核酸分子雜交技術[生物學的基本技術]

核酸分子雜交技術[生物學的基本技術]
更多義項 ▼ 收起列表 ▲

由於核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛套用於基因克隆的篩選,酶切圖譜的製作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。

基本原理

具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按鹼基互補原成雙鏈。雜交的雙方是待測核酸序列及探針(probe),待測核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因組DNA和細胞總RNA。核酸探針是指用放射性核素、生物素或其他活性物質標記的,能與特定的核酸序列發生特異性互補的已知DNA或RNA片段。根據其來源和性質可分為cDNA探針、基因組探針、寡核苷酸探針、RNA探針等。

相關技術

Southern 雜交

Northern 雜交

原位雜交(ISH)

螢光原位雜交(FISH)

晶片雜交(屬於固一液相雜交)

每一種雜交技術都有其特點,因探針的選擇不同又可以衍生出許多相關的技術,在不同領域發揮著重要作用。

特點

(1)靈敏度高、特異性強;

(2)用於 DNADNA和RNARNA的定性、定量檢測。

用途

(1)檢測特異 DNADNA序列的拷貝數、特定DNADNA區域的限制性內切酶圖譜,判定基因的缺失、插入、重排現象;

(2)特異基因克隆的篩選;

(3)核酸序列的初略分析;

(4)PCR技術的分子基礎。

相關詞條

相關搜尋

熱門詞條

聯絡我們