內容
以免疫學理論為基礎的實驗操作技術。它已廣泛套用於各種傳染病、免疫性疾病、腫瘤的診斷與防治。
體液免疫測定法
某些細菌抗原與對應抗體在體內結合時,可出現殺菌、溶菌等現象。抗原與對應抗體在體外結合時,由於抗原的物理性狀和參加物質(電解質、補體等)的不同,可出現凝集、沉澱、補體結合等反應。由於抗體存在於血清等體液中,一般都採用血清進行抗原抗體反應(又稱血清反應)試驗。
皮膚試驗(皮試)
藉助於抗原與抗體或抗原與致敏淋巴細胞在皮膚的反應而進行診斷的免疫學試驗。根據反應機制可把皮試分為下述兩大類:
中和反應的皮膚試驗
超敏反應的皮膚試驗
細胞免疫測定法
用體內試驗和體外試驗測定細胞免疫功能的方法。體內試驗主要是作皮試,測定遲髮型超敏反應(見上節皮膚試驗),常在診斷腫瘤或免疫缺陷病時使用。體外試驗的方法有淋巴細胞分離技術、淋巴細胞轉化試驗、巨噬細胞抑制試驗、玫瑰花結形成試驗(包括總數 E玫瑰花結試驗)、吞噬試驗、四唑氮藍試驗、嗜鹼粒細胞脫粒試驗、淋巴細胞毒性試驗以及組織定型試驗和組織配型試驗等。
標記免疫技術
用各種標記物標記抗原(或抗體),測定相應的抗體(或抗原)的方法。這種技術具有高度敏感性和特異性,因而得到廣泛套用。根據標記方法的不同,主要分為螢光抗體技術(在抗體上標記螢光色素)、放射免疫測定(在抗原或抗體上標記放射性同位素)和酶聯免疫吸附試驗(在抗原或抗體上結合適當的酶)。螢光抗體技術和放射免疫測定雖然套用較廣,但又各有缺點:前者操作時間長,肉眼觀察結果不可靠,也不能定量和自動化;後者自動化設備價格太高,放射性同位素試劑的半衰期很短,而且會危及人體的健康。酶聯免疫吸附試驗具有上述兩法的優點而無其缺點,是一種敏感、快速而簡便的方法。
放射免疫技術
將高靈敏度的同位素示蹤法和高特異性的抗原抗體免疫化學反應結合使用的技術。它由於兼備上述兩種技術的優點,近20年來,已成為發展迅速、用途廣泛的定性、定量和定位的檢測方法。選用適當的放射性同位素標記抗原,並與限量的抗體結合,形成可逆性的標記抗原-抗體複合物。如果加入待測的非標記抗原,則標記抗原與非標記抗原共同爭奪限量抗體,最後達到平衡狀態。加入的非標記抗原越多,標記抗原與抗體的結合就越少。
放射免疫技術已廣泛套用於測定各種激素、腫瘤相關抗原(甲胎蛋白、癌胚抗原)、藥物(地高辛、嗎啡等)、病毒抗原(B型肝炎表面抗原)以及lg等,其靈敏度可達10(~10(克/毫升,為目前最靈敏的分析方法,並有自動化設備。
酶聯免疫吸附試驗
簡稱酶標法,是20世紀70年代新開展的一項免疫血清學技術。當抗原或抗體結合到固相載體表面時,仍能保持自己的免疫活性。把抗原或抗體與酶的結合物再與相應的抗體或抗原結合,即可根據加入酶底物的顏色來判定有無相應的免疫反應。顏色的深淺與標本中相應抗體或抗原的量成正比。酶標法和放射免疫技術同是既特異又敏感的方法。
酶標法中最常用的是間接法和雙抗體夾心法。間接法用於測定抗體。雙抗體夾心法用於測定抗原。另外,還有與放射免疫試驗相似的競爭法,即利用抗原對抗體的競爭性結合來檢測未知的小分子抗原或半抗原。
酶標法具有特異、敏感、快速、簡便和經濟等特點,原則上可用於檢測一切抗原、半抗原和抗體。目前已用酶標法測定血清蛋白質、腫瘤抗原、激素、藥物、各種微生物和寄生蟲的抗原,以及上述各種抗原所產生的相應抗體。在臨床診斷、疾病普查、法醫鑑定、獸醫檢查、植物病害檢驗等方面套用廣泛。
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所屬分類
免疫現代醫學