流行病學方面的研究進展
犬小孢子菌是世界範圍流行的致病性真菌,就北美地區而言〔1〕,該地區100年前頭癬的病原犬小孢子菌占首位,隨後奧杜昂小孢子菌占居首位,現在以斷髮毛癬菌最常見,而今該地區犬小孢子菌發病率也有上升的趨勢。其他國家對犬小孢子菌的流行情況變化也十分重視,各國和地區在真菌病流行病學研究中常對其進行統計,Hay〔13〕經統計歐共體中19國家的92個真菌研究實 驗室的研究得出的結論:在1987~1997年期間歐共體在加勒比地區兒童患犬小孢子菌所致的皮膚真菌病發病率有大幅增加,最為常見的臨床表現是頭癬。因此,歐共體各國希望共同進行以預防為目的的頭癬普查工作。綜上所述,除了個別地區或國家發病率較低外,犬小孢子菌在世界範圍流行,發病率基本在淺部真菌病的前四位,在許多國家占首位,而且總體發病率有上升的趨勢。臨床學方面研究進展
在義大利〔13〕,犬小孢子菌是頭癬最主要的病原菌(占90.5%),由此可見頭癬是其首要臨床表現,同時也有些臨床表現較為特殊,Zoror〔14〕報導1例犬小孢子菌所致的膿癬。為一8歲兒童,在頭頸部形成一3cm×5cm大小的膿腫,無明顯脫髮,有觸痛。同時,亦有嬰兒和成人頭癬臨床表現可為糠疹樣皮損的報導〔15〕。同時犬小孢子菌也可以感染光滑皮膚及指(趾)甲引起體癬和甲癬(極為少見),當感染有系統疾病或免疫力受損的患者時可出現一些不典型的臨床表現,如HIV患者、接受器官移植患者等〔16〕,可出現多形紅斑樣皮損,伴有散在小丘疹,邊界可不清晰,可無或稍有皮屑。在心肺移植手術後的犬小孢子菌感染者可出現紅斑基礎上的膿皰並伴有散在的丘疹〔17〕。而當患有血管性疾病導致局部的皮膚抵抗力下降時,皮損可表現為紫紅色斑片,有時伴有劇烈瘙癢,皮屑較少,邊界不清。當患有遺傳性代謝性疾病時犬小孢子菌也可導致頭皮足菌腫〔18〕,但十分少見。當免疫力正常的患者感染犬小孢子菌時,由於病變在皮膚較為薄嫩的部位,表現亦可不典型。犬小孢子菌所致的真菌性包皮炎,表現為錢幣大小的紅斑,邊界不清,稍微隆起同時伴有包皮垢增多。而有的患者可表現為類似念珠菌所致的龜頭包皮炎,在冠狀溝處可見散在小皮疹 。還有關於犬小孢子菌導致外耳道炎的報導。局部長期套用抗生素或皮質類固醇可導致犬小孢子菌感染〔19〕,皮損類似頑固性皮炎,皮屑較多可伴有瘙癢,邊界不清。分子生物學方面的研究進展
近年來,分子生物學在各醫學領域中的廣泛套用推動了人們對微觀世界的認識,同時也為廣大真菌學工作者提供了新的研究方法。不少真菌學家已開始在分子水平上研究犬小孢子菌的生物學和基因特徵,以了解犬小孢子菌的分子生物學特徵與致病機制的關係並為臨床快速確診提供實驗室依據。就較新研究論述如下:Papini〔20〕將從70隻貓狗身上分離得到的犬小孢子菌通過Api-Zym試驗對其19種胞外酶進行分析。實驗中發現鹼性磷酸酯酶、β-葡糖苷酶、脂肪酶(C14)、胰蛋白酶、糜蛋白酶、β-葡糖醛酸酶、α-岩藻糖苷酶不表現活性;而酸性磷酸酶在64例中表現其活性占91%,酯酶(C4)在57例中表現其活性占81%,α-甘露糖苷酶在51例中表現其活性占73%,N-乙醯-β-葡糖胺酶在41例中表現其活性占58%,亮氨酸芳基醯胺酶在35例中表現其活性占50%,質粒脂肪酶(C8)在31例中表現其活性占44%,α-葡糖苷酶在25例中表現其活性占36%,纈氨酸芳基醯胺酶和胱氨酸芳基醯胺酶各在7例中表現其活性占10%,α-半乳糖苷酶在5例中表現其活性占7%。較特殊的β-半乳糖苷酶在6例中表現活性占8%,其在犬小孢子菌中的表現活性是首次報導。有真菌學者研究〔21〕犬小孢子菌所產生的胞外酶與其致病力的關係,發現角蛋白酶的活性與犬小孢子菌所致的皮膚真菌病臨床表現程度呈正相關。 Mignon〔22〕通過研究感染犬小孢子菌的荷蘭豬了解犬小孢子菌的細胞外抗原。套用ELISA技術測定實驗組荷蘭豬的血樣本,並與對照組(注射了純化31.5kD角蛋白酶的荷蘭豬)的血樣本進行比較。實驗組在感染後第14天和第57天可發現遲髮型超敏反應,21天可測到針對天然菌表面抗原的特異性IgG,而未測到抗角蛋白酶的IgG。對照組在注射了純化31.5kD角蛋白酶的第14天和第57天僅有少數出現遲髮型超敏反應。由此可說明犬小孢子菌主要抗原不是31.5kD角蛋白酶。有研究人員通過對兔子進行類似實驗得到與以上一致的結論。
基因水平的研究尚屬起步階段,Charles〔23〕套用PCR和RT-PCR的方法研究多種真菌的ACT(Actin)的基因序列,希望通過ACT的基因測序以達到快速檢測真菌病原菌的目的。經過對多種致病性真菌(包括犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌等)ACT的研究發現犬小孢子菌的ACT基因序列與須癬毛癬菌、紅色毛癬菌、絮狀表皮癬菌等致病性真菌的基因序列不同,可用於臨床快速診斷真菌病原菌。該方法雖可在較短時間內診斷病原菌(48h),但操作繁瑣,費用高,實驗條件要求較為嚴格,因此在國內不易推廣。而有人認為可套用PCR技術測定標本中犬小孢子菌的幾丁質合酶1基因存在與否來快速診斷犬小孢子菌所致的皮膚真菌病〔24〕,該方法的有效性有待於臨床檢測。