定點誘變

基因定點誘變 （Site-directed mutagenesis），是在體外特異性地取代、插入或缺失DNA序列中任何一個特定鹼基的技術,包括盒式取代誘變、寡核苷酸引物誘變及PCR定點誘變等。

基本信息

定點誘變：可將病毒的隨機突變納入人們的規劃之中，這一技術可將DNA基因組或RNA基因組的cDNA任何既定部位的核苷酸替換，或者使之缺失，或者插入另一段核苷酸。

方法

為達到這一目的，一般用分子雜交技術，即將含有特定位點變異的寡核苷酸通過分子雜交，導入載體DNA，再轉化到載體中擴增雜交DNA，最後根據設計的分子標記，在一定條件下篩選突變株。由於PCR及核苷酸測序技術的日益普及，定點誘變在病毒學的套用更為方便，它可用於確定病毒基因的致病作用，也可用於研製具有免疫學標記的弱毒病毒疫苗等，受到普遍重視。許多病毒還可作為定點誘變所需的載體，根據不同目的可選用痘病毒、腺病毒、皰疹病毒、乳頭瘤病毒、披膜病毒等。

在事先不了解特定核苷酸序列功能的情況下，通過定點誘變產物的分析，推測該序列編碼的蛋白質性質及功能，這種利用基因序列資料反過來研究動物體內的遺傳學效應的手段，稱之為 反求遺傳學，廣泛套用於病毒的遺傳變異研究。