簡介
原多甲藻酸貝類毒素（Azaspir acid）最初是因為在1995年11月荷蘭人因吃了在愛爾蘭Killary港養殖的紫貽貝（Mytilusedulis）而發生了中毒事件而受到關注。1996年2月，Yasumoto等從采自Killary港的紫貽貝中分離得到了Azaspiracid（簡稱AZA1）及兩種類似物AZA2和AZA3。因此，以前曾把它稱之為Killary toxin-3（KT-3）。由於AZA（AZA1及其類似物的統稱）和腹瀉性貝毒（DSP）引起的人體中毒症狀極其相似，一些學者最初把AZA當作腹瀉性貝毒的新成員。後來發現AZA具有獨特的化學結構和特性，與人們早已熟知的麻痹性貝毒（PSP）、腹瀉性貝毒（DSP）、神經性貝毒（NSP）、失憶性貝毒（ASP）和西加毒素（CFP）有著明顯的區別，因此把由AZA引起的人員中毒事件稱為Azaspiracid shellfish poisoning（AZP）。FAO/IOC/WHO在2004年3月都柏林（Dublin）貝類生物毒素會議以化學結構將貝類生物毒素分為8組的分類方法，AZA1屬於原多甲藻酸（Azaspir acids）組。
AZA的生物起源還沒有明確定論。據報導，原多甲藻屬（Protoperidinium）的某些種類能夠產生AZA。原多甲藻屬在分類學上隸屬於甲藻門（Dinophyta）、橫裂甲藻綱（Dinophyceae）、多甲藻目（Peridiniales）、多甲藻科（Peridiniaceae），有記錄的種類達60多種。從厚甲原多甲藻（P. crassipes）細胞中提取出了AZA1、AZA2和AZA3三種成分，並測得AZA的平均含量為1.8×10-15mol/cel，其中，AZA1占總量的82%。這表明，厚甲原多甲藻可產生AZA。其它浮游植物是否也能產生AZA有待於進一步研究。
化學結構及性質
採用高解析度快原子轟擊質譜（FAB-MS）、二維核磁共振（2D-NMR）和碰撞誘導裂解（CID）-串聯質譜（MS/MS）技術測定了AZA的結構。AZA毒素在結構上與其他毒素顯著不同，是一類脂溶性聚醚化合物，無色非晶質固體，含有螺環的含氮聚醚，末端含有羧基。其碳骨架由40個碳原子組成，分子中有20個立體異構中心和9個環。迄今為止，研究人員已從染毒的貝類組織中分離得到了11種毒素成分。從浮游植物細胞中提取出了AZA1、AZA2和AZA3三種成分。AZA 毒素的理化性質明顯區別於其他含氮生物毒素，在1.0mol/L的乙酸/甲醇溶液或1.0 mol/L的氨水溶液中加熱150 min後其毒性沒有明顯變化，在冷藏條件下可長期儲存。
原多甲藻酸貝類毒素分子結構AZA1是最常見的類型，在貝體內毒素組成中所占比例最高。AZA2和AZA3分別是AZA1的8-甲基和22-脫甲基衍生物，在有毒貝類中也比較常見，同時也存在於浮游植物樣品中。AZA4和AZA5是AZA3的3-羥基和23-羥基衍生物，在貝類體內含量很少。AZA6是AZA1的空間異構體，AZA7-10 是AZA1 的羥基化衍生物，AZA11 是AZA2 的羥基化衍生物，這幾種衍生物在貝類體內也有發現，但含量非常少。推測AZA4、AZA5、AZA7、AZA8、AZA9和AZA10可能是貝類體內生物轉化的產物。
毒性
AZA最初從愛爾蘭西海岸的紫貽貝中檢出。隨著養殖貝類染毒的區域逐步擴大，染毒貝類的種類也逐漸增多。在英國、挪威、法國和西班牙等國家的養殖貝類中也檢出了AZA。紫貽貝、貽貝（Mytilus gallo provincialis）、長牡蠣[Ostrea（Crassostrea）gigas]和大扇貝（Pectenmaximus）等均檢出含有該類毒素。例如，在英國Craster和挪威松恩峽灣的紫貽貝肝胰腺中，毒素的總含量分別為0.24×10-6和0.82×10-6；在法國布列塔尼半島大扇貝和西班牙加利西亞省Ria de vigo海區貽貝的消化腺中，毒素的總含量分別為0.32×10-6和0.24×10-6。
原多甲藻酸貝類毒素電噴霧質譜AZA毒性比較穩定，常規的烹飪和加工處理無法去除，其毒性遠比大田軟海綿酸（OA）強，尚未找到有效的治療方法和治療藥物。該類毒素有時還與OA、扇貝毒素（PTXs）和蝦夷扇貝毒素（YTXs）同時存在於貝類中，易被腹瀉性貝毒所掩飾，采自挪威的貽貝中曾同時檢出了AZA、OA、PTXs和YTXs。2002年3月，歐洲委員會規定雙殼類、棘皮動物、被囊類和海洋腹足動物（全體或任何可食部分）AZA的最大允許濃度為160×10-9。
此類毒素不同成分的毒性差異很大，AZA2和AZA3均比AZA1毒性強，AZA1、AZA2和AZA3對小白鼠的最小致死劑量分別為0.2×10-6、0.11×10-6和0.14×10-6。與其它聚醚類毒素主要分布於貝類消化腺中不同，AZA遍及貝類全部組織。在染毒初期AZA集中分布於貝類消化腺中，後期則轉移到其它組織（如肌肉）中，毒性可在貝體內持續存留8個月之久，自然淨化速率非常慢。不同成分分布於貝類的不同組織中，AZA1主要分布於消化腺，而AZA3則主要分布於消化腺以外的其它組織。
毒理
AZA 的致毒機理還沒有一個明確的說法。小鼠口服AZA1 毒素的毒性實驗發現，AZA1 可引起肺、胃腸、肝、淋巴組織（胸腺和脾）等多個器官組織受到不同程度的損傷，這些病變在亞致死條件下可在數月內恢復。在慢性毒性實驗中出現間質性肺炎和小腸絨毛萎縮症狀，嚴重者出現肺腫瘤細胞發育。另外發現，AZA1 在低濃度（IC50=2.1 nmol/L）條件下可降低小鼠脊髓神經元的生物電活性，其影響神經元突觸傳遞的機制與門控通道無關。由此看來，向小鼠腹腔注射AZA1 後表現出的急性神經毒性症狀雖與PSP中毒相似，但其作用機制完全不同。
AZA人體的作用機制及其在貝體內的動力學過程正處於探索階段。AZA1 對多種細胞具有毒性，毒性大小與時間、濃度有關。研究發現，AZA1依靠自身特有的ABCDE和FGHI環結構與人神經母細胞瘤作用靶點結合，導致肌動蛋白重排，這一過程不受調控細胞凋亡的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(Caspases) 家族酶活性的影響；AZA1在改變細胞骨架的過程中不改變膜電壓，與OA相比可明顯提高人淋巴細胞內環磷酸腺苷(cAMP)和胞液Ca2+濃度；另外人T型淋巴細胞對AZA1也非常敏感，壞疽的細胞毒害症狀隨著與AZA1的接觸而逐漸消退。由此看來，AZA的細胞毒害作用機制與OA是不同的，其通過特殊的結構基團與細胞結合，具有特定的細胞作用靶點，使得纖維肌動蛋白發生重排，從而改變細胞骨架而OA毒素主要是通過抑制蛋白磷酸酶的活性。
AZA主要引起人體胃腸道紊亂，與腹瀉性貝毒（DSP）和細菌性腸毒素引起的人體中毒症狀極其相似。通常在進食12~24 h後發作，主要表現為噁心、嘔吐、嚴重腹瀉、胃絞痛、發冷和頭痛，持續時間短則1~2d，最長可達3~5 d。
檢測方法
截止至2008年，對AZP的檢測方法基本上集中於小鼠生物測定法和高效液相色譜法（HPLC），尤其以高效液相色譜與質譜聯用技術（HPLC-MS）的套用最為廣泛。
小鼠生物測定法（mouse bioassay，MBA）的原理是，採用適宜的化學提取方法，將樣品（有毒藻類或染毒貝類）中的毒素轉移到提取液中，通過向固定種系和體重的小白鼠腹腔注射提取液，記錄小白鼠的存活時間以計算樣品的毒素含量。此法是最常用的貝毒分析方法，並被美國分析化學家協會（AOAC）列為PSP的常規檢測方法。小鼠生物測定法具有可靠性強、使用廣泛、能表達出樣品中實際毒性、不需複雜設備等優點；但不夠靈敏、準確性和重現性差、試驗需處理大量動物、不能判定各毒素的成分、操作技巧要求較高、對試驗動物的種系及體重要求苛刻。傳統的小鼠生物測試法只用肝胰腺做測定，只能檢測到貝類組織中AZA總量的0%-40%，因此存在較高比例的假陰性結果。
HPLC方法的原理是，利用毒素分子上的羧基與螢光物質反應，生成強螢光物質，再進行檢測。HPLC法具有靈敏、準確、可靠、特異性和重現性好、能確定各種毒素成分、使用廣泛、易校正、所需檢測的樣品量少等優點；但毒素標準品價格昂貴、樣品前處理要求較高、需昂貴的設備及高素質的操作人員。液相色譜-串聯質譜聯用技術（LC-MSn）不需使用標準毒素，特別適用於確認毒素和鑑別新毒素。LC/MS法對AZA1的檢測限為50×10-12g，靈敏度為小鼠生物測試的80000倍。Micro-LC-MS-MS法對AZA1的檢測限為20×10-12g。四級桿串聯質譜儀（triple-quadrupole massspectrometer）可以檢測到10-15g濃度水平。
