PK
尿苯丙酮酸定性
陽性見於苯丙酮尿症。常用於新生兒苯丙酮酸尿症的篩查,這種病可導致新生兒發生先天性痴呆。
應在新生兒出生30~60天內檢查。需要留取新鮮尿液,實驗前不要服用含酚類的藥物。
尿苯丙酮酸(PA)定性試驗標準操作程式生化檢驗
1 檢驗目的
苯丙酮酸是苯丙氨酸代謝產物。當肝臟缺乏苯丙氨酸羥化酶時,苯丙氨酸不能氧化成酪氨酸,苯丙氨酸積累,少部分由尿排出,大部分轉變為苯丙酮酸,由尿排出。因此檢測尿苯丙酮酸對苯丙酮酸尿症診斷提供依據。
2 檢測原理
尿中的苯丙酮酸在酸性條件下與三氯化鐵作用,生成鐵離子與苯丙酮酸烯醇基的藍綠色螯合物。
3 標本
3.1收集患者清晨10ml隨機尿液。
3.2標本採集後應立即送到臨床檢驗科體液檢驗室。
3.3樣品在收集過程中應放在陰涼處保存。不能及時測定的標本應於2℃~8℃冰櫃保存。
4 試劑
4.1三氯化鐵溶液:稱取三氯化鐵(FeCl3.6H2O)10g,加水至100ml。
4.2磷酸鹽沉澱劑:稱取氯化鎂(MgCl2.6H2O)2.20g,氯化銨(NH4Cl)1.40g,濃氨液2ml,加水至1000ml。
5 操作步驟
5.1尿液4ml加磷酸鹽沉澱劑1ml,混勻,靜置3分鐘,如出現沉澱,可用濾紙過濾或離心除去。
5.2濾液中加入濃鹽酸2~3滴和三氯化鐵溶液2~3滴,每加1滴立即觀察顏色變化。
5.3結果觀察:如尿液顯藍綠色並持續2~4分鐘即為陽性。如綠色很快消失,提示可能有尿黑酸,可報告苯丙酮酸定性試驗陰性。
6 質量控制
試驗操作過程中,每次應做一次正常對照。
7 干擾因素
7.1磷酸鹽對本試驗有干擾,應先將其改變成磷酸銨鎂沉澱後除去。尿液4ml加磷酸鹽沉澱劑1ml,混勻,靜置3分鐘,如出現沉澱,可用濾紙過濾或離心除去。
7.2尿液標本要新鮮,因苯丙酮酸在室溫下不穩定,故留取標本後應立即測定。如不能及時檢查應加少許硫酸防腐,並置於冰櫃冷藏保存。檢查前,讓標本恢復到室溫後再進行檢查。
7.3除含有酚類藥物(如水楊酸製劑)、氯丙嗪物質外,尿液標本中許多物質(如尿黑酸、乙醯乙酸、丙酮酸、氨基比林等)可與三氯化鐵發生呈色反應,雖然顯色不同,但仍可干擾本實驗。因此,試驗前應停用此類藥物。
8 生物參考值區間
本法的健康人群尿苯丙酮酸定性試驗為陰性。
9 實驗室解釋
尿苯丙酮酸定性試驗陽性見於:苯丙酮酸尿症(遺傳病);酪氨酸血症;苯丙氨酸代謝的其他缺陷如暫時性苯丙酮酸尿症、新生兒高苯丙氨酸血症。
10 異常結果處理
尿苯丙酮酸定性試驗結果異常需與臨床診斷相符合,不符合的結果應複查。
11 報告時間與標本保存
11.1尿苯丙酮酸定性試驗4小時出結果;病房患者的檢驗結果報告單,在24小時內發回科室;門診病人的檢驗結果報告單,在收到標本的第二天下午送到化驗單領取處。
11.2尿苯丙酮酸定性試驗檢查過的標本不保存。
12 操作性能
尿苯丙酮酸定性試驗的敏感度為0.2mg/ml。尿苯丙酮酸定性試驗是一個定性試驗,目前還沒有試驗其它性能指標。