PCR引物設計

PCR引物設計原理

PCR引物設計 的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板DNA序列。引物的優劣直接關係到PCR的特異性與成功與否。

PCR引物的設計原則

1. 引物套用核酸系列保守區內設計並具有特異性。

2.產物不能形成二級結構。

3. 引物長度一般在15~30鹼基之間。

4. G+C含量在40%~60%之間。

5. 鹼基要隨機分布。

6. 引物自身不能有連續4個鹼基的互補。

7. 引物之間不能有連續4個鹼基的互補。

8. 引物5′端可以修飾。

9. 引物3′端不可修飾。

10. 引物3′端要避開密碼子的第3位。