合成基因

簡介

全基因合成

在解釋權基因合成前,先了解一下什麼是“基因
下面收錄了對"基因"的五個定義,實為異曲同工.
1,基因是存在於細胞內有自體繁殖能力的遺傳單位.
2,基因是一個具有遺傳功能的特定核苷酸序列的DNA片段.

合成基因合成基因

3,編碼一個RNA或一條多肽鏈的DNA片段稱為一個基因.
4,基因是生物體遺傳的基本單位,存在於細胞的染色體上,作直線排列.
5,基因是生物體內一切具有自主複製能力的最小遺傳功能單位,其物質基礎是一條以直線排列.具有特定核苷酸序列的核酸片段.由眾多基因構成了染色體.每個基因大體在1000-1500bp的範圍,相對分子質量約為670000.
合成基因合成基因
DNA是十分龐大的生物分子。病毒含有幾千到幾十萬個核苷酸,原核生物的DNA分子平均為10E6個鹼基對,真核
合成基因合成基因
生物的DNA分子可達l0E9個鹼基對。按每個基因平均為1000個鹼基對進行粗略的計算,大腸桿菌約有3000-4000個基因,而人類細胞的基因數目可高達200萬個。雖然其中某些基因,特別是真核細胞內的一些基因是多拷貝的,在基因組內有多個甚至極多個重複,實際基因數要比上述推算的基因數要少得多。儘管如此,原核細胞和真核細胞基因組內的基因數目仍然是極為驚人的。
由於研究某些基因或者某種蛋白的生理作用,例如生理活性等,因此,需要通過人工實驗的方法合成一段全基因序列。
經過基因工程學工作者艱苦細緻的探索研究,人們現在已經掌握了分離和製造目的基因的一些有效方法。一般來
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說,目前獲取目的基因的方法主要有三種:反向轉錄法、從細胞基因組直接分離法和人工化學合成法,這些方法都有一個前提.

1)反向轉錄法:這種方法主要用於分子量較大而又不知其序列的基因,它以目的基因的mRNA為模板,設計上下游引物,藉助反轉錄酶合成鹼基互補的DNA片段,即cDNA,再在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈cDNA,亦即目的基因的雙鏈DNA。
2)基因組擴增法:利用基因組抽提試劑盒,可以從細胞、植物、血液、動物組織中直接

合成基因合成基因

分離基因組,設計特異擴增的引物,利用抽提的基因組為模版,直接PCR擴增,以獲取目的基因。
3)人工合成:依照某一蛋白質的胺基酸序列,或基因序列,設計全長引物,利用OVERL

合成基因合成基因

AP方法形成模版DNA,再利用PCR擴增的方法得到雙鏈DNA,然後將PCR產物轉化克隆至克隆載體或者表達載體中。化學合成全基因目前是準確率最高,速度最快的方法,同時可以依據密碼子在不同宿主細胞的偏愛性和不同的實驗需求,設計基因序列,提高表達水平。

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