分泌肽段

複製人羧肽酶全酶肽段基因，構建重組表達載體，並在COS7細胞中分泌表達.方法：以胰腺總RNA為模板，RTPCR擴增CPA1全酶基因；再以全酶基因為模板，PCR擴增其4條肽段基因；擴增產物分別克隆於分泌表達載體pFLAGCMV1中構建重組載體；然後用脂質體轉染COS7細胞，分泌表達融合FLAGtag的目的蛋白和肽段；點印跡法檢測目的蛋白的表達.結果：獲得了CPA1全酶及其4條肽段基因，構建了重組表達載體，測序證實插入序列正確，並在COS7細胞中成功分泌表達了融合FLAGtag的目的蛋白和肽段.結論：在COS7細胞成功分泌表達了融合FLAGtag的CPA1全酶及其4條肽段，為下一步酶活性測定奠定了基礎.

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