變性聚丙烯醯胺凝膠

變性聚丙烯醯胺凝膠是分子生物學常用技術之一，凝膠的灌制比水平電泳槽凝膠灌制困難，漏膠和產生氣泡常在所難免，需經過反覆實踐才能掌握其灌制技巧。用途：運用變性聚丙烯醯胺凝膠垂直電泳分離PCR產物條帶，硝酸銀染色顯示條帶進而篩選兩者間差異基因。

變性聚丙烯醯胺凝膠電泳適合變性蛋白的處理，非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳（native-PAGE）可以保持蛋白的天然構象與活性。對蛋白類型要求如下：SDS-PAGE適用於絕大多數蛋白，分離只與分子量有關。
而在緩衝液中帶正電荷的蛋白不能在native-PAGE的跑動，所以native-PAGE不能用來分析這樣的蛋白（pI>緩衝液pH）。
非變性聚丙烯醯胺凝膠和變性sds-page電泳在操作上基本上是相同的，只是非變性聚丙烯醯胺凝膠的配製和電泳緩衝液中不能含有變性劑如SDS等，

注意

1）在非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳的過程中，蛋白質的遷移率不僅和蛋白質的等電點有關，還和蛋白質的分子量以及分子形狀有關，其中蛋白質的等電點是最重要的影響因子，要根據蛋白質的等電點來選擇對應的電泳緩衝系統；
2）在非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳的過程中，要注意電壓過高引起發熱而導致蛋白質變性，所以最好在電泳槽外面放置冰塊以降低溫度；
3）你的蛋白質的分子量為17000kd，分子量較大，所以電泳時間可以適當延長，以使目的蛋白質有足夠的遷移率和其它的蛋白質分開。

相關詞條

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參考連結

1、http://www.helixnet.cn/archiver/tid-2721.html
2、http://scitech.people.com.cn/GB/other2137/
3、http://book.sina.com.cn/nzt/spi/gongzuodna/