原位雜交術

原位雜交術(In situ hybridization，ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術，始於20世紀60年代。1969年美國耶魯大學的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交，將該基因進行定位，與此同時Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位，從而創造了原位雜交技術。自此以後，由於分子生物學技術的迅猛發展，特別是20世紀70年代末到80年代初，分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功，為原位雜交技術的發展奠定了深厚的技術基礎。

定義

原住雜交術（in situ hybridization)在研究DNA分子複製原理的基礎上發展起來的一種技術。

原理

其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應帶有標記的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、螢光素生物素、地高辛等非放射性物質)DAN或 RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸。(RNA或DNA）片段進行雜交，然後可用放射自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DAN 的存在與定位；用原位雜交術，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。 此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。

簡易解釋

原住雜交術是根據兩條單鏈核苷酸互補鹼基序列專一配對的特點，套用已知鹼基序列並具有標記物的RNA和DNA片段即核酸探針，將核酸探針與組織切片或細胞內的待測核酸進行雜交，通過放射自顯影處理或免疫組織化學術處理，顯示標記物，在光鏡下觀察目的的mRNA或DNA的存在於定位。