概述
肉毒中毒(botulism)又名軟頸症，是由肉毒梭菌(Clostridum botulinum)產生的外毒素引起的一種中毒病，以運動神經麻痹和迅速死亡為特徵。家禽中這種中毒病流行廣泛，鴨、雞、鵝均可發生，尤其是對大群養鴨業有時會引起大批患病和死亡，應該加以重視。 本病的發生不受地區限制，世界各國均有發生，早期主要發生於放養家禽，近年的報導也有密集飼養的肉雞場多次發生本病的情況。
病原
肉毒梭菌為革蘭氏陽性的粗大桿菌，能形成芽胞，對營養要求不苛刻，厭氧生長，並能在適宜的環境中產生並釋放蛋白質外毒素。肉毒梭菌依據培養特性分成4型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)，依據毒素的抗原性不同分成8型(A、B、Cα、Cβ、D、E、F、G)。人類的肉毒中毒主要由A型、B型、E型和F型引起，禽肉毒中毒主要由c型引起，但也有A型或E型。
C型肉毒梭菌菌體長4～6µm，寬lµm，呈單個散在或短鏈狀排列，革蘭氏染色陽性。有鞭毛能運動，老齡培養物塗片可看到芽胞，位於菌體中端，偶爾芽胞位於菌體頂端。細胞壁中的溶酶能使菌體迅速自溶，亦能引起老齡培養物革蘭氏染色特性改變。菌體自溶時釋放出毒素。
肉毒梭菌毒素是迄今所知的幾種毒性最強的毒素之一。C型肉毒梭菌在厭氧條件下10～47℃的溫度範圍內均可產生毒素，但最適溫度為35～37℃。該菌的生長及分泌毒素需要0.92(aω)的活性水含量，可生長pH5～9，最適生長pH6.8～7.6，產生毒素最適 pH7.8～8.2。
C型肉毒梭菌分泌的C型肉毒毒素據其抗原性而進一步分為α和β兩個亞型。C型肉毒梭菌α亞型可產生4種毒素，C1、C2、C3和少量的D型毒素，其中C1、C3型毒素和D型毒素是由TOX+噬菌體介導產生的。C型肉毒梭菌受前噬菌體吞噬處理後，通過感染在 D型肉毒梭菌的噬菌體作用下可轉變為D型肉毒梭菌。同理，D型肉毒梭菌也可轉變為C型肉毒梭菌。C型肉毒梭菌β亞型由於噬菌體缺乏C1和D型毒素編碼則只能產生C2毒素，而且C2毒素的基因編碼與噬菌體無關。由於C型肉毒梭菌α亞型與β亞型之間可相互轉換，因此α亞型與β亞型之間毒原組合(toxigenic grouping)是否關聯尚存疑問。C1型、D型與A型、B型、E型以及F型毒素都是一種簡單的非毒性多肽，經蛋白酶分解而變成分子量140KD～167KD的雙鏈神經毒素。這種雙鏈神經毒素由一個分子量為98KD的重鏈和一個分子量為53KD的輕鏈組成，兩鏈間由二硫鍵相連，當重鏈和輕鏈分離時毒性消失。
雞、火雞、雉以及孔雀對A型、B型、C型和E型毒素敏感，但對D型和F型毒素不敏感。雞對通過靜脈給予的A型和E型最敏感，相對耐C1毒素作用，相反，鴨和雉對 C1毒素非常敏感。與其他毒素相比C1和C2毒素在雞較易通過消化道吸收。老齡肉雞對 C1毒素不太敏感。剛出雛時雞的半數致死量(LD50)為103.0小鼠-LD50/kg體重，而8周齡時半數致死量(LD50)則為106.3小鼠-LD50/kg體重。
本菌繁殖體抵抗力不強，加熱80℃ 30min或1OO℃ 10min能將其殺死。但芽胞的抵抗力極強，煮沸需6h，120℃高壓需10--20min，180℃乾燥需5～15min才能將其殺死。C型肉毒梭菌芽胞較A型肉毒梭菌和B型肉毒梭菌芽胞對熱更敏感。肉毒毒素的抵抗力較強，在pH3～6範圍內毒性不減弱，正常胃液或消化酶24h內不能將其破壞；但在pH8．5以上即被破壞，因而1％NaOH、0.1％高錳酸鉀加熱80℃ 30min或1OO℃ 10min均能破壞毒素。
流行病學
肉毒梭菌廣泛分布於自然界，也存在於健康動物的腸道和糞便中。本菌在有機質中，在厭氧條件下能產生很強的外毒素，採食這種有毒的有機物後引起中毒。家禽及水禽均可發生本病，以鴨最多，其次是雞、火雞、鵝等較常見，且不受地區限制。現代化養禽業由於較散養業減少了家禽誤食污染食物的機會，而降低了本病的發病率。野生鳥類自然發生 C型肉毒梭菌毒素中毒，據調查有22個科中的117個禽種，鳥類飼養場也有本病發生。哺乳類動物如水貂、雪貂、牛、豬、犬、馬以及許多動物園觀賞的哺乳動物也可感染本病。魚類也發生肉毒中毒。此外，由於飼餵反芻動物鳥糞而引起肉毒中毒，造成嚴重的經濟損失。嚙齒類動物對C型肉毒梭菌毒素非常敏感。
C型肉毒梭菌分布廣泛，在所有鳥類群居地以及飼養場均存在本菌。在鳥類胃腸道中生長繁殖的C型肉毒梭菌是潛在的病原。C型肉毒梭菌芽胞普遍存在於養禽場及養雉場。野生和家養鳥類的胃腸道存在此菌，芽胞有較強的抵抗力，有利於本病的廣泛傳播。
發病率和死亡率與吃入的毒素的量有關，毒素量低則發病率小和死亡率低，但這往往導致誤診。肉雞群大流行時死亡率可高達40％，有的死亡率可高達90％～100％。
本病常在溫暖季節發生，因為氣溫高，有利於肉毒梭菌生長和產生毒素，C型肉毒中毒可因誤食含有毒素的飼料而引起。鑒於病原菌廣泛分布於腸道，死亡的鳥為病原的生長繁殖及產生毒素提供了良好的場所。食肉鳥類誤食這種含有有毒素的鳥類屍體而發病。據測定，有的鳥屍體每克組織中含有高達2 000最小致死量(MLD)的C型毒素。許多腐爛的動物屍體有許多蠅蛆，而這些蠅蛆也含有不同最小致死量(MLD)的毒素，從40 000到100 000不等。雞、鴨以及雉啄食這些含毒的蛆蠅，會導致肉毒中毒。
水生環境中的小甲殼類的內臟及某些昆蟲卵中含有肉毒梭菌，因施藥、水位反覆波動等導致死亡、腐敗，肉毒梭菌即可大量生長繁殖並產生毒素。鴨誤食這些無脊椎動物屍體後即可發生c型肉毒中毒。
一般認為，誤食污染有毒素的飼料等是本病唯一的致病因素，但近年來，也有報導c型肉毒梭菌可在動物體內產生毒素而致病。
臨床症狀
本病潛伏期長短不一，一般於攝食腐敗動植物1～2h至1～2天后出現症狀。雞和鴨皮下或靜脈注射或口服c型毒素所引起的臨診症狀與自然病例一致。高劑量毒素，在數小時內發病，劑量小時，則發生麻痹的時間一般為1～2天。
雞肉毒中毒的臨診症狀主要表現為突然發病，無精神、打瞌睡，頭頸、腿、眼瞼、翅膀等發生麻痹，麻痹現象從腿部開始，擴散到翅、頸和眼瞼。病禽懶動、蹲坐，驅趕時跛行，翅下垂，羽毛松亂，容易脫落。重症的頭頸伸直，平鋪地面，不能抬起，說明頸部麻痹，因此本病又稱為軟頸病。病禽表現腹瀉、排出綠色稀糞，稀糞中含有多量的尿酸鹽，病後期由於心臟和呼吸衰竭而死亡。本病的死亡率與食入的毒素量有關，重症通常幾小時內死亡；輕者則可能耐過，病程3～4天，若延至1周，可以恢復。
病理變化
雞C型肉毒中毒屍體剖檢，可見整個腸道充血、出血，尤以十二指腸最嚴重，盲腸則較輕或無病變，喉和氣管內有少量灰黃色帶泡沫的粘液，咽喉和肺部有不同程度的出血點，其他臟器無明顯變化。因此，大多數人認為本病缺乏肉眼和組織學變化。
診斷鑑別
1．鑑別診斷對肉毒中毒的鑑別診斷是基於特徵性的臨診症狀，缺乏肉眼和組織學變化而定。肉毒中毒的初期症狀是腿、翅的麻痹，這容易與馬立克氏病、腦脊髓炎和新城疫相混淆。但通過病毒的分離，肉眼或顯微鏡的病變觀察能與肉毒中毒相區別。由營養不足或抗球蟲藥物中毒引起的肌肉麻痹，可通過分析可疑飼料來加以鑑別。
2．毒素診斷確診則需要檢查病禽血清、嗉囊以及胃腸道沖洗物中的毒素。一般認為測定血清中毒素含量是比較可靠的診斷方法。
(1)小鼠生物分析法：本法是一種可靠的、敏感的檢查血清中耐熱毒素的方法。試驗分為3組：取0.4ml血清或胃腸內容物上清液，給2隻小鼠腹腔接種；另取2隻小鼠，接種0.4ml加熱處理(煮沸10min)的樣品；將0.8ml待檢樣品與0.2mlC型抗血清混合，37℃作用30min，給2隻小鼠接種，每隻0.5ml。若樣品中有毒素，小鼠出現肉毒中毒症狀，如呼吸困難和肺凹陷如蜂腰狀，並在48h內死亡。若未處理的樣品引起發病為四肢麻痹和死亡，而熱處理的和有c型抗血清處理的小鼠不發病、也不死亡，就說明是C型毒素引起的肉毒中毒。由於引起禽中毒的主要是c型毒素，因此常用C型抗血清進行毒素抗毒素中和試驗。水禽和某些家禽發病時，病禽血清中毒素含量太低，以至於用小鼠生物分析法都不能檢出，在這種情況下則需要對被檢血清進行濃縮或給試驗小鼠反覆注射被檢血清才能確定這些病例中的毒素。
(2)用健康雞複製本病：試驗分為2組：取病雞嗦囊中內容物59加生理鹽水10ml，在滅菌乳缽中研磨製成懸液，室溫浸出1h後用濾紙過濾，將濾液分為2等份，一份加熱100℃ 300min滅活，另一份不處理做對照。用上述滅活液和對照液分別接種2隻健康雞的左右眼瞼皮下各0.2ml。左眼作試驗，右眼作對照。4h後2隻雞左眼麻痹半閉合，敲打雞頭左眼仍睜不開，而右眼閉合自如。18h之後全部死亡。也可採用自然感染健康雞，飼餵病雞嗦囊內容物試驗複製出該病。在實際診斷中有一定參考價值。鴨肉毒中毒亦可用此法進行快速診斷。
(3)反向間接血凝試驗：用精製A-F型抗毒素血清將醛化紅細胞致敏製成診斷用紅細胞。以此進行反向間接血凝試驗，可直接檢查罐頭食品、飼料、胃內容物及其他某些媒介物中的肉毒毒素，其敏感性與小鼠腹腔接種法相近。
(4)瓊脂擴散試驗：用被檢材料與已知型別的抗毒素血清進行瓊脂擴散試驗，可對所含毒素予以定型。
3．病原菌分離厭氧分離肉毒梭菌對本病診斷意義不大，因為本菌在正常消化道中廣泛分布。但對飼料及環境樣品中肉毒梭菌的檢測有助於流行病學調查。欲想從家禽或環境中分離出肉毒梭菌，應無菌採集病料(嗉囊、十二指腸、空腸、盲腸、肝、脾等)。環境樣品有飼料、飲水、墊草、土壤等。
防制措施
1．管理措施 是一種毒素中毒病，要著重清除環境中肉毒梭菌及其毒素來源。及時清除死禽，對預防和控制本病非常重要。不使家禽接觸或吃食腐敗的動物屍體，凡死亡動物應立即清除或火化，注意飼料衛生，不吃腐敗的肉、魚粉、蔬菜和死禽。在疫區及時清除污染的墊料和糞便，並用次氯酸或福馬林徹底消毒，以減少環境中的肉毒梭菌芽胞的含量。芽胞存在於禽舍周圍的土壤中，很易被帶回禽舍內。建議對禽舍周圍進行消毒。滅蠅以減少蛆的數目，對本病的預防也有所裨益。一旦暴發流行本病，飼餵低能量飼料可降低死亡率。此病的發生常與夏秋天氣悶熱和乾旱季節湖水下降引起湖內水生動物死亡有關，應注意避免在此放牧鴨群。
2．治療 本病尚無有效藥物治療，只能對症治療。據測定肉毒梭菌在體外對13種抗生素敏感，但抗生素對毒素無效。中毒較輕的病禽可內服硫酸鈉或高錳酸鉀水洗胃，有一定效果；飲5％～7％硫酸鎂，結合飲用鏈黴素糖水有一定療效。抗生素桿菌肽(100g/t飼料)、鏈黴素(1g/L飲水)以及定期使用氯黴素均可降低死亡率。
3．疫苗接種 類毒素製劑成功地保護了雞和鴨試驗性感染。由於成本等原因，生產上雞、鴨等未廣泛進行疫苗接種。
