用品準備
抗Lea、抗Leb試劑血清,待檢者5%紅細胞懸液和已知Le(a+b-)、Le(a-b+)的5%紅細胞懸液,其他材料同ABO血型鑑定。
方法內容
1.取6支小試管排成2排,第1排(單號)及第2排(雙號 )試管分別標以待檢者、Le和Le對照字樣。
2.將抗Le血清1滴分別加入單號管內,抗Le血清1滴加入雙號管內。
3.按標記各加待檢者、已知Le和Le的5%紅細胞懸液1滴。
4.混勻,3000r/min離心15s。
5.斜持試管輕輕晃動觀察紅細胞有無凝集。
結果判讀:先看Le對照,應單號試管凝集,雙號試管不凝;Le對照應雙號試管凝集,單號試管不凝。待檢者單號試管凝集,為Le型,雙號試管凝集為Le型;單、雙號試管均凝集為Le;單、雙號試管均不凝集者為Le型。若出現弱反應,應作間接抗人球蛋白試驗。
注意事項
1.血清中存在豐富的Lewis物質,在體外可在定型時被中和,故須洗滌紅細胞方可定型。2.Lewis抗體在鹽水中凝集紅細胞凝集塊易碎,取出試管不宜搖動,以免出現假陰性。3.採用高效價單克隆抗Le、抗Le血清試劑定型以免遺漏Le血型。
Le抗體
1946年Mourant在一個名叫Lewis的病人血清中首先發現一種天然抗體,大約與22%的英國人紅細胞發生反應,被稱為抗-Le。1946年Andresen發現了抗Le抗體。
Lewis血型系統不同於其他大多數人的血型系統,主要有幾個方面:第一,這是一種存在於唾液與血漿中的可溶性抗原,紅細胞獲得Lewis表型是通過從血漿吸附Lewis物質於紅細胞上; 第二,紅細胞Lewis表型受ABH分泌狀態影響,雖然Lewis基因和分泌基因是獨立遺傳的;遺傳Le基因的人,如果為非分泌者(sese),則紅細胞表型為Le(a+b-),如果為分泌者(Sese或SeSe),則表型為Le(a-b+)(Grubb 1951)(Ceppellini 1955);
第三,因為ABH及Le的基因產物來自同一種前身物質,Lewis表型可受ABO表型的影響,即A1可減低Le(Andresen,1948)以及Le(Cutbush et al 1956)的表達。
抗-Le 在人血清中相對地比較常見,Kissmeyer-?Nielson等1955年從17 000份標本中檢出抗-Le 57份(0.3%)。Salmon等1984年從72 000份中檢出249份,占0.35%。抗-Le只見於Le(a-b-)並分泌ABH物質的人。自身抗-Le曾在多次輸血的Le(a-b-)人中檢出,病人自身紅細胞部分吸收了抗體(Judd等1978)。
抗-Le 常在抗-Le強的人血清中見到,抗-Le自身抗體比較少見。Pettenkufer與Hoffbauer(1954)檢查了12 000個隨機孕婦或新近分娩的婦女,抗-Le有52例,但抗-Le只有2例,大多數含強抗-Le的人不含抗-Le,產生抗-Le而不產生抗-Le的人,常為Le(a-b-),雖然可能為Le(a+b-)。
臨床意義
天然抗體 1983年報導在獻血員中發現二例抗-Le,都屬IgM,一例紅細胞血型為A1Le(a-b-),唾液分泌A,H物質。另一例紅細胞血型為AB,Le(a-b-),唾液分泌A和B物質。二例均不分泌Le和Le物質。Lewis抗體大多為天然發生,屬IgM,所以一般不會引起新生兒溶血病,但國外文獻有抗-Le引起新生兒溶血病的報導。
免疫性抗體 Lewis抗體可以產生溶血性輸血反應,周興娣報導的為抗-Le,於新發報導的為抗-Le+抗-E,於中等1999年又報導了一例抗-Le。