重複6次，所得不同濃度標準溶液的吸光值變異係數(%CV).
I、回收率
組織(添加1.0ppb)104~117%
儲存條件及有效期
儲存條件：於4-8℃保存，不得凍存。
有效期：12個月。
