適用情況
食物
該規則經常被用於餅乾等零食。支持該規則的人認為，落地五秒內有害細菌無法感染食品。例如：將糖果遞給朋友時，糖果不慎失手落地。這時，負面情緒會籠罩在周圍，此時拾起糖果，一切就會像沒有發生一樣。
不適用情況
五秒規則通常不適用於以下情況：
冰激凌等有粘性的食品；
烤麵包片黃油一面落地的場合；
從別人手裡接過的食品。
雖經多方考證，依然不知道該規則的發明者是誰。
5秒規則有實驗表明，乾淨的地板是安全的（參見相關研究）。不過，五秒內細菌不會從髒地板轉移到食物上的想法是錯誤的。因為引起食品污染的核心，不是塵埃，而是那些肉眼看不見的病菌。雖說在通常情況下，兩者總在一塊兒，但有時卻並不是那么一回事兒。比如：打掃得很乾淨的傳染病醫院的地板，比起其他看起來很髒的地方，可能會有更多的病菌。
版本介紹
五秒規則有很多版本，如：三秒規則、十秒規則、十五秒規則等亂七八糟的版本。另外，環境及個人對衛生要求的不同，也導致了各種不同版本的產生。比如在美國大學宿舍內，通常執行的是十秒規則。
在家中，規則允許的時間通常會很長；在公共場所比如餐館，這個時間則會縮短。在大企業的會議中、業務交流的場合、同僚的聚會中、被質檢員或管理者注意的場合，該規則無效。
一些三秒規則認為：“細菌第一秒發現食物，第二秒伸一隻手抓住食物，第三秒兩隻手都抓住了食物。”因此，三秒以內拾起的食物是未被污染的。
相關研究
美國克萊姆森大學從事食品科學研究的道森教授就針對“5秒規則”做過一系列實驗。他和同事們先讓含沙門氏菌的培養液均勻復蓋在瓷磚上，並在室溫條件下培養以觀察細菌數量隨著培養時間的變化。實驗結果表明，細菌們非常頑強。在乾燥環境下，24小時以後瓷磚每平方厘米的細菌數量可以達到上千個，672小時即28天以後，每平方厘米瓷磚上仍有幾十到幾百個細菌不等，而這個數量的細菌已足夠從瓷磚表面轉移到食物上。
接著，他們用香腸片分別與表面培養了一段時間沙門氏菌的木頭、瓷磚和地毯接觸5秒、30秒或60秒。實驗結果顯示，當食物接觸剛剛被細菌污染的木頭或瓷磚時，細菌轉移率可達到50%-70%，而轉移到食物上的細菌數量有每平方厘米幾百到上千個。
五秒規則相比較木頭與瓷磚，從地毯到食物的細菌轉移率要低得多，只有不到1%。不過可不要誤以為地毯更安全衛生，實際上，由於地毯的環境更適合細菌生長，即便細菌轉移率如此之低，轉移過去的絕對數量還是跟木頭和瓷磚相差無幾，所以5秒接觸帶來的細菌和10秒、60秒幾乎一樣多，細菌的轉移是立即發生的，你的手再快也快不過細菌。
相關介紹
每個人都遇到過食物掉在地上的經歷，但還是可以撿起來吃的，因為這就是所謂的“五秒”原則。
微生物學家現已把這個理論做了一次實驗進行證實，試驗結果證明此規則確實存在，食物因掉在不同類型的地板上染上細菌的時間也不盡相同。
出人意料的是，研究人員發現地毯表面最有可能傳播細菌，濕的食物，如麵食和甜食，細菌傳播到食物上用的時間為五秒規則。
在阿斯頓大學，安東尼C.希爾頓教授帶領生物學系大四的學生們做了這項研究。
他們從室內地面，包括地毯，層壓板和瓷磚地面上監測到的細菌是常見的大腸桿菌、金黃色葡萄球菌。
麵包、麵食、餅乾和粘性甜食染上細菌的時間在3至30秒之間。
