朱古力培養基
【用途】主要用於嗜血桿菌的分離,亦可用於奈瑟菌的增菌培養。
【原理】流感嗜血桿菌培養時,需要依賴血液中的X及V因子方能生長繁殖,當培養基加熱至80~90℃時,可使血液中的紅細胞破裂,以利於嗜血桿菌,奈瑟菌等的生長培養。凡疑有這些菌種存在的標本,均應接種朱古力平板。血液標本培養,增菌後又細菌生長,若移種朱古力平板上,有利於分離更多的細菌。
【成分】牛肉浸出液1L蛋白腖10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維馬血、羊血或兔血100mlpH7.2~7.4
【製備】將前四項成分混合,加熱溶化,校對pH,高壓滅菌(121℃15min)後在80~90℃以無菌方法加入血液,搖勻後置90℃水浴中。維持該溫度15min,使之呈朱古力色取出,至室溫冷至約50℃,傾制平板 。凝固後,抽樣置於35℃培養18~24h,如無細菌生長,冷藏備用。
【接種】將可疑標本直接劃線接種於該培養基上,置35℃普通培養或置含5%~10%二氧化碳環境培養18~24h,取出觀察細菌生長狀況。
【觀察結果】流感嗜血桿菌菌落微小(0.8mm),無色透明、光滑整齊、似露滴狀,48h後達1.5mm,從血液或腦脊液中分離的菌落往往形成液狀,菌落較大,老培養物菌落中心呈凹陷。
【質量控制】流感嗜血桿菌ATCC10211,生長良好,菌落典型。肺炎鏈球菌,ATCC6305,生長良好,菌落典型。
【保存】置冰櫃,1周內用完。
血瓊脂培養基
【用途】適用於各類需氧及兼性厭氧細菌生長,一般細菌學檢驗標本的分離培養、溶血鑑別及菌種保存
【原理】羊血或兔血時細菌生長繁殖的良好營養物質。在45℃~50℃的基礎培養基中加加入血液(5~10%)可以保存血液中某些不耐熱的生長因子,同時血細胞不被破壞。若將NaCl的濃度提高到0.85%,則可使血平皿經35℃18~24h後色澤仍然鮮艷。在血平板上除可以觀察菌落的形態外,還可以判斷溶血的情況:菌落周圍的培養基內紅細胞完全破壞為溶血。菌落周圍呈綠色為ɑ溶血。溶血的情況可以顯微鏡下用低倍鏡觀察
【成分】牛肉浸出液1L蛋白腖10氯化鈉5瓊脂15無菌脫纖維羊血60ml pH7.2~7.4
【製備】將前四項成分混合,加熱溶化,校對pH,置三角瓶內,高壓滅菌(121℃15min)後冷至約50℃ ,加入無菌纖維羊血,旋轉式充分搖勻後傾平板。血瓊脂層厚4mm。凝固後,抽樣置於35℃培養18~24h,如無菌生長,冷藏備用。
【接種】取標本增菌培養物或純培養物劃線接種到平板上,置35℃培養1~2d,觀察結果
【觀察結果】在血平板上除可以觀察菌落的形態外,還可以判斷溶血的情況:菌落周圍的培養基內紅細胞完全被破壞為溶血,菌落周圍呈綠色為ɑ
【質量控制】化膿性鏈球菌,ATCC19615,生長良好,-溶血。肺炎鏈球菌,ATCC6303,為ɑ溶血。表皮葡萄球菌,ATCC12228,生長良好,不溶血。
營養肉湯
【用途】用於一般細菌的增加培養,加入1%的瓊脂粉亦可作營養瓊脂。
【原理】該培養基含有氮及微量無機鹽,適宜一般細菌的生長繁殖,因此是最基礎的培養基。
【成分】牛肉浸液1L蛋白腖10氯化鈉5pH7.2~7.4(牛肉浸液可用3.0g牛肉膏和1L蒸餾水代替)
【製備】上述各成分混合溶解,校正...