配製方法
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩衝液(簡稱為PBS-T)配製方法為:
稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
氯化鉀(KCl)0.2g,
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然後加入濃鹽酸調pH至7.4,最後定容到1L
保存方法
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然後加入濃鹽酸調pH至7.4,最後定容到1L。高溫高壓滅菌後置於4攝氏度冰櫃保存待用。
PBS緩衝液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L
PBS緩衝液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。
1x PBS緩衝液就是0.01M的磷酸鹽緩衝液,可直接使用。2x PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.1M的PBS一般不用來配置緩衝液,用於其它用處。
作用
PBS是磷酸緩衝鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物製劑都要用它來稀釋。
原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩衝作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應,所以使用PBS是首選。
PBS也不是萬能的,有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩衝液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。