柑桔潰瘍病菌:柑桔潰瘍病菌（拉丁名：Xanthomonas Campes -百科知識中文網

學名

Xathomonascampestrispv.citri(Hasse)Dye

異名

PseudomonascitriHasse;Bacteriumcitri(Hasse)Doidge;Bacilluscitri
(Hasse)Holland;Phytomonascitri(Hasse)Bergeyetal.;Xanthomonascitri(Hasse)Dowson;Xanthomonascitri(Hasse)Dowsonf.sp.aurantifoliaNamekata&Oliveira;Xanthomonascitri(exHasse)nom.rev.Gabrieletal.;Xanthomonascampestris(Pammel)Dowsompv.aurantifoliiGabrieletal.

英文名

Citruscanker;Bacterialcankerofcitrus;Citrusbacterialcanker(allstrains);Asiatiocanker;CankerA;CancrosisA;SouthAmericancanker;Falsecanker;CankerB;CancrosisB;Mexicanlimecancrosis;CankerC;Citrusbacteriosis;CankerD.2.分類地位　Bacteria，Gracilicutes

識別特徵

革蘭氏陰性菌，好氣性，短桿菌，極生蛋鞭毛，有莢膜，無芽胞，生長適溫為20—30℃，引起柑橘潰瘍病。

分布

Ａ菌系原產於亞洲，並廣泛分布，發現的國家有阿富汗、孟加拉、中國（福建、江西、四川、香港、台灣、中國東部）、印度、印度尼西亞、日本（包括沖繩島）、高棉、朝鮮、韓國、寮國、馬來西亞、馬爾地夫、緬甸、尼泊爾、巴基斯坦、菲律賓、沙烏地阿拉伯、斯里蘭卡、泰國、阿拉伯聯合酋長國、越南、葉門，非洲：（都是Ａ菌系）葛摩群島、象牙海岸、加彭、馬達加斯加、模里西斯、莫三比克（椐報導已經根除）、留尼旺、塞席爾、薩伊，北美洲∶墨西哥（Ｄ菌系，並已聲明消失了）、美國（1912年傳入佛羅里達、又蔓延到阿拉巴馬、喬治亞、路易斯安納，南卡羅亞納和德克薩斯；1933年佛羅里達根除，1947年全美國根除；1986年佛羅里達再次發現Ａ菌系，其消滅計畫正在實施；Ｅ菌系僅分布於美國佛羅里達州），中美洲和加勒比海地區∶貝里斯、瓜德羅普、馬提尼克、多米尼加、海地、St.Lucia、特立尼達和多巴哥（還沒確認，也沒有詳細資訊），南美洲∶阿根廷（Ａ菌系沿海岸線分布，Ｂ菌系僅局限於恩特富里奧斯南部的耒檬上），巴西（Ａ和Ｃ菌系、聖保羅的普魯登特總統城）、巴拉圭（東北部、北部和中西部；MatoGrossodelSur的東部、東南部和南部；聖卡塔琳娜州）、巴拉圭（Ａ、Ｂ和Ｃ菌系，東部和西部，查科中部）、烏拉圭（Ａ菌系正在根除之中，薩爾托－烏拉圭河北岸、派桑杜北部，Ｂ菌系在1985年消滅掉了），大洋洲∶聖延島、科科斯群島、斐濟、關島、馬里亞納群島、北部密克羅尼西亞、巴布亞紐幾內亞。柑桔潰瘍病已經在南非、紐西蘭和澳大利亞的商品柑桔產地根除了，但偶然可以看到。

寄主

主要是芸香科野生的和栽培的植物，在經濟上造成損失最大的是柑桔、甜橙、酸橙、來檬和柚，自然侵染僅發生在柑桔屬植物上（包括雜交品種和載培品種），也發生在枸桔(Ponirustrifoliata)、金桔(Fortunellamargarita)、Severiniabuxifolia和菲律賓木桔(Swingleaglutinosa)上。芸香科其他的寄主還包括Aurantioideae、Rutoideae和Toddalioideae亞科的一些植物，還報導了一種非芸香科寄主榔色木(Lansiumdomesticum，楝科)。Ｂ菌系與Ａ菌系有相同的寄主範圍，但是感染某些寄主並不嚴重，Ｃ和Ｄ菌系僅侵染來檬(Citrusaurantifolia)。巴西有報導說酸草(Trichachneinsularis)也是柑桔潰瘍病的寄主。

主要鑑定特徵

病害發生在葉、小枝、刺、老枝和果實上，引起落果和落葉。

葉片

葉片受害，開始於葉背出現黃色或暗黃色針尖大小的油漬狀斑點，逐漸擴大，同時葉片正背兩面均逐漸隆起，呈近圓形、米黃色病斑。以後病部表皮開裂，呈海綿狀，隆起更顯著，木栓化，表面粗糙、灰白色或灰褐色。病斑中心凹陷，周圍有黃色或黃綠色暈環，有些品種在緊靠暈環處常有褐色的釉光邊緣。到後期，病斑中央成火山口狀開裂。病斑大小隨品種而異，甜橙、臍橙和柚上的病斑較大，枸桔、桔和檸檬上的病斑較小。

枝梢

病斑特徵與葉片上基本相似，但更粗糙、隆起、黃褐色、圓形、木栓化，病斑中心呈火山口狀開裂，但無黃色暈環。發病嚴重時病斑密集，環繞枝梢，導致枝梢枯死、落葉。

果實

果實上病斑也與葉片上相似，但病斑較大，一般為4~5mm，最大可達2cm，木栓化程度比葉片上更為堅實，病斑中央火山口狀開裂更顯著。有些品種在病健交界處有深褐色的釉光邊緣。病斑只限於果皮上，永不穿透果皮。幼病果有樹脂狀分泌物、發病嚴重時引起早期落果。
潰瘍病與瘡痂病的區別，葉片上症狀的區別　潰瘍病的病斑較大、木栓化，葉片兩面均突起，中間稍凹陷，外圍有黃色暈環，病葉形狀基本正常；瘡痂病的病斑較小，病斑僅限於葉片的一面，病斑較不規則，外圍無黃色暈環，病葉常扭曲畸形。
潰瘍病與瘡痂病顆粒上症狀的區別　將病斑做切片於顯微鏡下檢查，潰瘍病的中果皮細胞膨大，外果皮破裂，病健組織之間一般無離層；瘡痂病則中果皮細胞增生，外果皮不破裂，病健組織之間有明顯的離層，病組織內可見到菌絲體或分生孢子。

生物學特性

革蘭氏陰性，好氣桿菌，0.5~0.75×1.5~2.0μm，極生單鞭毛。在2%蔗糖－蛋白腖瓊脂上產生大量黃色沾液，菌落黃色、圓形、表面光滑、稍隆起。能水解明膠、酪蛋白和澱粉，水解七葉苷，不能還原硝酸鹽。病菌生長適宜溫度為20~30℃，最低5~10℃，最高35℃，致死溫度為55℃10分鐘。最適酸度為pH6.6。柑桔潰瘍病菌有不同的致病型、血清型和遺傳型菌株，通常分成以下幾個菌系∶Ａ菌系（CBCD-A，亞洲型潰瘍病或真正潰瘍病型），分布於除地中海盆地和美國之外的大部分柑桔種植區；Ｂ菌系（CBCD-B，假潰瘍病型），分布於阿根延和烏拉圭；Ｃ菌系（CBCD-C，墨西哥來檬型），分布於巴西和巴拉圭；Ｄ菌系（CBCD-D）分布於墨西哥；Ｅ菌系（CBDB-E，柑桔細菌性葉斑病）分布於美國佛羅里達州。Gabriel等於1989年根據染色體DNA限制性酶切片段多形性的區別提出∶把Ａ菌系提升到種的水平，命名為Xanthomonascitri；把Ｂ、Ｃ、Ｄ菌系命名為Xanthomonascampestrispv.aurantifolia;把Ｅ菌系命名為Xanthomonascampestrispv.citrumelo.但是，1990年Vauterin等和1991年Young等提出不同意見，認為目前還不能這樣進行分類。
亞洲型的Ａ菌系毒力最強，分布最廣，侵染許多芸香科的寄主。Ｂ菌系雖然也侵染柑桔屬的寄主，但在阿根廷、烏拉圭和巴拉圭主要侵染檸檬，可能與降低致病力的Ａ菌系有關。在巴西，Ｃ菌系主要侵染來檬(C.aurantifolia)。柑桔潰瘍病的變異體與不同菌系型的病害有關，可以通過血清學、噬菌體分型、質粒DNA含量、染色體DNA指紋圖譜、限制性酶切片段的多型性、脂肪酸構成、同功酶含量和氨基肽酶活性來區分。

傳播途徑

病害遠距離傳播主要是苗木、砧木、接穗和其他繁殖材料。許多原來無病的地區，由於引進帶病的苗木、接穗等導致病害迅速蔓延。病果及沾污病菌的包裝物、運輸工具等也是遠距離傳播的一種途徑，但是還沒有引起病害流行的確切報導。一棵樹上或樹與樹之間的短距離傳播主要是通過風雨、昆蟲和農具等。

檢驗方法

免疫學方法、噬菌體分型、質粒DNA分析、染色體DNA指紋圖譜、限制性酶切片段的多型性分析和脂肪酸構成，已經用於病害診斷和病原菌鑑定。但是，柑桔潰瘍的確切鑑定，必須依靠對柑桔的致病性測定。

直觀檢查

在產地或引進的苗木中檢查一定數目的枝條、葉片或果實是否具有前述柑桔潰瘍病的典型病狀。如果有症狀，就從病斑直接分離病原菌。如果看不到症狀，就取一定的葉片做為一個樣品，用蛋白腖磷酸緩衝液充分沖洗。沖洗液在室溫下培養幾個小時，用細菌濾器濃縮，在培養基上分離或離體葉片接種，ELISA或IF檢驗。

分離培養

取小塊新鮮病組織（很難從木栓化的老病斑中分離到病原菌）於滅菌蒸餾水中攪碎製成菌懸液。然後將菌懸液或上述細菌濃縮在營養瓊脂培養基上劃線分離，根據柑桔潰瘍病菌菌落的形態特徵選取菌落。

離體葉片富集

柑桔潰瘍病菌能夠選擇性地用離體葉片或切碎的葉片組織富集，如葡萄柚、甜橙和墨西哥來檬等感病寄主的葉片。採集溫室栽培植株的幼頂葉，用自來水沖洗10分鐘，1%次氯酸鈉表面消毒1~4分鐘，在無菌條件下用滅菌蒸餾水徹底沖洗，然後針刺葉片背面造成傷口，背面朝上放於1%水洋菜培養皿中，每皿１張葉片，每張葉片上5~10個針眼，加10~20?l斑水抽提液，在25~30℃有光條件下培養5~7天，觀察傷口的反應，分離病原菌的方法同上。

致病性測定

接種感病寄主植物的種苗如葡萄柚、墨西哥來檬、枸桔和甜橙等，可測定出分離培養得到的細菌是否柑桔潰瘍病菌。把待測菌配成菌懸液，任選如下一種方法接種。
（１）選用充分展開而未角質化的葉片，用針刺傷，用消毒脫脂棉蘸上每毫升含106~7個細胞的菌液，貼在接種處，遮光保濕，一般4~5天即可發病。
（２）噴霧接種感病寄主幼苗的幼頂葉和枝條，壓力為170kpa，接種濃度為每毫升108個細胞，塑膠袋覆蓋保濕24~72小時。
（３）用離體葉片富集的方法，針刺接種葉片背面或用金鋼砂擦傷離體葉片，用接種原飽和棉球接種。柑桔潰瘍病Ａ菌系能產生典型的症狀，Ｂ、Ｃ和Ｄ菌系也能產生典型症狀，但有時只產生胼胝質狀的白色或灰白色組織，並破裂。Ｅ菌系（柑桔細菌性葉斑病菌）則產生如下症狀∶ａ．水漬狀擴展斑，接種針刺傷口周圍無壞死組織形成；ｂ．無水漬狀擴展斑，傷口周圍有明顯的褪綠組織（銹色或銹黃色）。用已知噬菌體鑑定病原菌　Ａ菌系對噬菌體CP1和cp2敏感，Ｂ菌系對cp3敏感，有明顯的溶菌作用，可用於病菌鑑定。但是，所有用於鑑定病原菌的噬菌體，一定要有已知的寄主範圍。血清學試驗　要事先分別製備出各個菌系代表性菌株的抗血清（一般用兔子），並用硫酸銨沉澱法製備出免疫球蛋白。ELISA∶用間接酶聯免疫吸附試驗進行測定，採用鹼性磷酸酶系統較好。免疫螢光（IF）　在多孔載玻片上每孔分別加25?l不同的待測細菌抗原製劑，空氣乾燥，慢慢過火焰固定。每個待測細菌要設幾個重複，同時要設標準菌株的陽性對照、陰性對照、正常血清（免疫前）對照和空白對照。抗血清要用PBS做適當稀釋，在同一載玻片上１孔加１個稀釋度（要選用３個稀釋度），每孔加25?l。在37℃保濕培養30分鐘，甩掉液滴，用PBS洗３次，每次泡５分鐘，輕輕吸乾。每孔再加適當稀釋的FITC標記的羊抗兔抗體25?l，37℃保濕培養30分鐘。用PBS重複上述沖洗過程，吸乾後加10?l0.1MpH7.6PBS－甘油，蓋上蓋玻片，在螢光顯微鏡下檢查。FITC在顯微鏡的紫外光下呈亮綠色螢光。若標準菌株陽性對照有螢光，而正常血清及PBS陰性對照沒有時，再檢查待測樣品細胞是否呈現螢光。基因DNA指紋圖譜　如果在菌種鑑定中需要進行菌系區分，可以做基因DNA指紋圖譜分析。方法是∶分別提取標準菌和待測菌的DNA，加限制性核酸內切酶分解，然後做聚丙烯醯胺凝膠電泳，用溴化乙錠染色、照相。待測菌與標準菌的DNA指紋圖譜進行比較。

有關檢疫規定

柑桔潰瘍病是中俄植檢植保協定中，俄方提出的危險性病害，在出口到俄方時應嚴格檢疫。在國內種苗調運中亦應加強檢疫，嚴禁從疫區調入繁殖材料，對外來的芸香科植物都要經過檢疫和消毒。柑橘潰瘍病病害預防與治療，靚果安300倍液加沃豐素600倍液噴霧，可治療可預防，方案都可適應。病害嚴重時期，同時加灌根方案，效果會更好。