核苷酸基
核苷酸基是一種新的多肽-人肝臟尿嘧啶二核苷酸糖基轉移酶-29.7,編碼此多肽的多核苷酸和經DNA重組技術產生這種多肽的方法。本發明還公開了此多肽用於診治多種疾病的方法,如心律失常、腎功能衰竭、代謝性白內障、四周神經病、感染,黃疸等。本發明還公開了抗此多肽的拮抗劑及其診治作用。本發明還公開了編碼這種新的人肝臟尿嘧啶二核苷酸糖基轉移酶-29.7的多核苷酸的用途。
簡介
《抗體Fc片段特異寡核苷酸配基作為免疫感測器的研究》,在生物醫學領域建立了一種新的生物信息傳導技術方法,該方法利用SELEX技術篩選靶分子的特異性寡核苷酸配基,對配基進行分子信標核酸序列修飾,通過配基和靶分子的特異結合,使靶分子信號傳遞到核酸分子信標,經分子信標的實時定量-PCR擴增進行信號放大和檢測,來實現靶分子到核酸的信號傳遞。本課題利用SELEX技術篩選抗體IgG的Fc片段的特異性寡核苷酸配基,對配基進行環型核酸分子信標序列修飾,通過抗原-抗體-配基-分子信標的特異結合,使抗原信號傳遞到核酸分子信標上,再通過時實定量-PCR檢測實現對抗原的定性和定量。同時針對本課題技術需要研發了PCR管式檢測試劑盒系統,使得免疫感測器的實際套用成為現實。本課題的設計思想、技術方法、及產品均屬獨創,國內外未見相關報導,達到水平。由於本課題所研製的免疫感測技術和方法具有針對幾乎所有抗原分子的平台效應,利用現有的抗原抗體免疫反應組裝成試劑盒具有研製時間短,特異性強,靈敏高;可進行簡易快速檢測和精密度高的微量、多樣的晶片式檢測的特點。因此該技術成果在生物醫學領域具有非常廣泛的套用前景。
相關資料
小鼠IgGFc片段寡核苷酸配基克隆的篩選及序列分析
目的:將SELEX技術篩選出的IgG抗體Fc片段的寡核苷酸配基,與質粒連線、轉化大腸桿菌,為克服藍白斑不能很好鑑別小片段DNA(<100)陽性克隆的技術難題,建立通用或/和特異引物PCR擴增技術進行重組質粒克隆的篩選;為建立SELEX快速篩選技術平台,用dot-blotting放射自顯影技術進行陽性配基篩選;利用生物軟體對IgG抗體Fc片段特異性寡核苷酸配基進行序列同源性和二級結構分析.結論:本研究建立了小分子DNA重組菌落陽性克隆的篩選方法,特異和通用引物組合PCR篩選陽性克隆的方法簡便、準確、可靠.將斑點雜交法用於寡核苷酸配基與靶分子特異性結合的初篩上,建立了一種新的小分子初篩平台.利用生物軟體對特異性寡核苷酸配基序列的同源性及二級結構進行分析,為課題的進一步開展奠定了基礎.關鍵字:SELEX技術,寡核苷酸配基,克隆篩選,多聚酶鏈式反應,斑點雜交。
抗凝血藥稱為“寡核苷酸配基”,由15個核苷酸組成。它可阻礙參與凝血反應的凝血酶分子起作用,防止血液凝結。為了給寡核苷酸配基裝上“開關”,研究人員將4個額外的人造核苷酸連線到其分子的一端。其中有一個核苷酸是變形核苷酸,可在特定波長的光的照射下改變形態。研究顯示,如果沒有光的照射,這個變形核苷酸形態不改變,寡核苷酸配基的抗凝血作用不受影響。但當光源被打開,變形核苷酸就會使寡核苷酸配基分子首尾相連成髮夾形,從而無法發揮抗凝血作用。