噬菌體效價
又稱噬菌斑形成單位(pfu)數,指每毫升試樣中含有侵染性噬菌體的粒子數。測定方法有雙層平板法,其優點有:
1)彌補平板不平
2)噬菌斑位於同個平面,較清晰
3)上層為半固體培養基,有利噬菌體擴散
理論效價
基本簡介
理論效價是指抗生素純品的重量與效價單位的折算比率。一些合成、半合成的抗生素多以其有效部分的一定重量(多為1μg)作為一個單位,如鏈黴素、土黴素、紅黴素等均以純游離鹼1μg作為一個單位。
少數抗生素則以其某一特定的鹽的1μg或一定重量作為一個單位,例如金黴素和四環素均以其鹽酸鹽純品1μg為1單位。青黴素則以國際標準品——青黴素G鈉鹽0.6μg為1單位。
相關數值
鏈黴素鹼:1000單位/mg
鏈黴素硫酸鹽:798單位/mg
土黴素鹼:1000單位/mg
土黴素鹼:(含二分子結晶水) 927單位/mg
土黴素鹽酸鹽:927單位/mg
紅黴素鹼:1000單位/mg
紅黴素鹼:(含二分子結晶水) 953單位/mg
紅黴素乳糖酸鹽:672單位/mg
金黴素鹽酸鹽:1000單位/mg
四環素鹽酸鹽:1000單位/mg
四環素鹼:1082單位/mg
青黴素鈉:1670單位/mg
青黴素鉀:1598單位/mg
普魯卡因青黴素:1009單位/mg
苄星青黴素:(長效西林) 1211單位/mg
新黴素:1000單位/mg
卡那黴素:1000單位/mg
多粘菌素B:10000單位/mg
慶大黴素:1000單位/mg
巴龍黴素:1000單位/mg
計量單位
藥劑製品標示的和處方上開寫的抗生素重量單位數均指該抗生素的純品量。如硫酸鏈黴素1g,系指含有鏈黴素純品1g(1百萬單位),因此又稱為重量效價單位。如果處方開寫硫酸鏈黴素1g,需用稱重法取藥時,則應按原料實際含量,通過計算求得應稱取的重量。
在微生物學方面,效價(titre,titer)表示每毫升試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數,又稱噬菌斑形成單位數(plaque-forming unit,pfu)或感染中心數(infective centre)。測定效價常用且較精確的方法稱為雙層平板法(two layer plating method)
藥物分析
方法名稱: 門冬醯胺酶原料藥—效價測定—分光光度法
套用範圍: 本方法採用分光光度法測定門冬醯胺酶原料藥中門冬醯胺酶的效價。
本方法適用於門冬醯胺酶原料藥。
方法原理: 供試品經前處理後,置紫外可見分光光度計,於450nm波長處測定吸收度,計算出其效價。
試劑: 1.磷酸鹽緩衝液
2.門冬醯胺
3. 25%三氯醋酸溶液
4. 碘化汞鉀溶液
儀器設備: 紫外可見分光光度計
試樣製備: 1.磷酸鹽緩衝液:取0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液適量,用0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液調節pH值至8.0。
2.碘化汞鉀溶液:取碘化汞23g、碘化鉀16g,加水至100mL,臨用前以20%氫氧化鈉溶液等體積混合。
3.對照品溶液的製備:取經105℃乾燥至恆重的硫酸銨適量,精密稱定,用水製成0.0015mol/L的溶液。
4. 供試品溶液的製備:精密稱取供試品約0.1g,用磷酸鹽緩衝液製成每1mL中含門冬醯胺酶約5單位的溶液,即得供試品溶液。
註:“精密稱取”系指稱取重量應準確至稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 取試管3支(14cm×1.2cm),各加入用上述磷酸鹽緩衝液配製的0.33%門冬醯胺溶液1.9mL,於預熱3分鐘,分別於第一管(t0)中加入25%三氯醋酸溶液0.5mL,第2、3管(t)中各精密加入供試品溶液0.1mL,置37℃水浴中,準備反應15分鐘,立即於第一管(t0)中精密加入供試品溶液0.1mL,第2、3管(t)中各加入25%三氯醋酸溶液0.5mL,搖勻,分別作為空白反應液(t0)和反應液()。精密量取t0、t和對照品溶液各0.5mL置試管中,各加水7.0mL及碘化汞鉀溶液1.0mL,混勻,另取試管一支,加水7.5mL及碘化汞鉀溶液1.0mL作為空白對照管,室溫放置15分鐘,照紫外分光光度法,于波長450nm處測定吸收度A0、At和As,以At的平均值計算。
註:分光光度法應以配製供試品的同批溶劑為對照,採用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長作為測定波長,一般供試品的吸收度讀數,以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波頻寬度應小於供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇,應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。由於吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測定供試品的吸收度後應減去空白讀數,再計算含量
。