基因外啟動子

基因外啟動子

基因外啟動子,指的是位於基因轉錄區以外的啟動子。許多小RNA基因、H1 RNA基因和U6 RNA基因等具有基因外啟動子。

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鑑定朊蛋白(PrP)基因轉錄啟動子位置。方法利用聚合酶鏈反應(PCR)擴增人PrP基因外顯子Ⅰ及其上游序列,序列鑑定後插入CAT報導質粒pBL-CAT6,分別轉染HeLa、COS7和Sh-sy5y細胞系,檢測CAT表達值;提取三種細胞蛋白,以條帶移動實驗檢測細胞轉錄激活因子SP1含量。結果人PrP基因外顯子I及其上游序列為GC富含,帶有多個SP1可能性綜合位點,但無明顯TATA盒;瞬時轉染結果顯示這段序列可誘導2~3倍的CAT表達增強;定量移動條帶實驗證明HeLa細胞中含有較高濃度的SP1,而COS7和Sh-sy5y細胞中SPI含量極低。結論人PrP基因外顯子I及其上游序列具有啟動子樣功能,為弱的非TATA盒啟動子;不同組織來源的細胞中SP1含量不同,在神經細胞系Sh-sy5y中人PrP基因外顯子I

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