《男性生殖基礎與實驗室研究》:《男性生殖基礎與實驗室研究》共8章，前5章 -百科知識中文網

內容簡介

第六、七、八章為實驗方法學部分，主要闡述了目前細胞生物學、分子生物學和基因功能分析技術常用實驗方法的原理及其在男性生殖基礎研究中的套用，這部分是以筆者實驗室工作為基礎，對其中的某些方法進行了較為詳細的介紹，如細胞的分離純化、免疫組織化學分析技術、免疫螢光技術、核酸提取及電泳、PCR技術、分子雜交和晶片技術、重組DNA技術、RNA干擾技術和基因敲除技術等。書中附有大量圖片，可幫助讀者加深對相關內容的理解。《男性生殖基礎與實驗室研究》既涵蓋了男性生殖主要的基礎理論知識，又闡述了常用的實驗室技術方法，對從事人類生殖基礎研究的科研工作者具有參考價值。

作者簡介

郭睿，女，1972年3月生人，理學博士，副教授，碩士研究生導師。1994年畢業於山西醫學院兒科學專業，1997年獲山西醫科大學免疫學專業碩士學位，200l～2004年攻讀中國醫學科學院／中國協和醫科大學基礎醫學研究所細胞生物學專業博士並獲博士學位。2005年留學歐洲生命科學最高學府——瑞典KarolinskaInstitutet進行博士後研究。自1997年開始從事生物化學與分子生物學專業的科研及教學工作，先後承擔了博士研究生、七年制碩士研究生、本科生和專科生的專業課程講授，教學效果突出，於2005年作為主講教師之一榮獲由山西省教育廳授予的省級精品課程稱號。進行科研工作15年來，先後參與和主持多項科研工作，主要從事分子發育生物學和腫瘤相關基因分子作用機制的研究。目前主持國家自然科學基金項目1項，省級項目3項，獲2008年度山西省高等學校優秀青年學術帶頭人支持計畫1項；共發表科研論文23篇，其中SCI收錄7篇，國家級核心期刊9篇；參與編寫生物化學教材3部。

第一節　精子發生的內分泌調控
第二節　精子發生的基因調控
第三節　精子發生的旁分泌調控
第三章　精子的成熟與獲能
第一節　精子在附睪內的成熟
第二節　精子獲能
第四章　精子的受精功能
第一節　頂體和頂體酶類
第二節　受精的基本過程
第五章　生精細胞的凋亡
第一節　細胞凋亡
第二節　生精細胞的凋亡
第三節　影響生精細胞凋亡的因素及可能機制
第六章　細胞生物學實驗方法在男性生殖基礎研究中的套用
第一節　細胞組分的分析方法
第二節　生精細胞的分離和純化
第三節　細胞形態結構的觀察方法
第四節　雷射共聚焦顯微鏡的使用
第五節　流式細胞術
第六節　細胞培養與細胞工程
第七章　分子生物學基本技術在男性生殖基礎研究中的套用
第一節　真核細胞核酸提取技術
第二節　核酸及蛋白質電泳技術
第三節　聚合酶鏈反應（PCR）技術
第四節　印跡和分子雜交技術
第五節　基因晶片技術
第六節　重組DNA技術
第七節　雙向電泳和質譜技術
第八章　基因功能分析技術
第一節　RNA干擾技術
第二節　核移植技術與動物克隆
第三節　轉基因技術與轉基因動物
第四節　基因敲除技術

精彩書摘

第二章　精子發生的調控
精子發生是一個複雜而有規律的周期性同步發育過程，受許多特異分子及細胞間作用的嚴格調節，包括自身染色體結構的變化及一系列特定基因的程式性表達。這些內在基因水平的變化又受許多外部因素如激素、環境因素及旁分泌細胞因子的影響。雄性哺乳類個體大致從內源性、相互性、外源性三個層次對這一過程的基因表達進行調控。
生精細胞內源性機制調控精子發生中的關鍵事件，如減數分裂、精子變形等特異性活動。該機制調控不同的基因按嚴格的時間、空間特定表達，以保證精子發生能正常進行。以Sertoli細胞為中心的細胞間相互調節機制在保證精子的周期性同步發育上具有舉足輕重的作用。每一個Sertoli細胞都同時與不同發育階段的3～4層生精細胞緊密接觸，還與其他支持細胞以及Leydi9細胞、曲精小管周圍細胞發生相互作用，是最適於整合、協調各種信號的中心樞紐。從整體意義上講，相互性調控機制又受控於以睪酮、黃體生成素（Iuteinizinghormone，LH）和促卵泡激素（folliclestimulatinghormone，FSH）為主的外源性機制的控制，Leydi9和Sertoli細胞表面分別存在LH和FSH受體，LH可刺激Leydi9細胞分泌睪酮，彌散進入曲細精管，在睪酮和FSH的聯合刺激下，Sertoli細胞可分泌包括雄激素結合蛋白在內的多種生精細胞分化所需的多肽等物質，從而影響精子發生。因此，Sertoli細胞是精子發生和睪酮、FSH調控的主要靶點，而後二者又調控著精子的發生、分化以至成熟。也就是說，機體內分泌系統通過直接影響睪丸內體細胞的基因表達，來調節相互性作用機制賴以生存的周邊環境，進而影響生精細胞的基因表達。