原位核酸分子雜交技術
簡稱 原位雜交 (in situ hybridizationISH)
原位核酸分子雜交技術原理
是套用已知鹼基順序並帶有標記物的核酸探針與組織、細胞中待檢測的核酸按鹼基配對的原則進行特異性結合而形成雜交體，然後再套用與標記物相應的檢測系統，通過組織化學或免疫組織化學方法在被檢測的核酸原位形成帶顏色的雜交信號，在顯微鏡或電子顯微鏡下進行細胞內定位。這一技術為研究單一細胞中DNA和編碼各種蛋白質、多肽的相應mRNA的定位提供了手段，使從分子水平研究細胞內基因表達及有關基因調控提供了有效的工具。可視為組織化學或免疫細胞化學中革命性的突破。
原位雜交技術的套用
原位雜交技術已套用於基礎研究如基因組圖(Gene mapping),轉基因檢測,基因表達定位(localization of gene expression),核DNA和RNA的mRNA的排列和運輸(arrangement and transport of mNA),複製(replication)和細胞的分類(Sorting of cells)。臨床研究套用在細胞遺傳學(Cytogenetics),產前診斷(Prenatal diagnosis),腫瘤和傳染性疾病的診斷,生物學劑量測定(biological dosimetry)和病毒學的病原學診斷等。
原位雜交技術的前景
隨著核酸探針的製備,標記方法和基本操作方法的不斷改進,新的技術不斷湧現,相信在不久的將來,原位雜交技術將會更廣泛的被套用於各個學科,並不斷為生命科學提供新的資料,開拓新的領域。
