操作方法
1.固定
在骨髓塗片上滴加乙醇,固定5分鐘,流水沖洗,乾燥。
2.反應
將過碘酸溶液滴加在血膜上室溫氧化10分鐘,流水沖洗,乾燥。
3.染色
將雪夫試劑滴加在血膜上作用30分鐘,流水沖洗,乾燥。
4.復染
用甲基綠溶液復染5~10分鐘,流水沖洗,乾燥後鏡檢。
正常參考值
1.結果判斷
有紅色沉澱物為陽性,不同細胞系列陽性結果標準不一致。
2.正常細胞反應結果
(1)粒細胞系統:原始粒細胞呈陰性或陽性,陽性程度隨細胞成熟程度增強,常呈彌散狀陽性。嗜酸性顆粒陰性,顆粒間質呈陽性;嗜鹼性顆粒呈陽性,顆粒間質陰性。
(2)單核細胞系統:呈陰性或陽性,陽性常為細顆粒狀。
(3)淋巴細胞系統:正常淋巴細胞陽性率<20%,陽性為顆粒狀。
(4)紅細胞系統:均呈陰性。
(5)巨核細胞系統:各期巨核細胞和血小板均呈陽性,呈顆粒狀、塊狀。
(6)臣噬細胞可呈陽性,漿細胞可呈陰性或陽性。
臨床意義
根據反應的陽性程度及陽性特點可進行紅細胞系統、白細胞系統等疾病的輔助診斷及鑑別診斷,其陽性特點意義更大。
1.白血病類型鑑別
急性粒細胞白血病原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應,陽性以瀰漫性為主;急性淋巴細胞白血病原幼淋巴細胞多呈塊狀陽性反應,也有少數呈陰性反應;急性單核細胞白血病原幼單
核細胞呈陽性反應,其顆粒細小,彌散分布。
2.淋巴系統增生疾病鑑別
淋巴系統惡性增生如惡性淋巴瘤、霍奇金病、慢性淋巴細胞性白血病、急性淋巴細胞性白血病時,其淋巴細胞陽性反應均有明顯增高,呈粗顆粒狀或塊狀。傳單時淋巴細胞的PAS輕度增高,而其他病毒感染時常在正常範圍。
3.幼紅細胞增生疾病鑑別
紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合徵中其幼紅細胞反應明顯增強,呈均勻紅色或狀。缺鐵性貧血、地中海貧血、溶血性貧血及巨幼細胞性貧血時幼紅細胞PAS反應多為陰性或僅可輕度增高。
4.確定巨核細胞
發育成熟的巨核細胞此反應多呈陽性,小巨核細胞時亦常呈陽性反應,故為確認小巨核細胞最常用手段之一。
5.細胞鑑別
鑑別巨核細胞和Reed-Sternberg細胞,巨核細胞呈強陽性,Reed-Sternberg細胞呈陰性或極弱陽性反應;鑑別高雪氏細胞和尼曼-匹克細胞,高雪氏細胞呈強陽性尼曼-匹克細胞常為陰性或極弱陽性。