原子吸收分光光度法
原理
樣品經消化後，導入原子吸收分光光度計中，經火焰原子化後，吸收波長324.8nm的共振線，其吸收量與銅含量成正比，與標準曲線比較定量。
試劑
（1）混合酸：硝酸：高氯酸=5:1。
（2）0.5mol/L硝酸：量取32mL硝酸，加入適量的水中，置入容量瓶並用水稀釋並定容至1000mL。
（3）銅標準儲備液：精確稱取1.000g金屬銅（純度>99.99%），加適量硝酸（1+1）使之溶解，移入1000mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，儲存於聚乙烯瓶內，置冰櫃保存。此溶液每毫升相當於1mg銅。
（4）銅標準使用液：
①標準使用液配製：吸取銅標準儲備液10.0mL置於100mL容量瓶中，用0.5mol/L硝酸溶液定容至刻度，該溶液每毫升相當於100ug銅。
②標準曲線製備：
吸取0.0、0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的銅標準使用液，分別置於50mL容量瓶中，以硝酸（0.5mol/L）稀釋定容至刻度，搖勻。此標準系列含銅分別為0.00、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ug/mL。
儀器
（1）原子吸收分光光度計。
（2）儀器條件：測定波長324.8nm，燈電流、狹縫、空氣乙炔流量及燈頭高度均按儀器說明書調至最佳狀態。
操作步驟。
1.樣品濕法消化
固體樣品：精確稱取有代表性樣品2-5g於150mL三角燒瓶中，放入幾粒玻璃珠，加入混合酸20-30mL，蓋一玻片放置過夜。次日於電熱板上逐漸升溫加熱，溶液變成棕紅色，應注意防止炭化。如發現消化液顏色變深，再滴加濃硝酸，繼續加熱消化至冒白色煙霧，取下放冷後加入約10mL水繼續加熱消化至冒白煙為止。放冷後用去離子水洗入25mL的刻度試管中，同時做試劑空白。
液體樣品：吸取有代表性樣品10-20mL於150mL三角燒瓶中，加入幾粒玻璃珠。酒類和碳酸類飲品應於電熱板上小火加熱除去酒精和二氧化碳，然後加入20mL混合酸，在於電熱板上加熱至顏色由深變淺，至無色透明冒白煙時取下，放冷後加入10mL水繼續加熱消化至冒白煙為止。冷卻後用去離子水洗入25mL的刻度試管中，同時做試劑空白。
2.樣品乾法灰化
稱取製備好的代表性樣品2.0-5.0g置於50mL瓷坩堝中，加5mL硝酸，放置半小時後，於電爐上小火蒸乾，繼續炭化至無煙後移入馬弗爐中，500℃灰化約1h後取出，放冷後再加1mL硝酸濕潤灰分並小火蒸乾。再移入馬弗爐灰化約0.5h，冷卻後取出，加0.5mol/L的硝酸，溶解殘渣並移入25mL的刻度試管中，再用0.5mol/L的硝酸反覆洗滌坩堝，洗液併入容量瓶中，並稀釋至刻度，混勻備用，同時做試劑空白。
3.樣品測定
將試劑空白液和處理好的樣品溶液分別導入火焰原子化器進行測定。記錄其對應的吸光度，與標準曲線比較定量。
結果計算
食品中銅的測定式中：C為樣品液中銅的含量（ug/mL）；
C為試劑空白液中銅的含量（ug/mL）；
V為樣品處理液中總體積（mL）；
m為樣品質量（g）。
允許偏差
相對標準偏差小於5%。
二乙基二硫代氨基甲酸鈉光度法（DDTC法）
原理
在鹼性溶液中，銅離子與二乙基二硫代氨基甲酸鈉作用，生成黃色的絡合物，用有機溶劑萃取後比色。
試劑
（1）20%檸檬酸鈉溶液；0.1%二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液（簡稱DDTC-Na溶液），四氯化碳。
（2）0.1%麝香草酚藍：溶解0.1g麝香草酚藍於4.3mL 0.05mol/L氫氧化鈉溶液中，置入100mL容量瓶中用水定容至刻度。
（3）銅標準溶液
①標準溶液配製：準確稱取0.10g化學純銅，溶解於10mL 1:1硝酸中，在水浴上蒸發至兩2mL，移入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。此標準溶液每毫升相當於1mg銅。使用時用水稀釋配製成每毫升相當於1ug的銅。
②標準曲線的繪製：準確吸取每毫升相當於1ug銅的標準溶液0.00、5.00、10.00、15.00、20.00、25.00mL於125mL分液漏斗中，加入檸檬酸溶液10mL、麝香草酚藍指示劑3滴，用1:1氟水調節溶液由黃色到微藍色（此時溶液pH為9.0-9.2），用水調節至從體積為40mL，加入DDTC-Na溶液2mL，四氯化碳10mL，充分振搖1min，靜置分層。四氯化碳層通過棉花過濾於乾燥的比色皿中，在分光光度計440nm波長下測定吸光度，繪製標準曲線。
儀器
分光光度計。
操作方法
1.樣品處理
（1）乾法處理：稱取有代表性樣品20.0g於瓷坩堝中，再微火上炭化後，移入500℃高溫電爐中灰化成白色灰燼。難灰化的樣品可加入10%硝酸鎂液2mL作助灰劑。如果樣品在高溫爐中不易燃燒成灰白色時，可在冷卻後於坩堝中加濃硝酸數滴使殘渣濕潤，蒸乾後再進行灼燒。灼燒後灰分用1:1鹽酸2mL、水5mL加熱煮沸，冷卻後移入100mL容量瓶中，並用水稀釋至刻度。必要時進行過濾。
（2）濕法處理：稱取有代表性樣品20.0g於500mL凱氏燒瓶中，加入濃硫酸10mL、濃硝酸20mL，先以小火加熱，待劇烈作用停止後，加大火力並不斷滴加濃硝酸直至溶液透明不在轉黑為止。每當消化溶液顏色變深時，應立即添加硝酸，否則溶液難以消化完全。待溶液不再轉黑後，繼續加熱數分鐘至有白煙逸出，冷卻，加入10mL水，繼續加熱至冒白煙為止，冷卻。將內容物移入100mL容量瓶內，並以水稀釋至刻度，混勻備用。
2.樣品分析
準確吸取相當於1.0或0.5g樣品的溶液，加入檸檬酸鈉溶液10mL、麝香草酚藍指示劑3滴，以下操作同標準曲線的繪製，同時做一空白。根據測得的吸光度從標準曲線查出銅的含量
結果計算
食品中銅的測定m為從標準曲線中查得的銅的質量（ug）；
m為吸取樣品的質量（g）。
說明
（1）鋅、錫在鹼性溶液中不產生干擾，因形成氫氧化物沉澱被除去。
（2）鐵對本法有干擾，加入檸檬酸後，使它保留在溶液中不被有機試劑提取。
吡啶偶氮間苯二酚光度法
原理
在酸性溶液中，銅與吡啶偶氮間苯二酚生成棕紅色絡合物，其顏色強度與溶液中銅的含量成正比例關係。
試劑
（1）1mol/L硫酸溶液；5%氟化氫銨溶液。
（2）0.05%4-（2-吡啶偶氮）間苯二酚溶液（PAR）；稱取0.5g試劑（PAR）用少量水溶解後，用水稀釋至1000mL。
（3）銅標準溶液
①標準溶液配製：與DDTC法相同，使用時配製成每毫升相當於5ug銅標準溶液。
②標準曲線的繪製：準確吸取每毫升相當於5.0ug銅標準溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0mL分別置於25mL容量瓶中，加水至10mL，加入2滴氟化氫銨、4滴1mol/L硫酸，以下按樣品測定方法進行，測得銅的吸光度，繪製標準曲線。
儀器
分光光度計
操作方法
1.樣品處理
與DDTC光度法相同
2.樣品測定
吸取樣品溶液5-10mL於25mL容量瓶中，加入2滴氟化氫銨、4滴1mol/L硫酸，用1:1氟水調節溶液pH為2左右，然後加入1mL0.05%4-（2-吡啶偶氮）間苯二酚溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，靜止5min後，用分光光度計對540nm處測定吸光度，並從標準曲線中查出樣品中銅含量。
計算
食品中銅的測定式中：m為從標準曲線中查得的銅的質量（ug）；
m為所取樣品的質量（g）。
說明
（1）加入氟化氫銨是為了隱蔽鐵、鉛和錳離子的干擾。
（2）硝酸根、硫酸根對本法無干擾。
