國內與國外細胞學的發展情況
在延續套用告流巴氏塗片將近50年的80年代裡,美國報導了大量宮頸塗片診斷為假陰性(文獻報告為2%-5%)的病例,引起了人們的震驚,假陰性診斷使宮頸癌者延誤了最好的治療機會,而假陰性診斷則給患者造成不必要的傷害。因此對傳統的巴氏塗片漏診或誤診其主要原因是取材時細胞丟失和塗片質量差,塗片上的大量紅細胞、白細胞、黏液及脫落壞死細胞都會降低細胞陽性率。基於以上缺點,細胞工程專家推出了一種製片新技術-----液基薄層細胞學技術,它的改正主要通過技術處理丟掉非診斷雜質,製成觀察清晰的薄層細胞片,使閱片者更易觀察,診斷準確性明顯提高。這一新技術於1998年引入中國,在一些發達城市如廣州、北京、上海、香港套用及推廣,大大提高了宮頸癌篩查的靈敏度和特異度。
現在國內幾種液基薄層技術
根據市場調場在一些發達城市我國套用液基薄層技術有以下幾種:首先是新柏氏液基薄層細胞學檢測系統(ThinprepcytologictestTCT):主要方法是將宮頸脫落細胞決入放有細胞保存液的小瓶中,刮片毛刷在小瓶內攪拌數十秒種,再通過膜的負壓過濾法,將標本中的雜質分離,取濾後的上皮細胞製成直徑為20mm薄層細胞於載玻片上,95%酒精固定,白巴氏染色、封片、顯微鏡下閱片,按TBS法作出診斷報告,提高陽性率的檢測但成本比較貴,在中小城市不能接受其次是CCT電子掃描圖片採集法:取材法與TCT一樣只是在操作中利用計算機採集可疑圖片,其操作上也不是很好。
再次是近兩年來國內仿造TCT製片器,有湖北孝感,廣州的三瑞等,其取材法和製片,是外形而內不形,但也可以說是我國的一些進步,但也有許多弊端在操作過程中有白片、爆膜。
再次是一些沉澱離心法,利用保存液保存細胞進行手工離心操作,其方法操作起來繁鎖,對一些體檢單位不是很好。
改良以上國內外液基薄層片技術的缺點,推出一種新的產品HQTCT超薄層液基製片技術:它的方法是將宮頸脫落細胞洗入放有細胞保存液的小瓶中,用特製宮頸取樣刷在小瓶內攪拌數十秒鐘,再通過高精密度單/雙膜負壓濾過膜法,把標本中的雜質抽吸分離,取濾後的上皮細胞製成直徑為20mm薄層細胞於載玻片上固定,經已氏染色、封片,顯微鏡下閱片按TBS法作出診斷報告。製片時間縮短,質量上與TCT製片能相媲美,價格上比任何產品都實惠。
TCT與HQTCT技術性能的比較
TCT | HQ-T | |
時間 | TCT製片約40片每天 | HQ製片每30秒鐘一片 |
效果 | TCT製片效果薄百均勻,直徑20mm,背景清晰 | HQ製片效果薄而均勻,細胞飽滿度高,背景清晰 |
可診斷性 | TCT可診斷性細胞有上皮細胞,成團的宮內膜細胞,頸管細胞,化生細胞 | HQ可診斷性細胞有化生細胞,成團的頸管細胞,宮內膜細胞,上皮細胞等 |
處理時間 | TCT碰到有血、黏液的標本都需要進行前處理1個多小時 | HQ碰到有血、黏液多的標本一般不需要處理,可振盪搖勻2-5分鐘 |
白片率 | TCT製片的白片率大約在20%,一般出現有碰到血C多或C少或黏液多 | HQ製片的白片率幾乎沒有,100%製片成功 |
原理 | TCT製片的原理是利用機器進行直空抽吸,5-7u的膜的負壓過濾,法取濾後上皮細胞製成直徑為20mm薄層細胞於載玻上 | HQ製片的原理是利用高精密度膜的負壓抽吸過濾法,正在轉移到直徑為20mm薄層細胞乾的載玻片上 |
陽性率 | 對異常細胞診斷率提高了103%,對低度鱗狀上皮以上病變的檢出率提高了200% | 同樣 |
價格 | TCT製片儀器在40-60萬左右,而耗材市場價在120元 | HQ每個試劑附帶一個單膜/雙膜法專利製片器附帶儀器,價格在98元 |
適用範圍 | TCT做宮頸細胞檢查,但腹水,痰液難於處理 | HQ可以做宮頸細胞檢查,胸腹水痰液,腦脊液 |
宮頸癌檢測試劑(保存液、清洗液)
◆無需特殊設備,輕鬆擁有領先技術和產品。
◆操作簡單,無需培訓,易於掌握。
◆無毒無害的試劑成份,科學合理的配方,大大降低了檢測費用。
保存液
◆採集的樣本細胞100%被保存。
◆常溫下標本可保存20天,保證細胞形態不變形不破壞,便於複查。
◆有大量細胞可用於診斷(10000至20000個細胞)
清洗液
◆採用了先進的清潔技術,有效祛除黏液、細胞碎片,血細胞等雜質。
◆塗片背景更清晰,可讀細胞更多。
鏡檢
◆細胞單層、均勻分布。
◆背景乾淨,細胞形態完整,清晰可見。
◆明顯降低假陰性率的發生。
◆明顯增加癌前病變診斷率。
【操作步驟1】:婦科
1、樣本採集:用陰道窺器擴張陰道,充分暴露宮頸,用沾有生理鹽水的棉簽擦淨粘液(或血液),將宮頸採樣器(一次性宮頸刷)刷尖端插入宮頸口,單向轉動3周,確認採集到足夠細胞標本後,取出宮頸刷,將宮頸刷刷頭取下放入保存液瓶內,擰緊瓶蓋。
2、標籤填寫:在標籤上註明患者姓名、日期、編號後,將標簽揭下貼在保存液瓶身,送檢。
【注意事項】:
1、宮頸刷使用時應嚴格按照“保存液使用說明書”中要求,以便採集到足夠多的樣本細胞。
2、樣本放入保存液瓶後,保存期限不超過20天。
【操作步驟2】:病理科
1、將裝有細胞樣本的保存液小瓶充分搖勻後,倒入離心管中,離心2000轉/分鐘,離心5分鐘;
2、取出離心管倒掉上清液,加入5ml清洗液搖勻,離心2000轉/分鐘,離心5分鐘;
3、取出離心管倒掉上清液,用移液槍頭或滴管將管底沉澱物抽吸混勻,可以看到細胞呈懸浮狀,再用吸管或移液槍吸入一定數量的混懸液滴在玻片上,環行塗抹成一個直徑約18-20mm的圓。
4、自然晾乾或置於小於80℃烘箱中烘乾。
5、常規巴氏或HE染色,中性樹膠封片,鏡檢。
【注意事項】:
1、清洗液不能與保存液混合使用。
2、如樣本中黏液較多,應在每次離心前增加“振盪”10—20秒。