實驗原理
高碘酸氧化是一種選擇性的氧化反應,它只能作用於多糖分子中連二羥基或連三羥基處。當連二羥基的C-C鍵被氧化斷開後,產生相應的醛;當連三羥基的C-C鍵被氧化斷開後,產生甲酸及相應的醛。此反應定量進行,每斷開1molC-C鍵,消耗1mol高碘酸,每生成1mol甲酸對應消耗2mol高碘酸。因此,通過測定高碘酸消耗量及甲酸生成量,便可以判斷糖苷鍵的位置、直鏈多糖的聚合度及支鏈多糖的分支數目等。
作用
高碘酸氧化產物經硼氫化鉀還原,得到的多糖醇用稀酸在溫和條件下水解,可發生特異性降解,稱為Smith降解。Smith降解的特點是只打斷被高碘酸破壞的糖苷鍵,而未被高碘酸氧化的糖殘基仍連在糖鏈上。這樣,多糖醇經Smith降解,就可以得到小分子的多元醇和未被破壞的多糖或寡糖片斷,對這些產物進行分析,便可以推斷出糖苷鍵的鍵型及其位置。