核苷酸間鍵合
簡介
核苷酸間鍵合就是核苷酸之間的鍵接鍵，即氫鍵。
是正相鍵合色譜法較常用的固定相。流動相與以矽膠為固定相的吸附色譜法的流動相相似，也是烷烴（常用正已烷等）加適量極性調整劑而構成。氰基鍵合相的分離選擇性與矽膠相似，但極性小於矽膠，即用相同的流動相及其它條件相同時，同一組分的保留時間將小於矽膠。許多需用矽膠柱分離的課題，可用氰基鍵合相柱完成。氨基鍵合相與矽膠的性質有較大差異，前者為鹼性；後者為酸性。在作正相洗脫時，表現出不同的選擇性。氨基鍵合相色譜柱是分析糖類最重要的色譜柱，也稱為碳水化合物柱。
主要靠范德華作用力的定向作用力、誘導作用力或氫鍵作用力。例如，用氨基鍵合相分離極性化合物時，主要靠被分離組分的分子與鍵合相的氫鍵作用力的強弱差別而分離，如對糖類的分離等。若分離含有芳環等可誘導極化的非極性樣品，則鍵合相與組分分子間的作用力，主要是誘導作用力。
在作正相洗脫時，流動相的極性增大，洗脫能力增加，K減小，t減小；反之k與t增大。分離結構相近的組分時，極性大的組分後出柱。
相關資料
反相鍵合相色譜法
典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大於固定相的流動相組成。
(1) 分離機制反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團，及未被取代的矽醇基。矽醇基具有吸附性能，剩餘矽醇基的多寡，視覆蓋率而定。簡要介紹疏溶劑理論。
疏溶劑理論：當一個非極性溶質或溶質分子中的非極性部分與極性溶劑相接觸時，相互產生斥力，自由能（G）增加，熵減小，不穩定性增加。根據熱力學第二定律，系統由不穩定到穩定是自發的，即熵增加是自發的。因此，為了彌補熵的損失，溶質分子中非極性部分結構的取向，將導致在極性溶劑中形成一個“容腔”，這種效應稱為疏溶劑或疏水效應。該理論認為，在鍵合相反相色譜法中溶質的保留主要不是由於溶質分子與鍵合相間的色散力，而是溶質分子與極性溶劑分子間的排斥力，促使溶質分子與鍵合相的烴基發生疏水締合，且締合反應是可逆的。容量因子k與自由能變化△G的關係如下式：
lnk＝lnV/V－△G/RT (8•5)
上式中的R為理想氣體常數、T為熱力學溫度、V是色譜柱中鍵合相表面所鍵合的官能團的體積，V是色譜柱中流動相的體積。該式說明△G越大，被分離組分的k越小，保留時間越短。
(2)★★流動相的極性與容量因子的關係流動相的極性增大，洗脫能力降低，溶質的k增大，t增大；反之,k與t減小。分離結構相近的組分時，極性大的組分先出柱。
(3) 特點反相色譜法是套用最廣的色譜法，主要用於分離非極性至中等極性的各類分子型化合物，因為鍵合相表面的官能團不流失，溶劑的極性可以在很大範圍內調整，因此套用範圍很寬。由它派生的反相離子對色譜法與離子抑制色譜法，可以分離有機酸、鹼、鹽等離子型化合物。用反相液相色譜法，可以解決80%左右的液相色譜課題。因此，必須給予反相色譜法足夠的重視。對於結構異構體等難分離物質的分離，則應選用吸附色譜法。
