單鏈構象多態性

單鏈構象多態性（single-strand conformation polymorphism，SSCP）是一種分離核酸的技術，可以分離相同長度但序列不同的核酸（性質類似於DGGE和TGGE，但方法不同）。

基本信息

• 中文名：單鏈構象多態性
• 英文名：SSCP

• 定義：分離核酸的技術
• 領域：生物學

原理

單鏈構象多態性

單鏈構象多態性（Single-strand conformation polymorphism，SSCP)分析可以檢測DNA序列之間的不同。SSCP首先由Lee 等用於研究自然微生物群體的多樣性。在低溫條件下，單鏈DNA呈現一種由內部分子相互作用形成的三維構象，它影響了DNA在非變性凝膠中的遷移率。相同長度但不同核苷酸序列的DNA由於在凝膠中的不同遷移率而被分離。遷移率不同的條帶可被銀染或者螢光標記引物檢測，然後用DNA自動測序進行分析。用PCR-SSCP技術可以進行序列差異的測定，而敏感度會隨著片段長度的增加而降低。但是只要條帶被凝膠電泳分離開就可以進行系統發育的研究。在Schmalenberger和Tebbe的研究中，測序技術表明一個單鏈也許包括多種序列，電泳條件也會因此影響基因結構的確定進而影響生物多樣性的研究。

實驗步驟

利用PCR從提取出的DNA中擴增16S rRNA基因。
利用λ-外切核酸酶消化掉一條鏈（其中一個PCR引物被磷酸化，這條鏈將被去除）。
非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)。

套用

單鏈構象多態性可用於預篩選克隆文庫。
可對其中的某一個條帶進行測序，並與資料庫中已知序列比對。