檢測原理
膽鹼酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍色),有機磷或氨基甲酸脂類農藥對膽鹼酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。
使用方法
整體測定法
選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10ml純淨水或緩衝液,震搖50次,靜置2min以上。
取一片農殘速測卡,撕去上蓋膜,用白色藥片沾取提液,放置10min以上進行預反應,有條件時,在37℃恆溫箱裝置中放置10min。預反應後的藥片表面必須保持濕潤。
將農藥殘留快速檢測卡對摺,用手捏3min或恆溫裝置中放置3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發生反應。根據白色藥片的顏色變化判讀結果。
每批測定應設一個純淨水或緩衝液的空白對照卡。
表面測定法
擦去蔬菜上的泥土,滴2~3滴洗脫液(蒸餾水)在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。
取一片農殘速測卡撕去簿膜後,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。
放置10分鐘以上進行預反應,有條件時在37℃恆溫裝置中放置10分鐘。預反應後的藥片表面必須保持濕潤(不夠時再加一滴)。
將速測卡對摺,用手捏3分鐘或用恆溫裝置恆溫3分鐘,使紅色藥片與白色藥片疊合發生反應。
每批測定應設一個洗脫液或蒸餾水的空白對照卡,以作參照。
判斷標準
與空白對照卡比較,白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結果。不變藍為強陽性結果,說明農藥殘留量很高,顯淺藍色為弱陽性結果,說明農藥殘留量較高。白色藥片變為天藍色或與空白對照卡相同,為陰性結果。對陽性結果的樣品,可用其他分析方法進一步確定具體農藥品種和含量。
檢測下限
農藥殘留速測卡對幾種常用農藥的最低檢測限(單位mg/kg)如下:
甲胺磷 | 1.7 | 乙醯甲胺磷 | 3.5 | 水胺硫磷 | 3.1 | 對硫磷 | 1.7 | 樂果 | 1.3 |
久效磷 | 2.5 | 馬拉硫磷 | 2.0 | 敵敵畏 | 0.3 | 敵百蟲 | 0.3 |
呋喃丹 | 0.5 | 西維因 | 2.5 | 好年冬 | 1.0 | 氧化樂果 | 2.3 |
注意事項
蔥、蒜、蘿蔔、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質,容易產生假陽性。處理這類樣品時,可採取整株(體)蔬菜浸提。對一些含葉綠素較高的蔬菜,也可採取整株(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾。
.農殘速測卡對農藥非常敏感,附近有農藥噴灑或使用衛生殺蟲劑,以及操作者手上或器具上沾有微量農藥,都會造成對照與檢測卡片變色出現誤差。
.觀察結果時應以紅色藥片與白色藥片疊合發生反應3分鐘為準,3分鐘後藍色逐漸會加深,24小時之後顏色會逐漸退去。詳細說明請參照國家標準(GB/T 5009.199-2003)《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》
當溫度低於37℃,酶反應的速度隨之放慢,藥品加液後放置反應的時間應相對延長,延長時間的缺點,應以空白對照卡用手指(體溫)捏3min時間可以變藍,即可往下操作(註:若檢測量大,可配置恆溫水箱或使用用農藥殘留快速檢測儀)。注意樣品放置的時間應與空白對照卡放置的時間一致才有可比性。空白對照卡不變色的原因 :一是藥片表面緩衝液加的少,預反應後的藥片表面不夠濕潤,二是溫度太低,需進行適當的保溫。
紅色藥片與白色藥片疊合反應的時間以3min為準,3min後藍色會逐漸加深,24h後顏色會逐漸褪去。
保存條件
陰涼、乾燥、避光保存,有條件者放於4℃冰櫃中最佳。農殘速測卡開封后最好在三天內用完,如一次用不完可存放於乾燥器中,一周內用完。產品保質期一年。